标签归档：试剂盒

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22846-AAT Bioquest荧光染料

发表于由
回复

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22846 货号 22846 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 6564
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具，可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在同时检测凋亡，坏死和健康细胞。细胞凋亡是一种主动的程序化的细胞自发解体过程，可避免引起炎症。在凋亡中，磷脂酰丝氨酸（PS）被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡初始/中间阶段的通用指标，在观察形态变化之前，可以检测到磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现。 PS指示剂Annexin V-iFluor 488共轭物与膜PS结合后具有绿色荧光。膜不透性的Nuclear Blue DCS1（Ex / Em = 350/461 nm）标记细胞核的能力证明，质膜完整性的丧失代表了显示凋亡和坏死晚期的直接方法。此外，该试剂盒还提供了活细胞标记染料Cellbrite Red（Ex / Em = 613/631 nm），用于标记非凋亡健康细胞。该试剂盒经过优化，可通过荧光显微镜同时检测细胞凋亡（绿色），坏死（蓝色和/或绿色）和健康细胞（红色）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒。

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： 494 nm (凋亡) / 350 nm (坏死) / 613 nm (活)
发射： 520 nm (凋亡) / 461 nm (坏死) / 631 nm (活)
推荐孔板： 黑色透明
通道： FITC滤波片 (凋亡) / DAPI滤波片(坏死) / Cy5滤波片 (活)

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞
  2. 加入三重荧光工作溶液（100 µL /样品）
  3. 在室温或37℃下孵育30-60分钟
  4. 用荧光显微镜在FITC通道（凋亡），DAPI通道（坏死）或Texas Red / Cy5通道（健康细胞）处进行分析

 

溶液配制

工作溶液配制

将10 µL的100X Annexin V-iFluor 488偶联物（组分A），5 µL的200X Nuclear Blue DCS1（组分C）和5 µL的200X Cellbrite Red（组分D）添加到1 mL的测定缓冲液（组分B）中 ）。 三重荧光测定溶液在室温下稳定至少1小时。 注意：由于最佳染色条件可能会因细胞类型而异，因此建议分别确定组分A，C和D的适当浓度。

 

实验步骤

1.处理后除去细胞培养基并检测化合物。

2.加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的三重荧光分析溶液。 在避光条件下，于37℃孵育30至60分钟。

3.用HBSS，PBS或自备缓冲液洗涤细胞两次。

4.在带有FITC滤光片的荧光显微镜下，用Annexin V-iFluor 488偶联物分析凋亡细胞。 质膜上的绿色染色（Ex / Em = 494/520 nm）表明膜联蛋白V-iFluor 488缀合物与细胞表面的PS结合。 使用荧光显微镜用DAPI滤光片（Ex / Em = 350/461 nm）检测坏死的荧光强度，使用Texas Red或Cy5滤光片（Ex / Em = 613/631 nm）检测活细胞的荧光强度。

 

参考文献

Anthocyanin-rich blackcurrant extract inhibits proliferation of the MCF10A healthy human breast epithelial cell line through induction of G0/G1 arrest and apoptosis
Authors: Nanashima, Naoki and Horie, Kayo and Chiba, Mitsuru and Nakano, Manabu and Maeda, Hayato and Nakamura, Toshiya
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 6134–6141

Clusterin signals via ApoER2/VLDLR and induces meiosis of male germ cells
Authors: Riaz, Muhammad Assad and Stammler, Angelika and Borgers, Mareike and Konrad, Lutz
Journal: American Journal of Translational Research (2017): 1266

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Coleman, Jack and Liu, Rui and Wang, Kathy and Kumar, Arun
Journal: Apoptosis Methods in Toxicology (2016): 77–92

A pharmaceutical preparation of Salvia miltiorrhiza protects cardiac myocytes from tumor necrosis factor-induced apoptosis and reduces angiotensin II-stimulated collagen synthesis in fibroblasts
Authors: Ling S, Luo R, Dai A, Guo Z, Guo R, Komesaroff PA.
Journal: Phytomedicine (2009): 56

Agmatine protects cultured retinal ganglion cells from tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis
Authors: Hong S, Kim CY, Lee JE, Seong GJ.
Journal: Life Sci (2009): 28

Concurrent induction of necrosis, apoptosis, and autophagy in ischemic preconditioned human livers formerly treated by chemotherapy
Authors: Domart MC, Esposti DD, Sebagh M, Olaya N, Harper F, Pierron G, Franc B, Tanabe KK, Debuire B, Azoulay D, Brenner C, Lemoine A.
Journal: J Hepatol (2009): 881

Down-regulation of myeloid cell leukemia 1 by epigallocatechin-3-gallate sensitizes rheumatoid arthritis synovial fibroblasts to tumor necrosis factor alpha-induced apoptosis
Authors: Ahmed S, Silverman MD, Marotte H, Kwan K, Matuszczak N, Koch AE.
Journal: Arthritis Rheum (2009): 1282

Exaggerated up-regulation of tumor necrosis factor alpha-dependent apoptosis in the older mouse liver following reperfusion injury: targeting liver protective strategies to patient age
Authors: Selzner M, Selzner N, Chen L, Borozan I, Sun J, Xue-Zhong M, Zhang J, McGilvray ID.
Journal: Liver Transpl (2009): 1594

Increased apoptosis in HepG2.2.15 cells with hepatitis B virus expression by synergistic induction of interferon-gamma and tumour necrosis factor-alpha
Authors: Shi H, Guan SH.
Journal: Liver Int (2009): 349

Outside-to-inside signaling through transmembrane tumor necrosis factor reverses pathologic interleukin-1beta production and deficient apoptosis of rheumatoid arthritis monocytes
Authors: Meusch U, Rossol M, Baerwald C, Hauschildt S, Wagner U.
Journal: Arthritis Rheum (2009): 2612

说明书
Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 .pdf

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 红色荧光 货号22681-AAT Bioquest荧光染料

发表于由
回复

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 红色荧光

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 红色荧光

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 红色荧光 货号22681 货号 22681 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 652 Em (nm) 670
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于染色细胞膜的试剂盒，Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒可快速，均匀地标记质膜，而没有凝集素表现出的细胞类型差异。它可以用作HCS（高含量筛选）的分割工具，以及对细胞质膜进行染色以用于标准荧光显微镜检查。试剂盒中使用的染色剂可以固定，但不能通透，因此不适用于还涉及通过抗体探测内部靶标的实验。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒。

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Cy5滤波片
发射： Cy5滤波片
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中准备细胞
2.将细胞与Cellpaint 深红色工作溶液在37°C下孵育10-20分钟
3.在荧光显微镜下以Ex / Em = 640/660 nm（Cy5滤光片组）分析细胞

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Cellpaint 深红色原液（500X）：
将100 µL DMSO（组分C）添加到Cellpaint 深红色（组分A）的小瓶中，制成500X Cellpaint Deep Red储备液。 注意：避光。为了存放，请将管子紧紧密封。

 

2.工作溶液配制

将20 µL 500X Cellpaint 深红色原液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Cellpaint Deep Red工作溶液。 这种Cellpaint 深红色工作溶液在室温下至少可稳定8小时。 避光。 注意：20 µL 500X Cellpaint 深红色500X储备液足以用于一个96孔板。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.在细胞板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的Cellpaint 深红色工作溶液。

2.避光保存，在37°C下孵育细胞10-20分钟。 注意：细胞膜探针的最佳浓度取决于具体应用。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

3.除去每个孔中的Cellpaint 深红色工作溶液。

4.用生理缓冲液（例如HHBS，PBS或您选择的缓冲液）洗涤细胞3次。

5.染色后固定细胞（可选）。用4％甲醛固定细胞15-30分钟。 用生理缓冲液洗涤细胞三遍。

6.使用装有Cy5滤光片组（Ex / Em = 640/660 nm）的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 红色荧光 货号22681

图1.在96孔黑色透明底板中，用Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒*红色荧光*染色的HL-60细胞的荧光图像。 使用配备有Cy5滤光片组的荧光显微镜对细胞成像。

 

参考文献

Activation of the neurokinin 3 receptor promotes filopodia growth and sprouting in rat embryonic hypothalamic cells
Authors: Flynn FW, Kinney-Lang E, Hoekstra C, Pratt DL, Thakar A.
Journal: Dev Neurobiol (2015): 12

Probing endocytosis from the enterocyte brush border using fluorescent lipophilic dyes: lipid sorting at the apical cell surface
Authors: Danielsen EM.
Journal: Histochem Cell Biol (2015): 545

Imaging fenestrations in liver sinusoidal endothelial cells by optical localization microscopy
Authors: Monkemoller V, Schuttpelz M, McCourt P, Sorensen K, Smedsrod B, Huser T.
Journal: Phys Chem Chem Phys (2014): 12576

Effects of corticotrophin releasing hormone (CRH) on cell viability and differentiation in the human BeWo choriocarcinoma cell line: a potential syncytialisation inducer distinct from cyclic adenosine monophosphate (cAMP)
Authors: Chen Y, Allars M, Pan X, Maiti K, Angeli G, Smith R, Nicholson RC.
Journal: Reprod Biol Endocrinol (2013): 30

Evaluation of high-throughput screening for in vitro micronucleus test using fluorescence-based cell imaging
Authors: Shibai-Ogata A, Kakinuma C, Hioki T, Kasahara T.
Journal: Mutagenesis (2011): 709

A rapid, inexpensive high throughput screen method for neurite outgrowth
Authors: Yeyeodu ST, Witherspoon SM, Gilyazova N, Ibeanu GC.
Journal: Curr Chem Genomics (2010): 74

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光 Cat#22680
Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 绿色荧光 Cat#22682

说明书
Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 红色荧光 .pdf

ReadiUse 6色 人 TBNK抗体试剂盒 *Dry Reagent Format* 货号90011-AAT Bioquest荧光染料

发表于由
回复

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

ReadiUse 6色 人 TBNK抗体试剂盒 *Dry Reagent Format*

ReadiUse 6色 人 TBNK抗体试剂盒 *Dry Reagent Format*

ReadiUse 6色 人 TBNK抗体试剂盒 *Dry Reagent Format* 货号90011 货号 90011 存储条件 室温储存不要冷冻, 避免光照
规格 25 Tests 价格 11400
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

ReadiUse 6色人TBNK抗体试剂盒利用干燥的多色珠子通过流式细胞术鉴定淋巴细胞亚群、CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞、B 细胞和 NK 细胞。 该试剂含有针对人 CD3、CD4、CD8、CD16、C19、CD45 和 CD56 的荧光标记抗体。 该试剂盒旨在以“裂解/免洗”形式用于分析人类全血。 该试剂盒中还包括用于识别死细胞的活性染料和用于确定淋巴细胞亚群细胞绝对浓度的荧光计数珠的精确数量。

产品说明书

操作方案

概述

仪器
ReadiUse 6-Color Human TBNK Antibody Kit 设计用于配备适当计算机硬件和软件的流式细胞仪。 流式细胞仪必须配备：
1.488 nm 蓝色激光和 635 nm 红色激光
2.能够检测光散射（正面和侧面）
3.488nm 激光激发时的四色荧光通道：FITC、PE、PerCP-Cy5.5 和 PE-Cy7
4.635nm 激光激发时的双色荧光通道：APC 和 APC-Cy7
5.可选：405nm 紫激光，配备 455nm 检测通道

 

规格

激发光 发射光线 缀合反应 推荐通道 (例如: Cytek Aurora)
Blue 520 nm CD3 (SK7) – iFluor™ 488 B2 (518-529 nm)
Blue 575 nm CD16 (3G8) – PE, CD56 (MY31) – PE B4 (560-583 nm)
Blue 700 nm CD45 (2D1) – PerCP-iFluor™ 680 B9 (688-707 nm)
Blue 780 nm CD4 (SK3) – PE-iFluor™ 750 B13 (772-795 nm)
Red 665 nm CD19 (SJ25C1) – APC R1 (652-669 nm)
Red 780 nm CD8 (SK1) – APC-iFluor™ 750 R7 (772-795 nm)
Violet 455 nm NucPO-1 V3 (451-466 nm)

 

防范措施
1.该试剂含有叠氮化钠。 吞食叠氮化钠是有害的 (R22)。请穿着合适的防护服。 如果吞食，请立即就医。 与酸接触会释放有毒气体。 叠氮化物在处理过程中应用大量水冲洗，以避免铅或铜管道中的沉积物。
2.10X Lyse/Fix Buffer（组分 B）含有甲醛。 甲醛有毒，避免吸入或接触。
3.所有血液样本都被视为生物危害品。请按照当地相关规定处理。

 

工作溶液的配制

1X 裂解/修复缓冲液
通过向 10X 裂解/固定缓冲液瓶（组分 B）中加入 3.0 mL 去离子水来制备 1X 裂解/固定缓冲液。 将瓶子混合并重新标记为 1X Lysis/Fix Buffer。

 

样品制备
1.制备血细胞样本，可以使用在 EDTA 管中收集的新鲜血液或浓度不超过 106 个细胞/mL 的分离 PBMC。
2.从袋中取出所需数量的试剂管并重新密封袋。
3.彻底混合样品并将 50 μL 的样品准确分配到指定的试剂管中。注意样品分配的准确性将影响确定的绝对细胞浓度的准确性。
4.轻轻涡旋每个管 30 秒，以确保干燥的试剂完全溶解。
5.在室温下孵育 20 分钟。保护管免受直射光。
6.在每个试管中加入 450 µL 1X Lysis/Fix Buffer 并涡旋 10 秒。将试管避光至少 15 分钟。
7.以低速彻底涡旋样品管并加载到细胞仪上进行分析。 ReadiUse 6色 人 TBNK抗体试剂盒，设计用于裂解/免洗形式。如果在分析前清洗样品，将失去确定绝对细胞浓度的能力。
8.流式细胞仪采集：根据制造商的说明启动和操作流式细胞仪。使用适当的细胞仪专用软件分析数据。

说明书
ReadiUse 6色 人 TBNK抗体试剂盒 *Dry Reagent Format*.pdf

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 货号22813-AAT Bioquest荧光染料

发表于由
回复

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 货号22813 货号 22813 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7，起始Caspase级联反应。在正常发育的中枢神经系统中，活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9具有底物的选择性，其识别底物基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用Ac-LEHD-AMC作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割AMC产生强蓝色荧光，eX/eM = 350/450 nm。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分。该实验稳定、快速且适应高通量筛选的需求。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。很多实验室利用本试剂盒进行高通量抑制剂的筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 375nm
发射： 435nm
cutoff： 420nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 顶或底读模式

产品说明书

样品实验分析

简要概述

用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
加入等体积的Caspase 9工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
在室温下孵育30-60分钟
监测Ex / Em = 375/435 nm处的荧光（截止= 420 nm）

 

工作溶液配制

将50μLCaspase9底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 9工作溶液。 避光。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 9工作溶液。

4.将Caspase 9工作溶液板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 9工作溶液前10分钟，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂，以确认对胱天蛋白酶9样活性的抑制作用。

5.将细胞板（特别是非贴壁细胞）以800rpm离心2分钟。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 375 / 435nm（截止= 420nm）下监测荧光强度。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 货号22813

图1.使用Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 9活性 蓝色荧光 。 将Jurkat细胞以300,000个细胞/90μL/孔接种在Costar黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞4小时。 加入半胱天冬酶9工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用FlexStation 酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 375 / 435nm（截止值= 420nm）下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22799
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 Cat#22817
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 Cat#22816

说明书
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 .pdf

ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒 货号60000-AAT Bioquest荧光染料

发表于由
回复

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒

ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒

ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒 货号60000 货号 60000 存储条件 在零下15度以下保存
规格 50 Tests 价格 3924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒可逐步分离哺乳动物细胞或组织中的核和细胞质提取物。 分离的蛋白质具有高浓度并保留其生物学活性。 ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒的核和细胞质提取物与许多下游应用兼容，包括酶活性测定和荧光Western印迹等。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用PBS冲洗细胞
  2. 加入500 µL细胞质提取缓冲液
  3. 离心20秒
  4. 收集上清液（细胞质提取物）
  5. 将沉淀重新悬浮在150 µL 1X高盐缓冲液中
  6. 离心20分钟
  7. 收集上清液（核提取物）

 

溶液配制

工作溶液配制

1.细胞液提取缓冲液（1X）：将100 µL的10X蛋白酶抑制剂（组分C）和1 µL的DTT（组分D）添加到0.9 mL的细胞质提取缓冲液（组分A）中。

2.核提取缓冲液（1X）：将100 µL 10X蛋白酶抑制剂（组分C）和1 µL DTT（组分D）添加到0.9 mL核提取缓冲液（组分B）中。

注意：0.5 mL 1X细胞质提取缓冲液和150 µL 1X核提取缓冲液足以进行1次测定，并根据需要准备新鲜的缓冲液。

 

实验步骤

1.用冷PBS冲洗细胞1次。 对于悬浮的细胞，请通过离心收集细胞。

2.向细胞中加入500 µL 1X Cytosol提取缓冲液。 对于贴壁细胞，将贴壁细胞刮入1.5 mL离心管中。

3.剧烈涡旋以完全重悬细胞。

4.以16,000 g离心1-2分钟，然后将上清液（细胞质提取物）转移到另一个干净的试管中。 将试管放在冰上以备下游使用或在-80°C下保存。

5.将沉淀重悬于150 µL 1X核提取缓冲液中。

6.剧烈涡旋以完全重悬沉淀。

7.将试管在4°C旋转30分钟。

8.以16,000g离心20分钟，然后将上清液（核提取物）转移到另一个干净的试管中。 将试管放在冰上以备下游使用或在-80°C下保存。

 

图示

ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒 货号60000

图1.使用ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒（AATBioquest®，Cat＃60000）收集Hela细胞的核和细胞质提取物。 通过Amplite 荧光荧光胺蛋白质定量试剂盒（AATBioquest®，Cat＃11100）对蛋白质进行定量。 A.在有或没有HDAC抑制剂曲古抑菌素A的情况下孵育8ug核或细胞质提取物，并通过Amplite 荧光HDAC活性测定试剂盒（AATBioquest®，Cat#13601）测量HDAC活性。 B.使用40ug总蛋白的核或细胞质提取物。 2 ug / ml兔抗HDAC1抗体用于探测硝酸纤维素膜过夜。 使用了10 ug / ml的iFluor 647山羊抗兔IgG（H + L）（AATBioquest®，Cat#16809）。 该检测通过UVP多光谱成像系统（Biolite）可视化。 M：标记，Nu：核提取物，细胞：细胞质提取物。
ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒 货号60000

图2.使用ReadiPrep Nucleus / Cytosol分离试剂盒收集了Jurkat细胞的核和细胞质提取物。 通过Amplite 荧光荧光胺蛋白质定量试剂盒（AATBioquest®，Cat＃11100）对蛋白质进行定量。 在有或没有HDAC抑制剂Trichostain A的情况下孵育8 µg核或细胞质提取物，并通过Amplite 荧光HDAC活性测定试剂盒（AATBioquest®，Cat#13601）测量HDAC活性。
ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒 货号60000

图3.使用ReadiPrep Nucleus / Cytosol Fractionation Kit收集了Hela细胞的核和细胞质提取物。 通过Amplite 荧光荧光胺蛋白质定量试剂盒（AATBioquest®，Cat＃11100）对蛋白质进行定量。 在有或没有HDAC抑制剂Trichostain A的情况下孵育8 µg核或细胞质提取物，并通过Amplite 荧光HDAC活性测定试剂盒（AATBioquest®，Cat#13601）测量HDAC活性。

 

参考文献

Studied by Rapid Fractionation of Barley (Hordeum vulgare) Protoplasts
Authors: Gardestrom, P.; Wigge, B., Influence of Photorespiration on ATP/ADP Ratios in the Chloroplasts, Mitochondria, and Cytosol
Journal: Plant Physiol (1988): 69-76

and mitochondria
Authors: Lilley, R. M.; Stitt, M.; Mader, G.; Heldt, H. W., Rapid fractionation of wheat leaf protoplasts using membrane filtration : the determination of metabolite levels in the chloroplasts, cytosol
Journal: Plant Physiol (1982): 965-70

说明书
ReadiPrep 核/细胞质分离试剂盒.pdf