活性氧 ROS Brite 670 货号16002-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite 670

活性氧 ROS Brite 670

活性氧 ROS Brite 670    货号16002 货号 16002 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 758.85 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针670是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂,活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如:超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性,因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物,它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下(如紫外线照射或者高温环境下),ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害,日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ,如电磁辐射。在氧化应激条件下,活性氧产量大幅度增加, 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关,例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 670试剂是用以测量细胞内氧化应激水平的新型荧光分子探针,可以被常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像。细胞渗透性  ROS Brite 670试剂是没有荧光的,在与活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的ROS Brite 活性氧荧光探针670。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品操作及实验分析

1)在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中,制成5至10 µM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)将细胞与ROS Brite (5-10 µM,来自步骤#1)在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意:所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同,需要测试不同的浓度才能获得最佳剂量。 对于cat#16053,可能使用的浓度较低,例如0.5-5 uM。

4)用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177–189

 

相关产品

产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050

说明书
活性氧 ROS Brite 670.pdf

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪 货号22971-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪     货号22971 货号 22971 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 540 Em (nm) 590
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要,这些过程包括基因表达,信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤,从而导致多种疾病的发病机理,包括癌症,心血管疾病,神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性,可以快速,选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法,可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
  3. 添加MitoROS 580工作溶液
  4. 在37°C下将细胞染色30-60分钟
  5. 检测Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)处的荧光增加(底部读取模式)或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜

 

溶液配制

储备溶液配制

  1. MitoROS 580储备溶液(500X):将50 µL DMSO(组分C)添加到MitoROS 580(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X MitoROS 580储备液,避光。 注意:25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。 为了存放,请将管子紧紧密封。

 

工作溶液配制

将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成MitoROS 580工作溶液。 注意:此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

  1. 在所需的缓冲液(例如PBS或HHBS)中,用10 µL 10X测试化合物(96孔板)或5 µL 5X测试化合物(384孔板)处理细胞。 对于对照孔(未处理的细胞),添加相应量的化合物缓冲液。

  2. 为了诱导超氧化物,将细胞板在37°C下孵育所需的时间,避光。 注意:我们在37°C下用50 µM抗霉素A(AMA)处理HeLa细胞30分钟,以诱导超氧化物。 有关详细信息,请参见图1。

  3. 将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。

  4. 将细胞在37°C下孵育30至60分钟。

  5. 使用荧光酶标仪(Ext / Em = 540/590 nm(Cutoff = 570 m))检测荧光强度,或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

图示

 

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪     货号22971

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒(Cat#22971)在HeLa细胞中测量超氧化物的荧光图像。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 AMA处理:将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A(AMA)处理30分钟,然后与MitoROS 580孵育1小时。 未经处理的对照:HeLa细胞与MitoROS 580在37°C下孵育1小时,未经AMA处理。 使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜检测荧光信号。

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪     货号22971

图2.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒(Cat#22971)检测HeLa细胞中的细胞内超氧化物。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 将细胞与50 µM绿脓素(Pyo)孵育; 50 µM抗霉素A(AMA)或未经处理(对照)在37ºC下放置30分钟。 然后将细胞与MitoROS 580在37℃孵育1小时。 使用CLARIOstar酶标仪(BMG Labtech)以底部读取模式在Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)下检测荧光信号。

 

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

说明书
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活性氧 ROS Brite HPF 货号16051-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite HPF

活性氧 ROS Brite HPF

活性氧 ROS Brite HPF    货号16051 货号 16051 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1944
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 424.40 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针HPF是美国AAT Bioquest研发的检测活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加,导致随后膜脂,蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关,包括动脉粥样硬化,致癌作用,缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。细胞渗透性ROS Brite™APF和HPF试剂是非荧光的并且在与羟基自由基或过氧亚硝酸根阴离子反应时产生亮绿色荧光(激发/发射= 490 / 515nm),APF也将与次氯酸根阴离子(OCl-)反应。此外,APF和HPF在过氧化物酶存在下也与过氧化氢反应。可以使用荧光成像,高内容成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 APF和HPF显示出对光诱导氧化的相对高的抗性。 APF和HPF在与羟基或过氧亚硝酸根阴离子反应之前是非荧光的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的ROS检测探针。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明孔板
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

ROS Brite 染料的分析方案

该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前,根据需要处理细胞。

 

1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF(或HPF)储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备1至10μM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)用ROS Brite APF(或HPF)(1-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞20-60分钟。

4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm(截止= 515nM)下用底部读取模式分析细胞(例如,用于荧光显微镜的FITC滤光片,用于流式细胞仪的FL1滤光片)。

注意:BSA和酚红会影响荧光,应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。

 

参考文献

Developmental toxicity evaluation of three hexabromocyclododecane diastereoisomers on zebrafish embryos
Authors: Du M, Zhang D, Yan C, Zhang X.
Journal: Aquat Toxicol (2012): 1

MAPK inhibitors and siRNAs differentially affect cell death and ROS levels in arsenic trioxide-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1611

MG132, a proteasome inhibitor, induces human pulmonary fibroblast cell death via increasing ROS levels and GSH depletion
Authors: Park WH, Kim SH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1284

beta-Lapachone induces heart morphogenetic and functional defects by promoting the death of erythrocytes and the endocardium in zebrafish embryos
Authors: Wu YT, Lin CY, Tsai MY, Chen YH, Lu YF, Huang CJ, Cheng CM, Hwang SP.
Journal: J Biomed Sci (2011): 70

Enhancement of gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell death by N-acetyl cysteine and L-buthionine sulfoximine
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 992

Gallic acid-induced lung cancer cell death is accompanied by ROS increase and glutathione depletion
Authors: You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Mol Cell Biochem (2011): 295

MAPK inhibitors differentially affect gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell growth inhibition
Authors: Park WH.
Journal: Mol Med Report (2011): 193

Mitogen-activated protein kinase inhibitors differently affect the growth inhibition and death of a proteasome inhibitor, MG132-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 1945

Proteasome inhibition by MG132 induces growth inhibition and death of human pulmonary fibroblast cells in a caspase-independent manner
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Oncol Rep (2011): 1705

Effects of arsenic trioxide on cell death, reactive oxygen species and glutathione levels in different cell types
Authors: Han YH, Moon HJ, You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Int J Mol Med (2010): 121

 

相关产品

产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050

说明书
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活性氧 ROS Brite 570 货号16000-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite 570

活性氧 ROS Brite 570

活性氧 ROS Brite 570    货号16000 货号 16000 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 555 Em (nm) 569
分子量 732.81 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针570是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂,活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如:超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性,因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物,它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下(如紫外线照射或者高温环境下),ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害,日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ,如电磁辐射。在氧化应激条件下,活性氧产量大幅度增加, 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关,例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 570试剂是用以测量细胞内氧化应激水平的新型荧光分子探针,可以被常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像。细胞渗透性  ROS Brite 570试剂是没有荧光的,在与活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的ROS Brite 活性氧荧光探针570。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 695nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品操作及实验分析

1)在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中,制成5至10 µM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)将细胞与ROS Brite (5-10 µM,来自步骤#1)在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意:所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同,需要测试不同的浓度才能获得最佳剂量。 对于cat#16053,可能使用的浓度较低,例如0.5-5 uM。

4)用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177–189

 

相关产品

产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050
ROS Brite 活性氧荧光探针670 Cat#16002

说明书
活性氧 ROS Brite 570.pdf

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光 货号22901-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光     货号22901 货号 22901 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 520 Em (nm) 605
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产物,在细胞信号传导中起重要作用。但是,在与氧化应激相关的状态下,ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病,糖尿病,骨质疏松症,中风,炎性疾病,许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Amplite 荧光ROS检测试剂盒使用我们独特的ROS指示剂来定量活细胞中的ROS。 Amplite ROS Red具有细胞渗透性。与ROS反应时会产生红色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”测定形式。 Amplite 荧光ROS测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法,可在1-2小时的孵育中检测活细胞中的细胞内ROS。该测定可以以方便的96孔或384孔板形式进行,无需分离步骤即可轻松实现自动化。使用荧光酶标仪或荧光显微镜可以轻松读取其信号。它可用于定量ROS活性或筛选ROS抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 520nm
发射: 605nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Texas Red滤波片组
荧光酶标仪  
激发: 520nm
发射: 605nm
cutoff: 590nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 加入Amplite ROS Red工作溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在37°C下孵育细胞1小时
  4. 用测试化合物处理细胞以诱导ROS
  5. 在Ex / Em = 520/605 nm(截止= 590 nm)或安装Ex / Em = 520/605 nm滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加(底部读取模式)

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Amplite ROS Red储备液(500X):将40 µL DMSO(组分C)添加到Amplite ROS Red(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X Amplite ROS Red储备液。 避光。 注意:20 µL 500X Amplite ROS Red储备液足以用于1个板。 注意:如果将试管紧密密封并避免光照,可以将未使用的部分等分并在<-20°C下保存超过一个月。 避免重复冻融循环。

 

工作溶液配制

将20 µL 500X Amplite ROS Red储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成Amplite ROS Red工作溶液。 注意:此Amplite ROS Red工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Amplite ROS Red工作溶液添加到细胞板中。

2.将细胞在5%CO2、37°C的培养箱中孵育一小时。

3.在所需的缓冲液(例如PBS或HHBS)中,用20µL 11X测试化合物(96孔板)或10 µL 6X测试化合物(384孔板)处理细胞。 对于对照孔(未处理的细胞),添加相应量的化合物缓冲液。

4.要诱导ROS,请在室温下或在5%CO2、37°C的培养箱中孵育细胞板至少15分钟(对于用1 mM H2O2处理的Hela细胞为30分钟)。

5.在Ex / Em = 520/605 nm(截止= 590 nm)处使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光的增加,或在Ex / Em = 520/605 nm滤光片组(Texas Red)下使用荧光显微镜观察细胞)。

 

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

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