Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒

	货号	36385	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	490	Em (nm)	515
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的脂肪酸检测试剂盒，脂肪酸摄取是治疗许多人类疾病（例如肥胖症，2型糖尿病和肝脏脂肪变性）的重要治疗靶标。 Screen Quest 荧光脂肪酸摄取分析试剂盒为测量含有脂肪酸转运蛋白的细胞中的脂肪酸提供了一种简单而灵敏的方法。 该试剂盒使用专有的十二烷酸荧光脂肪酸底物。 该脂肪酸摄取测定试剂盒可在具有底读模式或FITC通道的任何荧光酶标仪上进行。 该测定可以在96孔或384孔微量滴定板中以简单的混合和读取程序进行，并且易于适应高通量筛选应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中培养细胞4-6小时
2.将细胞转移到无血清培养基中1小时，并根据需要处理细胞
3.加入100μL/孔的脂肪酸染料加载溶液
4.监测荧光增加在Ex / Em = 485/515 nm处立即进行动力学或在孵育60分钟后进行终点读数（底部读取模式）

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
TF2-C12脂肪酸原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到TF2-C12脂肪酸（组分A）的小瓶中并充分混合。 注意：20μL荧光脂肪酸底物原液足以用于一个平板。 如果将管密封并避光，可以将未使用的荧光脂肪酸底物储备溶液等分并在<-20℃下储存长达两个月。 避免反复冻融循环

2.工作溶液配制

脂肪酸染料加载溶液：
将20μLTF2-C12脂肪酸储备溶液加入10mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合。 注意：10毫升脂肪酸染料加载溶液足以用于一个平板; 为每个平板做准备并进行实验。

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。

2.从培养箱中取出化合物处理的细胞板，加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）（包括空白孔）的脂肪酸染料加载溶液。

3.使用底部读取模式，使用荧光酶标仪在Ex / Em = 485 / 515nm（在495nm处截止）测量荧光信号。 注意：对于动力学读数：立即以20秒间隔读取荧光强度30-60分钟。 注意：对于终点读数：读取30-60分钟孵育结束时的荧光强度。

数据分析

参考文献

Emerging risk factors for postpartum depression: serotonin transporter genotype and omega-3 fatty acid status
Authors: Shapiro GD, Fraser WD, Seguin JR.
Journal: Can J Psychiatry (2012): 704

Estradiol enhances effects of fructose rich diet on cardiac fatty acid transporter CD36 and triglycerides accumulation
Authors: Koricanac G, Tepavcevic S, Romic S, Zivkovic M, Stojiljkovic M, Milosavljevic T, Stankovic A, Petkovic M, Kamceva T, Zakula Z.
Journal: Eur J Pharmacol (2012): 127

Improved working memory but no effect on striatal vesicular monoamine transporter type 2 after omega-3 polyunsaturated fatty acid supplementation
Authors: Narendran R, Frankle WG, Mason NS, Muldoon MF, Moghaddam B.
Journal: PLoS One (2012): e46832

Munc18c provides stimulus-selective regulation of GLUT4 but not fatty acid transporter trafficking in skeletal muscle
Authors: Jain SS, Snook LA, Glatz JF, Luiken JJ, Holloway GP, Thurmond DC, Bonen A.
Journal: FEBS Lett (2012): 2428

Poultry fat decreased fatty acid transporter protein mRNA expression and affected fatty acid composition in chickens
Authors: Yuan J, Zhang B, Guo Y.
Journal: J Anim Sci Biotechnol (2012): 17

Significance of short chain fatty acid transport by members of the monocarboxylate transporter family (MCT)
Authors: Moschen I, Broer A, Galic S, Lang F, Broer S.
Journal: Neurochem Res (2012): 2562

A mixed polyunsaturated fatty acid diet normalizes hippocampal neurogenesis and reduces anxiety in serotonin transporter knockout rats
Authors: Schipper P, Kiliaan AJ, Homberg JR.
Journal: Behav Pharmacol (2011): 324

Absence of fatty acid transporter CD36 protects against Western-type diet-related cardiac dysfunction following pressure overload in mice
Authors: Steinbusch LK, Luiken JJ, Vlasblom R, Chabowski A, Hoebers NT, Coumans WA, Vroegrijk IO, Voshol PJ, Ouwens DM, Glatz JF, Diamant M.
Journal: Am J Physiol Endocrinol Metab (2011): E618

Melittin stimulates fatty acid release through non-phospholipase-mediated mechanisms and interacts with the dopamine transporter and other membrane-spanning proteins
Authors: Keith DJ, Eshleman AJ, Janowsky A.
Journal: Eur J Pharmacol (2011): 501

FATP2 is a hepatic fatty acid transporter and peroxisomal very long-chain acyl-CoA synthetase
Authors: Falcon A, Doege H, Fluitt A, Tsang B, Watson N, Kay MA, Stahl A.
Journal: Am J Physiol Endocrinol Metab (2010): E384

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒

	货号	40005	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于葡萄糖定量的试剂盒，葡萄糖是一种单糖，是生物学中最重要的碳水化合物。它是细胞生长的能量和代谢中间体的来源。葡萄糖是光合作用的主要产物之一，并在原核生物和真核生物中开始细胞呼吸。葡萄糖水平是许多代谢紊乱的关键诊断参数。该葡萄糖测定试剂盒提供了用于测量各种生物样品（例如血清，血浆，体液，食物，生长培养基等）中的葡萄糖的快速且灵敏的方法。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物，使该试剂盒可以在双重荧光测定或比色读数中进行记录。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。该测定是稳健的，并且可以容易地适用于需要测量葡萄糖的各种应用中的高通量测定。例如，该测定可能适合于监测发酵过程中的葡萄糖水平和蛋白质表达过程中的葡萄糖摄取。它也可用于监测葡萄糖转运蛋白。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备并添加葡萄糖标准品和/或测试样品（50μL）
准备并添加葡萄糖分析工作溶液（50μL）
在37°C孵育10-30分钟
在Ex / Em = 540 / 590nm处检测荧光强度

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1Amplite 红色储备液（250X）：
将100μLDMSO（组分E）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意：避免反复冻融循环。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液（pH 7.4）。

1.2辣根过氧化物酶（HRP）储备液（10 U / mL）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。注意：未使用的HRP溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20℃。

1.3葡萄糖氧化酶溶液（100 U / mL）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入葡萄糖氧化酶（组分D）的小瓶中。注意：未使用的葡萄糖氧化酶溶液应分为一次性等分试样并储存在-20℃。

1.4葡萄糖原液（800mM）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入葡萄糖小瓶（组分F）中。注意：未使用的葡萄糖溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20℃。

2.标准溶液配制

2.1葡萄糖标准溶液配制
通过将适量的800mM葡萄糖储备溶液稀释到测定缓冲液（组分B）中来制备葡萄糖标准品，以产生30μM的葡萄糖浓度。 然后在测定缓冲液（组分B）中进行1：3连续稀释，得到约10,3,1,0.3,0.1和0.03μM连续稀释的葡萄糖标准品。 包括非葡萄糖缓冲液对照作为空白对照。

3.工作溶液配制

表1.一个透明底96孔微孔板的分析工作溶液（2X）

操作步骤

表2.固体黑色96孔微孔板中葡萄糖标准品和测试样品的布局。

GS =葡萄糖标准品（GS1-GS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表3.每个孔的试剂组成

注意：由于Amplite 红色底物（对非荧光产物）的过氧化，高浓度的葡萄糖（例如测试样品或标准品中的100μM）可能导致荧光信号减少。

葡萄糖测定

1.如表2和3中所述，将葡萄糖标准品和含葡萄糖的测试样品加入96孔黑色微孔板中。

2.将50μL葡萄糖测定工作溶液添加到葡萄糖标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（表2），以使总葡萄糖测定体积为100μL/孔。 注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.将反应在37℃孵育10至30分钟，避光。

4.用荧光板读数器在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm）监测荧光强度。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算葡萄糖样品。 点击使用在线线性回归计算器。

图1.使用Gemini酶标仪（Molecular Devices），在96孔黑色平板上用Amplite 荧光葡萄糖定量试剂盒测量葡萄糖剂量反应。

参考文献

Glucose metabolism ontogenesis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in the light of the recently sequenced genome: new tools for intermediary metabolism programming
Authors: Lucie Marandel, Vincent Véron, Anne Surget, Elisabeth Plagnes-Juan, Stéphane Panserat
Journal: Journal of Experimental Biology (2016): 734–743

High glucose potentiates L-FABP mediated fibrate induction of PPARα in mouse hepatocytes
Authors: Anca D Petrescu, Avery L McIntosh, Stephen M Storey, Huan Huang, Gregory G Martin, Danilo Landrock, Ann B Kier, Friedhelm Schroeder
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2013): 1412–1425

相关产品

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

	货号	11503	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3264
	Ex (nm)	498	Em (nm)	517
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒，过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物，是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它参与了许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化氢生物学最有趣的方面是最近的报告，即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力，有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。这种活性物质的测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该 Cell Meter 过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的 OxiVision Green 过氧化氢探针来量化活细胞中的过氧化氢。 OxiVision Green 具有细胞渗透性，当它与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”分析格式，与 HTS 液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。  

点击查看光谱

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

96孔板的测定方案

概述

用于溶液测定

1.准备H₂O₂反应混合物（50μL）

2.加入H₂O₂标准品或测试样品（50μL）

3.在室温下孵育10-60分钟

4.在Ex / Em = 490/525 nm （cutoff=515nm）处检测荧光强度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

用于活细胞检测

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 使用 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液对细胞进行染色并孵育
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515nm) 处用底部读取模式检测荧光强度

溶液配制

1. OxiVision Green 过氧化氢探针储备液 (250X)
将 50 μL DMSO（组分 D）加入 OxiVision Green 过氧化氢探针（组分 A）的小瓶中，制成 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液，注意避光。

2. H2O2 标准溶液（20 mM）
将 22.7 μL 的 3% H2O2（0.88 M，组分 B）加入 977 μL 的 Assay Buffer（组分 C）中，制成 20 mM H2O2 标准溶液。

注意 稀释的 H2O2 标准溶液不稳定。 未使用的部分应丢弃。

3.H2O2 标准
将 50 μL 20 mM H2O2 标准溶液加入 950 μL Assay Buffer（组分 C）中，得到 1000 μM H2O2 标准溶液。 取 1000 μM H2O2 标准溶液并进行 1:3 的系列稀释，以得到含有测定缓冲液（组分 C）的系列稀释的 H2O2 标准品（HS1 – HS7）。

4.工作溶液配制

将 20 μL 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液加入 5 mL 检测缓冲液（组分 C）中，制成 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

操作步骤

在上清液反应中检测H2O2
表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中 H2O2 标准品和测试样品的布局。 HS= H 2 O 2 标准品（HS1 – HS7，300 至 0.3 μM）； BL=空白控制； TS=测试样品

表2. 每孔试剂组成

1.根据表 1 和表 2 中提供的布局准备 H2O2 标准 (HS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂，而不是 50 μL。

2. 将 50 μL OxiVision Green 过氧化氢探针工作液加入 H2O2 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中，使H2O2 测定总体积为 100 μL/孔。 对于384孔板，将 25 μL 的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液添加到每个孔中，总体积为 50 μL/孔。

3. 在室温下将反应孵育 15 到 30 分钟，避光。

4. 用荧光酶标仪在Ex= 490 ± 10，Em= 520 ± 10 nm（最佳 Ex/Em = 490/525 nm，截止 = 515 nm）检测荧光强度。

在活细胞中进行H2O2检测

1.根据需要培养细胞

2.用 PBS 缓冲液清洗细胞，用 100 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液孵育细胞 5 到 60 分钟。 对于 384 孔板，添加 25 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

3. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515 nm) 下使用荧光酶标仪（底部读取模式）检测荧光增加或使用 FITC 通道通过荧光显微镜成像荧光变化。

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

PPARα-mediated peroxisome induction compensates PPARγ-deficiency in bronchiolar club cells
Authors: Srikanth Karnati, Gani Oruqaj, Harshavardhan Janga, Srinu Tumpara, Claudia Colasante, Paul P Van Veldhoven, Nancy Braverman, Adrian Pilatz, Thomas J Mariani, Eveline Baumgart-Vogt
Journal: PloS one (2018): e0203466

Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis
Authors: Masayuki Nishide, Satoshi Nojima, Daisuke Ito, Hyota Takamatsu, Shohei Koyama, Sujin Kang, Tetsuya Kimura, Keiko Morimoto, Takashi Hosokawa, Yoshitomo Hayama
Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

Aggravation of brain infarction through an increase in acrolein production and a decrease in glutathione with aging
Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues
Authors: Lei Rong, Chi Zhang, Qi Lei, Ming-Ming Hu, Jun Feng, Hong-Bing Shu, Yi Liu, Xian-Zheng Zhang
Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

Modification of lignin in sugarcane bagasse by a monocopper hydrogen peroxide-generating oxidase from Thermobifida fusca
Authors: Cheng-Yu Chen, Cheng-Cheng Lee, Hung-Shuan Chen, Chao-Hsun Yang, Shu-Ping Wang, Jyh-Horng Wu, Menghsiao Meng
Journal: Process Biochemistry (2016): 1486–1495

Dopamine-mediated oxidation of methionine 127 in α-synuclein causes cytotoxicity and oligomerization of α-synuclein
Authors: Kazuhiro Nakaso, Naoko Tajima, Satoru Ito, Mari Teraoka, Atsushi Yamashita, Yosuke Horikoshi, Daisuke Kikuchi, Shinsuke Mochida, Kenji Nakashima, Tatsuya Matsura
Journal: PLoS One (2013): e55068

Hydrogen peroxide stimulates the epithelial sodium channel through a phosphatidylinositide 3-kinase-dependent pathway
Authors: He-Ping Ma
Journal: Journal of Biological Chemistry (2011): 32444–32453

相关产品

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

简要概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒，碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中，其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端，并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶，而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化，Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析（特别是免疫分析）和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 *绿色荧光* 用FDP，一种灵敏的碱性磷酸酶绿色荧光底物来定量检测溶液中、细胞抽提液，固相物质表面（例如PVDF膜）的碱性磷酸酶活性。本试剂盒提供所有必需组分，包括我们最佳的产品组合和分析方法，并且与可用于HTS（高通量筛选）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液（50μL）
2.添加碱性磷酸酶标准品或测试样品（50μL）
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度（Cutfoff = 515 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 FDP（250X）：
将100μLDMSO（组分D）加入到FDP小瓶（组分A）中以制备250X FDF储备溶液。 应立即使用FDP储备溶液。

1.2 碱性磷酸酶标准溶液（100 U / mL）：
将100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸馏水加入碱性磷酸酶标准品（组分C，10单位）中，得到100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意：碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液，进行1:10（AS7），然后在H2O-0.1％BSA中进行1：3连续稀释，得到碱性磷酸酶标准品（AS6-AS1）的连续稀释液。

3.工作溶液

将20μL250XFDP储备溶液加入5 mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意：避光。

点击查看细胞制备指南

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品（AS1-AS7,0.1至100 mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定：

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。注意：根据需要准备细胞或组织样本。应丢弃未使用的碱性磷酸酶标准品系列稀释液。

1.2向碱性磷酸酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液，使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液，总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟，避光。可选：在30分钟孵育结束时，加入50μL/孔（对于96孔板）或25μL/孔（对于384孔板）的终止溶液（组分E）。

1.4用荧光板读数器在激发= 490±10，发射= 525±10nm（截止= 515nm）监测荧光增加。

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定：

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意：由于生长培养基与FDP的干扰，重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向细胞孔中加入100μL（对于96孔板）或50μL（对于384孔板）1：1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5将反应在所需温度下孵育30至60分钟，避光。 可选：在30分钟孵育结束时加入50μL/孔（对于96孔板）或25μL/孔（对于384孔板）的终止溶液（组分E）。

2.6用荧光板读数器在激发= 490±10，发射= 525±10nm（截止= 515nm）监测荧光增加。

参考文献

Development and validation of bioengineered intestinal tubules for translational research aimed at safety and efficacy testing of drugs and nutrients
Authors: Paulus GM Jochems, Jeroen van Bergenhenegouwen, Anne Metje van Genderen, Sophie T Eis, Livia JF Wilod Versprille, Harry J Wichers, Prescilla V Jeurink, Johan Garssen, Rosalinde Masereeuw
Journal: Toxicology in Vitro (2019)

Rapid detection of Escherichia coli in beverages using genetically engineered bacteriophage T7
Authors: Nicharee Wisuthiphaet, Xu Yang, Glenn M Young, Nitin Nitin
Journal: AMB Express (2019): 55

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

An engineering understanding of the small intestine
Authors: Monica Rosalia Jaime Fonseca
Journal: (2012)

Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence root repair material
Authors: Mahmoud Reza Modareszadeh, Peter M Di Fiore, David A Tipton, Narges Salamat
Journal: Journal of endodontics (2012): 1101–1105

Alginate-loaded liposomes can protect encapsulated alkaline phosphatase functionality when exposed to gastric pH
Authors: Alan M Smith, Monica R Jaime-Fonseca, Liam M Grover, Serafim Bakalis
Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

相关产品

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪

	货号	22971	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	540	Em (nm)	590
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
3. 添加MitoROS 580工作溶液
4. 在37°C下将细胞染色30-60分钟
5. 检测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处的荧光增加（底部读取模式）或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜

 

溶液配制

储备溶液配制

1. MitoROS 580储备溶液（500X）：将50 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备液，避光。 注意：25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。 为了存放，请将管子紧紧密封。

 

工作溶液配制

将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MitoROS 580工作溶液。 注意：此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1. 在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

2. 为了诱导超氧化物，将细胞板在37°C下孵育所需的时间，避光。 注意：我们在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理HeLa细胞30分钟，以诱导超氧化物。 有关详细信息，请参见图1。

3. 将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。

4. 将细胞在37°C下孵育30至60分钟。

5. 使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/590 nm（Cutoff = 570 m））检测荧光强度，或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

图示

 

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）在HeLa细胞中测量超氧化物的荧光图像。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 AMA处理：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。 未经处理的对照：HeLa细胞与MitoROS 580在37°C下孵育1小时，未经AMA处理。 使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜检测荧光信号。

图2.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）检测HeLa细胞中的细胞内超氧化物。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 将细胞与50 µM绿脓素（Pyo）孵育； 50 µM抗霉素A（AMA）或未经处理（对照）在37ºC下放置30分钟。 然后将细胞与MitoROS 580在37℃孵育1小时。 使用CLARIOstar酶标仪（BMG Labtech）以底部读取模式在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）下检测荧光信号。

 

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806