钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 货号21104-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM     货号21104 货号 21104 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 2604
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 1082.91 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21104

产品名称:钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM

规格:10×50 ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1082.91

溶剂:DMSO

激发波长(nm):494

发射波长(nm):517

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC
发射: FITC
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

 

产品介绍

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2+后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2+浓度的变化。在可见光激发钙指示剂中,Fluo-3和Fluo-4最常用。但是,Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后在活细胞中仅适度发荧光,并且需要苛刻的细胞加载条件才能最大化其细胞钙反应。开发Fluo-8®染料可改善细胞负载和钙响应,同时保持便捷的Fluo-3和Fluo-4光谱波长(在〜490 nm处具有最大激发和在〜520 nm处具有最大发射)。Fluo-8®AM仅需要室温,而Fluo-3 AM和Fluo-4 AM需要37℃的细胞负载。此外,Fluo-8®的亮度是Fluo-4 AM的2倍,是Fluo-3 AM的4倍。AAT Bioquest提供了一套出色的Fluo-8®试剂,具有不同的钙结合亲和力(Fluo-8®:Kd = 389 nM; Fluo-8H:Kd = 232 nM; Fluo-8L:Kd = 1.86 µM; Fluo-8FF :Kd = 10 µM)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 。 

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钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

试剂应用文献

AMPA receptors in the synapse turnover by monomer diffusion
Authors: 
Morise, Jyoji and Suzuki, Kenichi GN and Kitagawa, Ayaka and Wakazono, Yoshihiko and Takamiya, Kogo and Tsunoyama, Taka A and Nemoto, Yuri L and Takematsu, Hiromu and Kusumi, Akihiro and Oka, Shogo
Journal: 
Nature communications (2019): 1–18

Cryo-EM Studies of TMEM16F Calcium-Activated Ion Channel Suggest Features Important for Lipid Scrambling
Authors: Feng, Shengjie and Dang, Shangyu and Han, Tina Wei and Ye, Wenlei and Jin, Peng and Cheng, Tong and Li, Junrui and Jan, Yuh Nung and Jan, Lily Yeh and Cheng, Yifan
Journal: Cell Reports (2019): 567–579

Discrimination of Dormant and Active Hematopoietic Stem Cells by G0 Marker Reveals Dormancy Regulation by Cytoplasmic Calcium
Authors: Fukushima, Tsuyoshi and Tanaka, Yosuke and Hamey, Fiona K and Chang, Chih-Hsiang and Oki, Toshihiko and Asada, Shuhei and Hayashi, Yasutaka and Fujino, Takeshi and Yonezawa, Taishi and Takeda, Reina and others
Journal: Cell Reports (2019): 4144–4158

Ketamine Increases Proliferation of Human iPSC-Derived Neuronal Progenitor Cells via Insulin-Like Growth Factor 2 and Independent of the NMDA Receptor
Authors: Grossert, Aless and ra and Mehrjardi, Narges Zare and Bailey, Sarah J and Lindsay, Mark A and Hescheler, Jürgen and Saric, Tomo and Teusch, Nicole
Journal: Cells (2019): 1139

MRGPRX4 is a bile acid receptor for human cholestatic itch
Authors: Yu, Huasheng and Zhao, Tianjun and Liu, Simin and Wu, Qinxue and Johnson, Omar and Wu, Zhaofa and Zhuang, Zihao and Shi, Yaocheng and Peng, Luxin and He, Renxi and others
Journal: eLife (2019): e48431

P2Y6 signaling in alveolar macrophages prevents leukotriene-dependent type 2 allergic lung inflammation
Authors: Nagai, Jun and Balestrieri, Barbara and Fanning, Laura B and Kyin, Timothy and Cirka, Haley and Lin, Junrui and Idzko, Marco and Zech, Andreas and Kim, Edy Y and Brennan, Patrick J and others
Journal: The Journal of clinical investigation (2019)

Hyperglycaemia disrupts conducted vasodilation in the resistance vasculature of db/db mice
Authors: Lemmey, Hamish AL and Ye, Xi and Ding, Hong C and Triggle, Christopher R and Garland, Christopher J and Dora, Kim A
Journal: Vascular pharmacology (2018): 29–35

Methionine and valine activate the mammalian target of rapamycin complex 1 pathway through heterodimeric amino acid taste receptor (TAS1R1/TAS1R3) and intracellular Ca2+ in bovine mammary epithelial cells
Authors: Zhou, Y and Zhou, Z and Peng, J and Loor, Juan J
Journal: Journal of dairy science (2018): 11354–11363

TRPA1-dependent reversible opening of tight junction by natural compounds with an $alpha$, $beta$-unsaturated moiety and capsaicin
Authors: Kanda, Yusuke and Yamasaki, Youhei and Sasaki-Yamaguchi, Yoshie and Ida-Koga, Noriko and Kamisuki, Shinji and Sugawara, Fumio and Nagumo, Yoko and Usui, Takeo
Journal: Scientific reports (2018): 1–13

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: Menegon, A and Pitassi, S and Mazzocchi, N and Redaelli, L and Rizzetto, R and Roll and JF and Poli, C and Imberti, M and Lanati, A and Grohovaz, F
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Gong, Xiaoyuan and Xie, Wenbin and Wang, Bin and Gu, Lingchuan and Wang, Fuyou and Ren, Xiang and Chen, Cheng and Yang, Liu
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Ishii, Masaaki and Rohrer, Bärbel
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Ishii, Masaaki and Rohrer, Bärbel
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

High-throughput screen detects calcium signaling dysfunction in typical sporadic autism spectrum disorder
Authors: Schmunk, Galina and Nguyen, Rachel L and Ferguson, David L and Kumar, Kenny and Parker, Ian and Gargus, J Jay
Journal: Scientific Reports (2017): 40740

 

参考文献

Passive and parallel microfluidic formation of droplet interface bilayers (DIBs) for measurement of leakage of small molecules through artificial phospholipid membranes
Authors: Magdalena A Czekalska, Tomasz S Kaminski, Karol Makuch, Piotr Garstecki
Journal: Sensors and Actuators B: Chemical (2019)

Development of micro mechanical device having two-dimensional array of micro chambers for cell stretching
Authors: K Minami, T Hayashi, K Sato, T Nakahara
Journal: Biomedical microdevices (2018): 10

Spatiotemporal magnetic fields enhance cytosolic Ca 2+ levels and induce actin polymerization via activation of voltage-gated sodium channels in skeletal muscle cells
Authors: Mónica Rubio Ayala, Tatiana Syrovets, Susanne Hafner, Vitalii Zablotskii, Alexandr Dejneka, Thomas Simmet
Journal: Biomaterials (2018)

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Masaaki Ishii, Bärbel Rohrer
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

 

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说明书
钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM .pdf

膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS CAS 90134-00-2 货号21498-AAT Bioquest荧光染料

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膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS CAS 90134-00-2

膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS CAS 90134-00-2

膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS CAS 90134-00-2    货号21498 货号 21498 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 2604
Ex (nm) 482 Em (nm) 686
分子量 480.66 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21498

产品名称:膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS

CAS:90134-00-2

规格:5mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:480.66

溶剂:DMSO

激发波长(nm):497

发射波长(nm):705

 

产品介绍

膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS是美国AAT Bioquest生产的用于膜电位的荧光探针。电位敏感的ANEP染料是两性离子分子,在不同的细胞和组织类型中表现出最一致的电位响应。可以通过将原液直接添加到细胞培养基中,使用Pluronic®F-127或通过逆行标记将它们引入细胞。ANEP染料在结合到膜之前是不发荧光的,并且它们对周围环境中的电势变化的荧光响应。ANEP染料是一种快速响应的探针,通过响应周围电场的变化,通过改变其电子结构并因此改变其荧光性质来工作。它们的光学响应足够快,可以检测到兴奋性细胞(包括单个神经元,心脏细胞和完整的大脑)中的瞬态(毫秒)电势变化。然而,它们的电位依赖性荧光变化的幅度通常很小;快速响应探针通常每100 mV显示2-10%的荧光变化。此外,这些染料在其激发光谱中显示出电位依赖性变化,因此可以使用激发比测量定量膜电位。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS。 

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参考文献

The voltage-sensitive dye di-4-ANEPPS slows conduction velocity in isolated guinea pig hearts
Authors: Larsen AP, Sciuto KJ, Moreno AP, Poelzing S.
Journal: Heart Rhythm (2012): 1493

A novel approach to dual excitation ratiometric optical mapping of cardiac action potentials with di-4-ANEPPS using pulsed LED excitation
Authors: Bachtel AD, Gray RA, Stohlman JM, Bourgeois EB, Pollard AE, Rogers JM.
Journal: IEEE Trans Biomed Eng (2011): 2120

Potential-modulated fluorescence spectroscopy of the membrane potential-sensitive dye di-4-ANEPPS at the 1,2-dichloroethane/water interface
Authors: Osakai T, Sawada J, Nagatani H.
Journal: Anal Bioanal Chem (2009): 1055

Validation of a voltage-sensitive dye (di-4-ANEPPS)-based method for assessing drug-induced delayed repolarisation in beagle dog left ventricular midmyocardial myocytes
Authors: Hardy ME, Pollard CE, Small BG, Bridgland-Taylor M, Woods AJ, Valentin JP, Abi-Gerges N.
Journal: J Pharmacol Toxicol Methods (2009): 94

Effects of voltage sensitive dye di-4-ANEPPS on guinea pig and rabbit myocardium
Authors: Novakova M, Bardonova J, Provaznik I, Taborska E, Bochorakova H, Paulova H, Horky D.
Journal: Gen Physiol Biophys (2008): 45

[Spectral study of voltage sensitive dye di-4-ANEPPS]
Authors: Xu ZH, Zhang ZX, Wang J, Zhang H, Li Z, Jin YS, Ding HY.
Journal: Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi (2007): 1359

Two-photon excitation of di-4-ANEPPS for optical recording of action potentials in rabbit heart
Authors: Dumas JH, 3rd, Knisley SB.
Journal: Ann Biomed Eng (2005): 1802

Quantification of optical signals with electrophysiological signals in neural activities of Di-4-ANEPPS stained rat hippocampal slices
Authors: Tominaga T, Tominaga Y, Yamada H, Matsumoto G, Ichikawa M.
Journal: J Neurosci Methods (2000): 11

Errors caused by combination of Di-4 ANEPPS and Fluo3/4 for simultaneous measurements of transmembrane potentials and intracellular calcium
Authors: Johnson PL, Smith W, Baynham TC, Knisley SB.
Journal: Ann Biomed Eng (1999): 563

Measurement of membrane potential in Saccharomyces cerevisiae by the electrochromic probe di-4-ANEPPS: effect of intracellular probe distribution
Authors: Chaloupka R, Plasek J, Slavik J, Siglerova V, Sigler K.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (1997): 451

说明书
膜电位荧光探针Di-4-ANEPPS CAS 90134-00-2.pdf

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红 货号13433-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红    货号13433 货号 13433 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 532 Em (nm) 619
分子量 1565.50 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,ProRed 蛋白酶底物无色,无荧光。ProRed 阻断蛋白酶裂解肽基被半胱氨酸蛋白酶产生强烈的红色荧光,可以在〜620 nm处的〜530 nm激发波长被监控到。 ProRed 衍生的胱天蛋白酶底物是最敏感的红色指示剂,用于荧光及各种蛋白酶活性检测。DEVD-ProRed 酶底物主要用于检测蛋白酶3和7。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红。

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产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Degenerin channel activation causes caspase-mediated protein degradation and mitochondrial dysfunction in adult C. elegans muscle
Authors: Christopher J Gaffney, Freya Shephard, Jeff Chu, David L Baillie, Ann Rose, Dumitru Constantin-Teodosiu, Paul L Greenhaff, Nathaniel J Szewczyk
Journal: Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle (2015)

 

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说明书
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-DEVD-ProRed 620 红.pdf

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 货号22655-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒    蓝色荧光    货号22655 货号 22655 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 433 Em (nm) 480
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =350/440nm处以大斯托克斯位移的蓝色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 360nm
发射: 445nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: DAPI滤波片

产品说明书

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 360 / 445nm(DAPI滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻LysoBrite Blue(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysoBrite Blue(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysoBrite NIR(组分A)就足够了。 将未使用的LysoBrite Blue(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Dapi过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Dapi过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒    蓝色荧光    货号22655

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像* Costar黑色96孔板中的蓝色荧光*

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

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说明书
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trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产) 货号1443-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产)

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产)

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产)    货号1443 货号 1443 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 0
Ex (nm) 333 Em (nm) 544
分子量 1226.05 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,存在于细胞,血清或其他生物流体中的许多生物化合物是天然荧光的,因此使用常规的快速荧光团导致测定灵敏度的严重限制,这是由于待测定的生物分子的自发荧光引起的高背景。使用长寿命荧光团结合时间分辨检测(激发和发射检测之间的延迟)可以最大限度地减少瞬间荧光干扰。我们的trFluor Eu探针可为需要高灵敏度的分析启用时间分辨荧光检测(TRF)。与更传统的荧光团如Alexa Fluor或花青染料相比,这些trFluor Eu探针具有较大的斯托克斯位移和极长的发射半衰期。与其他TRF化合物相比,我们的trFluor Eu探针具有相对较高的稳定性,高排放产量和与生物分子相关的能力。此外,我们的trFluor Eu探针在与抗体等生物聚合物结合时对荧光猝灭不敏感。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的trFluor Tb琥珀酰亚胺酯。 

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产品说明书

样本标记步骤

注意:该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与trFluor Eu SE的缀合物开发的。请根据您的具体实验进行调整。

 

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100L反应缓冲液(例如,1M碳酸钠溶液或1M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900L目标蛋白质溶液(例如抗体,蛋白质浓度> 2mg / ml,如果可能)混合,得到1 mL蛋白标记储备液。

注意1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。 如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注意2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。 如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注意3:用牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的不纯抗体或抗体不能很好地标记。 叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。 可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得最佳标记结果。

注意4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率显着降低。 为获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到小瓶trFluor?Eu SE中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合之前准备染料储备溶液(溶液B),需及时使用。染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。避免冻融循环。

 

3.确定最佳染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。 蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比率的蛋白质结合物会降低灵敏度。 我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。 通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

 

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。 蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。 假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行结合反应(见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1; 分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比例(DOS)(见下文)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定最佳的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1在有效摇动下,将适量的染料储备溶液(溶液B)加入到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中。

注意:溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。 如果跳过步骤3,我们建议使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接来自步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3一旦样品在顶部树脂表面下方运行,加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4将更多PBS(pH 7.2-7.4)加入所需样品中以完成柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注意1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注意2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥(见说明书)。

 

参考文献

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产品名称 货号
trFluor Tb马来酰亚胺 Cat#1444
trFluor Eu琥珀酰亚胺酯 Cat#1433

说明书
trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产).pdf