Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22823-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测     货号22823 货号 22823 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 503 Em (nm) 525
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 3/7的活性而用于细胞凋亡检测的。因为Caspase-3 (CPP32/apopain)在细胞凋亡的起始过程中发挥着重要作用,因此其作为一个值得信赖的细胞凋亡指示剂广泛地被大家所接受。Caspase 3具有特异性的底物多肽识别序列,即天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)。本试剂盒用TF2-DEVD-FMK作为荧光指示剂,用于Caspase-3/7活性的检测。TF2-DEVD-FMK具有细胞渗透性、无细胞毒性,在凋亡细胞中能与活化的casepase-3/7进行不可逆的结合。一旦与Caspases结合,这种绿色荧光染料会被保留在细胞中。这种结合可以阻止Caspases进一步的催化作用,但是不会使细胞凋亡的进程停止。这种试剂将在添加介质之后的15分钟内与有活性的Caspase酶进行反应。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它用来对凋亡细胞中绝大多数活化的Caspases的活性进行定量检测,或者用来筛选Caspases抑制剂。这种绿色荧光可以通过流式细胞仪对被激活的Caspases进行直接检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激发
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞,密度为5×105至1×106个细胞/ mL
2.将1μL500XTF2-DEVD-FMK加入0.5mL细胞溶液中
3.在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-4小时
4.将细胞沉淀并将细胞重悬于0.5mL测定缓冲液或生长培养基中
5.使用具有FL1通道的流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.对于每个样品,准备细胞在0.5 mL温热培养基或您选择的缓冲液中,密度为5×105至1×106个细胞/ mL。注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段所需的时间以诱导细胞凋亡,并产生阳性和阴性对照。

3.将1μL500XTF2-DEVD-FMK(组分A)加入处理过的细胞中。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-4小时。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用TF2-DEVD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.将细胞洗涤并旋转两次。将细胞重悬于0.5mL测定缓冲液或生长培养基中。注意:TF2-DEVD-FMK是荧光的;因此,清除任何未结合的试剂以去除背景是很重要的。

6.用DNA染色标记细胞(如碘化丙锭或7-AAD用于死细胞)。

7.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测荧光强度。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测     货号22823

图1.使用Jurkat细胞中的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒检测caspase 3/7活性。 加入喜树碱诱导TF2-DEVD-FMK荧光强度。 将Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中不用(蓝色)或用20μM喜树碱(红色)处理4-5小时,然后用TF2-DEVD-FMK染色1小时。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

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Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 Cat#22797

说明书
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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22849-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光     货号22849 货号 22849 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 50 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

DNA片段化代表晚期细胞凋亡的特征。凋亡细胞中的DNA断裂可以通过末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测。 TUNEL测定法依赖于DNA中存在的缺口,该缺口可通过TdT进行鉴定,TdT是一种酶,该酶催化添加标记物的dUTP。现有的所有TUNEL分析均包含剧毒的甲胂酸钠,这可能会诱导细胞凋亡并降低DNA的产生和DNA链。我们的Cell Meter TUNEL细胞凋亡测定试剂盒使用了不含甲胂酸钠的专有缓冲系统。该试剂盒基于将我们专有的荧光染料掺入凋亡过程中形成的DNA片段中。该测定法经过优化,可直接检测分离的或贴壁细胞中的细胞凋亡,而无需使用任何抗体。该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。适用于荧光酶标仪,荧光显微镜或流式细胞仪。在流行的FITC通道上可以轻松检测到其信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC滤波片
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞。
  2. 与TUNEL工作溶液在37°C下孵育30分钟至1小时。
  3. 洗涤细胞。
  4. 用4%甲醛(可选)固定细胞。
  5. 用带FITC滤光片的荧光显微镜或带FITC通道的流式细胞仪。读取Ex / Em = 490/525 nm(截止= 515 nm)处的荧光强度。

 

溶液配制 

工作溶液配制

将0.5μL的100X Tunnelyte Green(组分A)添加到50μL的反应缓冲液(组分B)中,使总体积为50.5μL的TUNEL工作溶液。 避光。 注意:应单独评估每个细胞系,以确定最佳细胞密度。

 

实验步骤

1.根据您的特定协议,将细胞培养至最佳密度以诱导凋亡。 对于在96孔板培养物中生长的贴壁细胞,我们建议大约30,000至50,000个细胞/孔,对于非贴壁细胞,建议大约1至2 x 106细胞/ mL。 同时,在每种标记条件下,用诱导群体相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群体。 注意:我们用100 nM-1 µM星形孢菌素处理HeLa细胞4小时,以诱导细胞凋亡。

2.染色和固色:

2.1取出细胞培养基。
2.2向每个样品中添加50µL TUNEL工作溶液。
2.3在37°C下孵育30-60分钟。
2.4除去TUNEL工作溶液,并用200 µL /孔的PBS洗涤细胞1-2次。
2.5向每个样品中添加100uL反应缓冲液(组分B)。
2.6使用Ex / Em = 490/525 nm(cut off= 515 nm)的荧光酶标仪,带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有FITC通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.7可选:从步骤5中移出反应缓冲液,并向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4%甲醛固定缓冲液(未提供)。注意:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例如2X106细胞/ mL)的4%甲醛固定液。
2.8在室温下将平板孵育20至30分钟。
2.9去除固定剂。
2.10用PBS洗涤细胞2-3次,并用100µL PBS /孔/ 96孔板替换。
2.11使用Ex / Em = 490/525 nm(cut off= 515 nm)的荧光酶标仪,带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有FITC通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.12可选:用1X Hoechst(组分C)在Ex / Em = 350/460 nm处染色细胞核,以进行图像分析

 

参考文献

Vaccarin alleviates hypertension and nephropathy in renovascular hypertensive rats
Authors: Cai, Weiwei and Zhang, Zhenpeng and Huang, Yiqi and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Experimental and Therapeutic Medicine (2018): 924–932

CO-releasing molecules-2 attenuates ox-LDL-induced injury in HUVECs by ameliorating mitochondrial function and inhibiting Wnt/β-catenin pathway
Authors: Sun, Hai-Jian and Xu, Dong-Yan and Sun, Yi-Xin and Xue, Tong and Zhang, Chen-Xing and Zhang, Zhi-Xuan and Lin, Wei and Li, Ke-Xue
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Salusin-β mediates high glucose-induced endothelial injury via disruption of AMPK signaling pathway
Authors: Zhu, Xuexue and Zhou, Yuetao and Cai, Weiwei and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Vaccarin protects human microvascular endothelial cells from apoptosis via attenuation of HDAC1 and oxidative stress
Authors: Zhu, Xuexue and Lei, Yueyue and Tan, Fanggen and Gong, Leilei and Gong, Haifeng and Yang, Wei and Chen, Ting and Zhang, Zhixuan and Cai, Weiwei and Hou, Bao and others
Journal: European Journal of Pharmacology (2017)

Axl is required for TGF-β2-induced dormancy of prostate cancer cells in the bone marrow
Authors: Yumoto, Kenji and Eber, Matthew R and Wang, Jingcheng and Cackowski, Frank C and Decker, Ann M and Lee, Eunsohl and Nobre, Ana Rita and Aguirre-Ghiso, Julio A and Jung, Younghun and Taichman, Russell S
Journal: Scientific Reports (2016)

Growth Arrest-Specific 6 (GAS6) Promotes Prostate Cancer Survival by G1 Arrest/S Phase Delay and Inhibition of Apoptotic Pathway During Chemotherapy in Bone Marrow
Authors: Lee, Eunsohl and Decker, Ann M and Cackowski, Frank C and Kana, Lulia A and Yumoto, Kenji and Jung, Younghun and Wang, Jingcheng and Buttitta, Laura and Morgan, Todd M and Taichman, Russell S
Journal: Journal of cellular biochemistry (2016)

RFX1–dependent activation of SHP-1 induces autophagy by a novel obatoclax derivative in hepatocellular carcinoma cells
Authors: Su, Jung-Chen and Tseng, Ping-Hui and Hsu, Cheng-Yi and Tai, Wei-Tien and Huang, Jui-Wen and Ko, Ching-Huai and Lin, Mai-Wei and Liu, Chun-Yu and Chen, Kuen-Feng and Shiau, Chung-Wai
Journal: Oncotarget (2014): 4909

In situ detection of apoptosis by the TUNEL assay: an overview of techniques
Authors: Loo DT.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 3

Testicular apoptosis after dietary zinc deficiency: ultrastructural and TUNEL studies
Authors: Kumari D, Nair N, Bedwal RS.
Journal: Syst Biol Reprod Med (2011): 233

In situ localization of apoptosis using TUNEL
Authors: Hewitson TD, Darby IA.
Journal: Methods Mol Biol (2010): 161

说明书
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Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 货号22813-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光     货号22813 货号 22813 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7,起始Caspase级联反应。在正常发育的中枢神经系统中,活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9具有底物的选择性,其识别底物基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用Ac-LEHD-AMC作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割AMC产生强蓝色荧光,eX/eM = 350/450 nm。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分。该实验稳定、快速且适应高通量筛选的需求。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。很多实验室利用本试剂盒进行高通量抑制剂的筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 375nm
发射: 435nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 顶或底读模式

产品说明书

样品实验分析

简要概述

用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
加入等体积的Caspase 9工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
在室温下孵育30-60分钟
监测Ex / Em = 375/435 nm处的荧光(截止= 420 nm)

 

工作溶液配制

将50μLCaspase9底物(组分A)加入10mL测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 9工作溶液。 避光。有关细胞样品制备的指南,请点击查看

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5%CO2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间(对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞,4-6小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Caspase 9工作溶液。

4.将Caspase 9工作溶液板在室温下孵育至少1小时,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 9工作溶液前10分钟,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂,以确认对胱天蛋白酶9样活性的抑制作用。

5.将细胞板(特别是非贴壁细胞)以800rpm离心2分钟。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 375 / 435nm(截止= 420nm)下监测荧光强度。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光     货号22813

图1.使用Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 9活性 蓝色荧光 。 将Jurkat细胞以300,000个细胞/90μL/孔接种在Costar黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞4小时。 加入半胱天冬酶9工作溶液(100μL/孔)并在室温下温育1小时。 使用FlexStation 酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 375 / 435nm(截止值= 420nm)下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

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说明书
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 .pdf

Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光* 货号22851-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光*

Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光*

Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光*    货号22851 货号 22851 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 4992
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22851

产品名称:Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光*

规格:25 Tests

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

Ex(nm):498

Em(nm):517

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品介绍

Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡检测试剂盒提供了一种强大荧光检测工具,可方便地检测由凋亡引起的DNA片段化。该检测方法是一种非放射性,简单,准确和快速的方法,可通过对DNA片段进行成像来检测固定细胞和组织中的细胞凋亡。TUNEL分析使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)催化在片段化DNA的3′-羟基末端掺入荧光素12-dUTP。通过荧光显微镜或流式细胞仪(用530/30 nm发射滤光片在488 nm激发)分析荧光素标记的DNA。该试剂盒可用于检测固定细胞和福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片的凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒。 

 

图示

 

Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光*    货号22851

图1.固定HeLa细胞,并在37°C下用或不使用DNAse处理60分钟。然后将细胞用Cell Meter TUNEL细胞凋亡检测试剂盒染色。DNA链断裂在DNAse处理的细胞中显示出强烈的荧光染色。使用FITC滤光片组通过荧光显微镜检测信号。

 

 

参考文献

Exosomes derived from adipose tissue, bone marrow, and umbilical cord blood for cardioprotection after myocardial infarction.
Authors: Xu, Huiyu and Wang, Zhongchao and Liu, Longmei and Zhang, Baoxia and Li, Bao
Journal: Journal of cellular biochemistry (2020): 2089-2102

Improvement of in situ Follicular Activation and Early Development in Cryopreserved Human Ovarian Cortical Tissue by Co-Culturing with Mesenchymal Stem Cells.
Authors: Hosseini, Marzieh and Salehpour, Saghar and Ghaffari Novin, Marefat and Shams Mofarahe, Zahra and Abdollahifar, Mohammad-Amin and Piryaei, Abbas
Journal: Cells, tissues, organs (2020): 1-11

Brain tissue saving effects by single-dose intralesional administration of Neuroprotectin D1 on experimental focal penetrating brain injury in rats.
Authors: Berg, Rand Wilcox Vanden and Davidsson, Johan and Lidin, Erik and Angéria, Maria and Risling, Mårten and Günther, Mattias
Journal: Journal of clinical neuroscience : official journal of the Neurosurgical Society of Australasia (2019): 227-233

Cathepsin K Knockout Exacerbates Haemorrhagic Transformation Induced by Recombinant Tissue Plasminogen Activator After Focal Cerebral Ischaemia in Mice.
Authors: Zhao, Rong and He, Xin-Wei and Shi, Yan-Hui and Liu, Yi-Sheng and Liu, Feng-Di and Hu, Yue and Zhuang, Mei-Ting and Feng, Xiao-Yan and Zhao, Lei and Zhao, Bing-Qiao and Liu, Hui-Qin and Shi, Guo-Ping and Liu, Jian-Ren
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2019): 823-831

Classification, Scoring, and Quantification of Cell Death in Tissue Sections.
Authors: Janke, Laura J and Ward, Jerrold M and Vogel, Peter
Journal: Veterinary pathology (2019): 33-38

Comparison between Slow Freezing and Vitrification for Human Ovarian Tissue Cryopreservation and Xenotransplantation.
Authors: Lee, Sanghoon and Ryu, Ki-Jin and Kim, Boram and Kang, Dahyeon and Kim, Yoon Young and Kim, Tak
Journal: International journal of molecular sciences (2019)

Correlation of MiR-152 expression with VEGF expression in placental tissue of preeclampsia rat and its influence on apoptosis of trophoblast cells.
Authors: Zhang, L and Yuan, J-M and Zhao, R-H and Wang, L-M and Tu, Z-B
Journal: European review for medical and pharmacological sciences (2019): 3553-3560

Effect of cryopreservation techniques on proliferation and apoptosis of cultured equine ovarian tissue.
Authors: Gastal, G D A and Aguiar, F L N and Ishak, G M and Cavinder, C A and Willard, S T and Ryan, P L and Feugang, J M and Gastal, E L
Journal: Theriogenology (2019): 88-94

Exosomal miR-320d derived from adipose tissue-derived MSCs inhibits apoptosis in cardiomyocytes with atrial fibrillation (AF).
Authors: Liu, Lina and Zhang, Haoran and Mao, Hongyu and Li, Xiaohong and Hu, Yamin
Journal: Artificial cells, nanomedicine, and biotechnology (2019): 3976-3984

IL-10 inhibits apoptosis in brain tissue around the hematoma after ICH by inhibiting proNGF.
Authors: Song, L and Xu, L-F and Pu, Z-X and Wang, H-H
Journal: European review for medical and pharmacological sciences (2019): 3005-3011

说明书
Cell Meter 固定化细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*绿色荧光*.pdf

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22840-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光    货号22840 货号 22840 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3264
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光是美国AAT Bioquest研发的用于细胞凋亡和坏死检测的试剂盒,该特定试剂盒旨在同时检测细胞凋亡,坏死和健康。细胞凋亡是一种自主细胞拆解的活跃程序化过程,可避免引发炎症。在细胞凋亡中,磷脂酰丝氨酸(PS)被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指标,可以在观察到形态变化之前检测细胞表面上磷脂酰丝氨酸的出现。该试剂盒中使用的PS传感器在与膜PS结合后具有绿色荧光(Ex / Em = 490 / 525nm)。坏死已被描述为由于环境扰动导致的被动,意外细胞死亡,其中炎性细胞内容物不受控制地释放。如通过膜不可渗透的7-AAD(Ex / Em = 546 / 647nm)标记细胞核的能力所证明的,质膜完整性的丧失代表了证明晚期细胞凋亡和坏死的直接方法。此外,该试剂盒还提供活细胞质标记染料,CytoCalcein Violet 450(Ex / Em = 405/450 nm),用于标记活细胞的细胞质。该试剂盒经过优化,可用流式细胞仪或荧光显微镜同时检测细胞凋亡(绿色),坏死(绿色和/或红色)和健康细胞(蓝色)。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的细胞凋亡和坏死检测试剂盒。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm,488nm激光
发射: 450/40 nm, 530/30 nm, 670/14 nm滤波片
通道: Pacific Blue, FITC, PE-Cy5通道
荧光显微镜  
激发: DAPI, FITC, Texas Red滤波片
发射: DAPI, FITC, Texas Red滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品分析方案

概述

用测试化合物(200μL/样品)制备细胞

添加Apopxin Green测定溶液

在室温下孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

在Ex / Em = 490 / 525nm(细胞凋亡),550 / 650nm(坏死)和405 / 450nm(健康细胞)

 

操作步骤

1.用Apopxin Green制备和孵育细胞:

1.1用测试化合物将细胞维持一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

1.2离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

1.3将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

1.4将2μLApopxin Green(组分A)加入细胞中。

可选1:将1μL的200X 7-AAD(组分C)加入细胞中用于坏死细胞。

可选2:将100μLDMSO加入到CytoCalcein Violet 450(组分D)的小瓶中,得到200X CytoCalcein Violet 450原液,然后向细胞中加入1μL进行健康细胞染色。

1.5在室温下孵育30至60分钟(避光)。

1.6在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,加入300μL测定缓冲液(组分B)以增加体积(参见下面的步骤1.7)。

1.7使用流式细胞仪或荧光显微镜观察Ex / Em = 490 / 525nm处荧光强度的细胞凋亡,550 / 650nm处坏死,以及405/450nm处的健康细胞(参见下面的步骤2或3)。

 

2.使用流式细胞仪分析细胞:

使用FL1通道(Ex / Em = 490/525 nm)定量Apopxin Green结合,并在添加7-AAD时使用FL3通道(Ex / Em = 490/650 nm)测量细胞活力,和/或 当将CytoCalcein Violet 450加入细胞中时,使用Ex / Em = 405 / 450nm。

注意:Apopxin 与贴壁细胞结合的流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人(见参考文献1和2)。

 

3.使用荧光显微镜分析细胞:

3.1从步骤1.5中移取细胞悬液,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。将细胞添加到载玻片盖玻片或黑色墙壁/透明底96孔微孔板的载玻片上。

注意:对于贴壁细胞,建议直接在盖玻片(或黑墙/透明底96孔微孔板)上培养细胞。与Apopxin Green孵育(步骤1.5)后,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后将测定缓冲液加回到盖玻片(或黑色壁/透明底96孔微孔板)中。在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。在与Apopxin Green温育后,细胞也可以固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.2使用FITC通道在荧光显微镜下用Apopxin Green分析凋亡细胞。当添加7-AAD时使用德克萨斯红色通道测量细胞活力,和当将CytoCalcein Violet 450添加到细胞中时测量/或紫色通道。质膜上的绿色染色表明Apopxin Green与细胞表面的PS结合。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,Apopxin Green检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。在凋亡细胞中,Apopxin Green与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,导致染色强度增加。

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光    货号22840

图1.在Jurkat细胞中检测Apopxin Green与磷脂酰丝氨酸的结合活性。 A.在37℃,5%CO 2培养箱中不用(A.蓝色)或用1μM星形孢菌素(A.Red)处理Jurkat细胞5小时,然后加载Apopxin Green 30分钟。使用FL1通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量Apopxin Green的荧光强度。 B和C:荧光图像显示活细胞(蓝色,CytoCalcein Violet 450染色),细胞凋亡(绿色,Apopxin Green染色)和Jurkat细胞坏死(红色,7-AAD染色指示)用1μM星形孢菌素处理3小时。用Olympus荧光显微镜分别通过Violet,FITC和TRITC通道拍摄细胞的荧光图像。如上所示,合并来自相同细胞群的每个通道的各个图像。 B:非诱导对照细胞; C:星形孢菌素诱导的细胞的三重染色。

 

参考文献

Anthocyanin-rich blackcurrant extract inhibits proliferation of the MCF10A healthy human breast epithelial cell line through induction of G0/G1 arrest and apoptosis
Authors: Naoki Nanashima, Kayo Horie, Mitsuru Chiba, Manabu Nakano, Hayato Maeda, Toshiya Nakamura
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 6134–6141

Clusterin signals via ApoER2/VLDLR and induces meiosis of male germ cells
Authors: Muhammad Assad Riaz, Angelika Stammler, Mareike Borgers, Lutz Konrad
Journal: American Journal of Translational Research (2017): 1266

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Jack Coleman, Rui Liu, Kathy Wang, Arun Kumar
Journal: Apoptosis Methods in Toxicology (2016): 77–92

 

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产品名称 货号
Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 Cat#22843

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