Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒绿色荧光适合于流式细胞检测货号22823-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年9月14日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒绿色荧光适合于流式细胞检测

货号	22823	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	100 Tests	价格	2604
Ex (nm)	503	Em (nm)	525
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 3/7的活性而用于细胞凋亡检测的。因为Caspase-3 (CPP32/apopain)在细胞凋亡的起始过程中发挥着重要作用，因此其作为一个值得信赖的细胞凋亡指示剂广泛地被大家所接受。Caspase 3具有特异性的底物多肽识别序列，即天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)。本试剂盒用TF2-DEVD-FMK作为荧光指示剂，用于Caspase-3/7活性的检测。TF2-DEVD-FMK具有细胞渗透性、无细胞毒性，在凋亡细胞中能与活化的casepase-3/7进行不可逆的结合。一旦与Caspases结合，这种绿色荧光染料会被保留在细胞中。这种结合可以阻止Caspases进一步的催化作用，但是不会使细胞凋亡的进程停止。这种试剂将在添加介质之后的15分钟内与有活性的Caspase酶进行反应。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它用来对凋亡细胞中绝大多数活化的Caspases的活性进行定量检测，或者用来筛选Caspases抑制剂。这种绿色荧光可以通过流式细胞仪对被激活的Caspases进行直接检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒。

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适用仪器

流式细胞仪
激发：	488nm激发
发射：	530/30nm滤波片
通道：	FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞，密度为5×10⁵至1×10⁶个细胞/ mL
2.将1μL500XTF2-DEVD-FMK加入0.5mL细胞溶液中
3.在37°C，5％CO₂培养箱中孵育1-4小时
4.将细胞沉淀并将细胞重悬于0.5mL测定缓冲液或生长培养基中
5.使用具有FL1通道的流式细胞仪分析细胞

操作步骤

1.对于每个样品，准备细胞在0.5 mL温热培养基或您选择的缓冲液中，密度为5×10⁵至1×10⁶个细胞/ mL。注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段所需的时间以诱导细胞凋亡，并产生阳性和阴性对照。

3.将1μL500XTF2-DEVD-FMK（组分A）加入处理过的细胞中。

4.将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育1-4小时。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用TF2-DEVD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.将细胞洗涤并旋转两次。将细胞重悬于0.5mL测定缓冲液或生长培养基中。注意：TF2-DEVD-FMK是荧光的;因此，清除任何未结合的试剂以去除背景是很重要的。

6.用DNA染色标记细胞（如碘化丙锭或7-AAD用于死细胞）。

7.使用具有FL1通道的流式细胞仪（Ex / Em = 490 / 525nm）监测荧光强度。

数据分析

图1.使用Jurkat细胞中的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒检测caspase 3/7活性。加入喜树碱诱导TF2-DEVD-FMK荧光强度。将Jurkat细胞在37℃，5％CO₂培养箱中不用（蓝色）或用20μM喜树碱（红色）处理4-5小时，然后用TF2-DEVD-FMK染色1小时。

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

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Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒红色荧光	Cat#22797

说明书

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Cell Meter™固定细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒蓝色荧光货号22857-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年9月10日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter™固定细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*蓝色荧光*

Cell Meter™固定细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒蓝色荧光

货号	22857	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	25 Tests	价格	4992
Ex (nm)	411	Em (nm)	472
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter TUNEL细胞凋亡测定试剂盒是一种强大的工具，可方便地检测由DNA片段化引起的细胞凋亡。该测定是非放射性且快速的。TUNEL分析使用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）催化DEAC-dUTP在片段DNA的游离3′-羟基末端的掺入。通过荧光显微镜（AMC滤波片组）分析所得的DEAC标记的DNA。它的蓝色激发光可以方便地与GFP标记的靶标多路复用。荧光DEAC标记的核苷酸的直接掺入可明显减少检测步骤。该试剂盒经过优化，可检测固定细胞和福尔马林固定，石蜡包埋的组织切片中的凋亡。

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适用仪器

流式细胞仪
激发：	405nm激光
发射：	525/50nm
通道：	Pacific Orange通道

荧光显微镜
激发：	紫色滤波片组
发射：	紫色滤波片组
推荐孔板：	黑色透明

产品说明书

样品分析方案

概述

根据需要处理样品

在冰上用4％甲醛溶液固定细胞30分钟

在冰上用70％冰冷的乙醇透化细胞60分钟

将TdT染色溶液添加到样品中并在37°C下孵育60分钟

使用带有Violet滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度

工作溶液配制

TdT染色液

对于一项测试，混合以下试剂以使总体积为51 µL；
45 µL TdT反应缓冲液（组分D）
5 µL CoCl₂（组分C）
0.5 µL TF5-dUTP（组分B）
0.5 µL TdT酶（组分A）。
注意：TdT染色溶液应立即使用。

操作步骤

细胞染色方案

以下方案可用作参考，实际情况应根据需要进行调整。

根据需要处理样品。
用您选择的缓冲液（例如含Ca ⁺²和Mg ^+2的 PBS）洗涤样品。
通过在PBS中加入100 µL 4％多聚甲醛固定样品，并在冰上孵育30分钟。
除去固定液并用PBS洗涤样品。
向样品中加入100 µL 70％的冰冷乙醇，并在冰上孵育60分钟。
注意：样品在使用前可以在-20°C下保存几天。
除去酒精并用PBS洗涤细胞。
注意：对于阳性对照，将固定样品与2-5 µg / mL DNAse在含有Ca ⁺²和Mg ⁺²的PBS中于37°C 孵育60分钟。除去DNAse并彻底清洗细胞，并继续进行其余操作。
向样品中加入50µL TdT染色溶液，并在37°C下孵育60至120分钟。
除去TdT工作溶液，并用PBS洗涤样品。
将样品重悬于PBS中，并使用流式细胞仪使用525/50 nm滤光片（Pacific Orange通道）或带有紫色滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。

组织染色方案

以下方案可用作参考，实际应根据需要进行调整。
去石蜡和水化

通过将载玻片在Coplin广口瓶中在室温下浸入新鲜的二甲苯中5分钟，从而对组织切片（附着在载玻片上）进行脱蜡。再重复一次。（共2次洗涤）
将载玻片在室温下在Coplin广口瓶中浸入100％乙醇中5分钟，以洗涤样品。
通过在室温下将载玻片浸入各种浓度的酒精（100、95、85、70、50％）中，分别在室温下浸泡5分钟，从而对样品进行水化处理。
在室温下将载玻片浸入0.85％NaCl中5分钟，以洗涤样品。
在室温下将载玻片浸入PBS中5分钟，以洗涤样品。重复一遍。（共2次洗涤）

固定

通过在室温下将载玻片浸入PBS中的4％多聚甲醛溶液中15-20分钟来固定组织切片。
在室温下将载玻片浸入PBS中5分钟，以洗涤样品。重复一遍。（共2次洗涤）
除去液体，然后将载玻片放在平坦的地方。用100 µL 20 µg / mL蛋白酶K溶液处理组织切片。（添加至足够覆盖整个组织表面。在室温下孵育载玻片10分钟。）
在室温下将载玻片浸入PBS中5分钟，以洗涤样品。
通过在室温下将载玻片浸入PBS中的4％多聚甲醛溶液中15-20分钟来固定组织切片。
在室温下将载玻片浸入PBS中5分钟，以洗涤样品。重复一遍。（共2次洗涤）

染色

可选：对于阳性对照，将固定的样品与2-5 µg / mL的DNAse在含有Ca ⁺²和Mg ⁺²的PBS中于37°C 孵育60分钟。除去DNAse，并用PBS彻底清洗细胞，并继续进行其余操作。
向样品中加入50 µL TdT染色溶液，并在37°C下孵育60至120分钟。
除去TdT工作溶液，并用PBS洗涤样品。
加入封固剂，并用带紫色滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。

图示

Cell Meter™固定细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*蓝色荧光* 货号22857

图1.用 HeLa细胞进行TUNEL分析的荧光图像。固定HeLa细胞，并在37°C下分别使用和不使用DNAse处理60分钟。然后将细胞用Cell Meter™固定细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒（Cat＃22855）染色。DNA链断裂在DNAse处理的细胞中表现出强烈的荧光染色。使用紫色滤光片组在荧光显微镜下检测信号。

参考文献

A Novel Theranostic Combination of Near-infrared Fluorescence Imaging and Laser Irradiation Targeting c-KIT for Gastrointestinal Stromal Tumors.
Authors: Fujimoto, Shota and Muguruma, Naoki and Okamoto, Koichi and Kurihara, Takeshi and Sato, Yasushi and Miyamoto, Yoshihiko and Kitamura, Shinji and Miyamoto, Hiroshi and Taguchi, Takahiro and Tsuneyama, Koichi and Takayama, Tetsuji
Journal: Theranostics (2018): 2313-2328

Multicomponent Synthesis of Some Molecular Hybrid Containing Thiazole Pyrazole as Apoptosis Inducer.
Authors: Kumar, Parvin and Duhan, Meenakshi and Kadyan, Kulbir and Bhardwaj, Jitender Kumar and Saraf, Priyanka and Mittal, Meenu
Journal: Drug research (2018): 72-79

[Salvianolate protects H9c2 cells from hypoxia/reoxygenation injury-induced apoptosis by attenuating mitochondrial DNA oxidative damage].
Authors: Yue, R C and Yang, X L and Zhang, R Y and Liu, S and Liu, J and Zeng, J and Liang, H and Wang, W and Hu, H X and Zeng, C Y
Journal: Zhonghua xin xue guan bing za zhi (2017): 57-63

Caspase 3 as a therapeutic target for regulation of intervertebral disc degeneration in rabbits.
Authors: Sudo, Hideki and Minami, Akio
Journal: Arthritis and rheumatism (2011): 1648-57

Induction of apoptosis and inhibition of PI3K/Akt pathway in PC-3 and LNCaP prostate cancer cells by ethanolic neem leaf extract.
Authors: Gunadharini, Dharmalingam N and Elumalai, Perumal and Arunkumar, Ramachandran and Senthilkumar, Kalimuthu and Arunakaran, Jagadeesan
Journal: Journal of ethnopharmacology (2011): 644-50

[Effect of 5-aminolevulinic acid-mediated photodynamic therapy on human gastric cancer xenografts in nude mice in vivo].
Authors: Zhou, Guang-jun and Huang, Zong-hai and Yu, Jin-long and Li, Zhou and Ding, Lian-shu
Journal: Zhonghua wei chang wai ke za zhi = Chinese journal of gastrointestinal surgery (2008): 580-3

[Effect of phenylhexyl isothiocyanate on inducing apoptosis of multiple myeloma cells in vitro].
Authors: Lu, Quan-Yi and Wang, Zhao and Liu, De-Long
Journal: Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi (2008): 89-92

[Effect of qihong capsule in inhibiting cell apoptosis induced by Coxsackie virus B].
Authors: Song, Xiao-dong and Wang, Lun and Ji, Bo
Journal: Zhongguo Zhong xi yi jie he za zhi Zhongguo Zhongxiyi jiehe zazhi = Chinese journal of integrated traditional and Western medicine (2005): 511-5

Dual excitation multi- fluorescence flow cytometry for detailed analyses of viability and apoptotic cell transition.
Authors: Mazzini, G and Ferrari, C and Erba, E
Journal: European journal of histochemistry : EJH (2003): 289-98

Co-localization of active caspase-3 and DNA fragmentation (TUNEL) in normal and hyperthermia-induced abnormal mouse development.
Authors: Mirkes, P E and Little, S A and Umpierre, C C
Journal: Teratology (2001): 134-43

说明书

Cell Meter™固定细胞和组织TUNEL细胞凋亡测定试剂盒*蓝色荧光*.pdf

Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒适合于流式细胞仪货号22837-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年9月7日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒适合于流式细胞仪

货号	22837	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格	100 Tests	价格	2604
Ex (nm)	651	Em (nm)	660
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，膜联蛋白V可以与包括APC的荧光染料缀合。保留了其对磷脂酰丝氨酸（PS）的高亲和力，因此可作为流式细胞仪分析细胞凋亡的灵敏探针。由于PS的外部化发生在凋亡的早期阶段，因此APC Annexin V染色比基于核变化（如DNA片段化）的测定可更早地鉴定凋亡。 APC Annexin V染色是在膜完整性丧失之前，伴随着由凋亡或坏死过程导致的细胞死亡的最新阶段。因此，用APC Annexin V染色通常与诸如碘化丙锭（PI）或7-氨基放线菌素（7-AAD）等重要染料结合使用，以使研究者能够识别早期凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒。

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适用仪器

流式细胞仪
激发：	640nm激光
发射：	660/20nm滤波片
通道：	APC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.加入APC-膜联蛋白V测定溶液
3.在室温下孵育20-60分钟
4.使用FL4通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 635/660 nm）

储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. APC-Annexin V原液（100X）：
将含有0.2％BSA的200μLPBS加入到APC-膜联蛋白V缀合物（组分A）的小瓶中并充分混合以制备100X APC-膜联蛋白V储备溶液。注意：将重构的100X APC-Annexin V储备溶液储存在4 ℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

2.离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.向细胞中加入2μL100XAPC-膜联蛋白V原液。

5.可选：将2μL100X碘化丙啶（组分C）加入细胞中，用于坏死细胞。

6.在室温下孵育20至60分钟，避光。

7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。

8.使用具有FL4通道的流式细胞仪（Ex / Em = 635 / 660nm）监测APC-膜联蛋白V的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。

数据分析

在活的非凋亡细胞中，APC-膜联蛋白V检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。在凋亡细胞中，APC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外叶上，因此导致染色强度增加。

Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒适合于流式细胞仪货号22837

图1.使用Cell Meter APC-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中APC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的结合活性。将Jurkat细胞在37℃，5％CO₂培养箱中在没有（蓝色）或1μM星形孢菌素（红色）的情况下处理约4小时，然后用APC-膜联蛋白V染色30分钟。使用FL4通道，用FACSCalibur（Becton Dickinson）流式细胞仪测量APC-膜联蛋白V的荧光强度。

参考文献

ALDH1 Bio-activates Nifuroxazide to Eradicate ALDHHigh Melanoma-Initiating Cells
Authors: Sana Sarvi, Richard Crispin, Yuting Lu, Lifan Zeng, Thomas D Hurley, Douglas R Houston, Alex von Kriegsheim, Che-Hong Chen, Daria Mochly-Rosen, Marco Ranzani
Journal: Cell Chemical Biology (2018)

CHIP functions as an oncogene by promoting colorectal cancer metastasis via activation of MAPK and AKT signaling and suppression of E-cadherin
Authors: Jingjing Xu, Jun Zhou, Hanjue Dai, Fei Liu, Wenjing Li, Wenjuan Wang, Feng Guo
Journal: Journal of Translational Medicine (2018): 169

Ubiquitin ligase CHIP functions as an oncogene and activates the AKT signaling pathway in prostate cancer
Authors: Li Cheng, Jin Zang, Han-Jue Dai, Feng Li, Feng Guo
Journal: International journal of oncology (2018)

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Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒红色荧光货号22817-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年9月7日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒红色荧光

货号	22817	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	100 Tests	价格	2604
Ex (nm)	532	Em (nm)	619
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7，起始Caspase级联反应。在正常发育的中枢神经系统中，活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9具有底物的选择性，其识别底物基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用Ac-LEHD-ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割ProRed 产生强蓝色荧光，EX/Em = 350/450 nm。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分。该实验稳定、快速且适应高通量筛选的需求。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。很多实验室利用本试剂盒进行高通量抑制剂的筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。

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适用仪器

荧光酶标仪
激发：	540nm
发射：	620nm
cutoff：	610nm
推荐孔板：	黑色透明
读取模式：	顶或底读模式

产品说明书

样本实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm（截止= 610 nm）监测荧光强度（顶部或底部读取模式）

工作溶液配制

将5μL的200X Ac-LEHD-ProRed 储备溶液（组分A）加入1mL的分析缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 9工作溶液。避光。注意：Caspase 9工作液不稳定，请及时使用。 1 mL Caspase 9工作溶液足以进行10次分析。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384-板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃，5％CO₂，培养箱中孵育所需的一段时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时）以诱导细胞凋亡。

3.添加100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 9工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 9工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂，以确认抑制caspase 9样活性。

5.在Ex / Em = 540 / 620nm（cutoff= 610nm）下用荧光酶标仪（顶部或底部读取模式）监测荧光强度。注意：有时，底部读数会提供更好的信号背景比。如果使用底部读取模式，则以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟。

数据分析

图1.使用Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 9活性红色荧光。将Jurkat细胞在同一天以300,000个细胞/90μL/孔接种在Costar黑色壁/透明底96孔板中。用或不用1μM星形孢菌素处理细胞4小时。加入半胱天冬酶9工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。使用FlexStation荧光酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 540 / 620nm（截止值= 610nm）下测量荧光强度。

参考文献

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒红色荧光适合于流式细胞检测货号22832-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年8月31日由英国沃特曼whatman

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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒红色荧光适合于流式细胞检测

货号	22832	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格	100 Tests	价格	2604
Ex (nm)	649	Em (nm)	660
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来检测细胞凋亡。在细胞凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标，可以在观察形态变化之前进行检测。该试剂盒中使用的我们专有的Apopxin PS探针是基于小分子的PS探针。与膜PS结合后具有红色荧光。使用流式细胞仪在APC通道（红色荧光）优化了此特定的检测试剂盒，以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒。

适用仪器

流式细胞仪
激发：	640nm激光
发射：	660/20nm滤波片
通道：	APC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物制备细胞（200 µL /样品）
添加Apopxin 深红色测定溶液
在室温下孵育30-60分钟
使用具有FL4通道（Ex / Em = 647/660 nm的流式细胞仪）分析细胞

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞所需的时间（喜树碱处理过的Jurkat细胞需要4-6小时）以诱导凋亡。

2.离心细胞以获得1-5×10⁵细胞/管。

3.将细胞重悬于200 µL分析缓冲液（组分B）中。

4.向细胞中加入2 µL Apopxin 深红色溶液（组分A）。

5.避光保存，于室温下孵育30至60分钟。

6.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300 µL分析缓冲液（组分B）以增加体积。

7.使用带有FL4通道的流式细胞仪（Ex / Em = 647/660 nm）检测荧光强度。

参考文献

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Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
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Eurycomanone induce apoptosis in HepG2 cells via up-regulation of p53
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Evaluation of cell surface expression of phosphatidylserine in ovarian carcinoma effusions using the annexin-V/7-AAD assay: clinical relevance and comparison with other apoptosis parameters
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Gold fluorescent annexin A5 as a novel apoptosis detection tool
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Induction of apoptosis in sonoporation and ultrasonic gene transfer
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Mobilization of lysosomal calcium regulates the externalization of phosphatidylserine during apoptosis
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Peptidic targeting of phosphatidylserine for the MRI detection of apoptosis in atherosclerotic plaques
Authors: Burtea C, Laurent S, Lancelot E, Ballet S, Murariu O, Rousseaux O, Port M, V and er Elst L, Corot C, Muller RN.
Journal: Mol Pharm (2009): 1903

说明书

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标签归档：凋亡

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