Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒 货号17645-AAT Bioquest荧光染料

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Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒

货号 17645 存储条件 Multiple
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 503 Em (nm) 527
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

DNA定量是DNA样品制备过程中的一项重要工作,Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒提供了一种用Helixyte Green BR快速测定dsDNA的方法。该测定法在三个数量级上是线性的,并且比紫外线吸收度读数灵敏度高几个数量级。Helixyte Green-BR与dsDNA结合后荧光增强,序列依赖性小,可准确测定基因组DNA、病毒DNA、miniprep-DNA或PCR扩增产物等多种来源的DNA样品。该方法对RNA上的双链DNA(dsDNA)具有高度的选择性,并且被优化以测量从10 pg/ul到10 ng/ul的DNA浓度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 530nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备dSDNA标准品,测试样品和染料工作溶液
  2. 添加DNA标准液或测试样品(50 uL)
  3. 添加Helixyte Green-BR工作溶液(50 uL)
  4. 在室温下孵育2分钟
  5. 检测Ex / Em = 490/530 nm的荧光强度

提示:操作前将所有组件加热到室温。暂时没有关于Helixyte Green dsDNA染色剂的致突变性或毒性的数据。由于该试剂与核酸结合,因此应将其视为潜在的诱变剂,应谨慎处理。DMSO储备溶液应特别小心,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

溶液配制

标准溶液配制

将100 uL的100 ug / mL dsDNA标准溶液(组分C)添加到400 uL的测定缓冲液(组分B)中,以生成20 ug / mL的dsDNA标准溶液。然后用测定缓冲液(组分B)进行1:3的系列稀释,以得到0至20 ug / mL的系列稀释的dsDNA标准品。

 

工作溶液配制

Helixyte Green BR工作溶液:将50 uL Helixyte Green BR(组分A)添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中,使总体积为5.050 mL。通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备该溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。为了获得最佳结果,应在准备后的几个小时内使用此溶液。

 

实验步骤

表1.  在透明底部96孔微孔板中的dsDNA标准品和测试样品的布局。DS = dsDNA标准品(DS1-DS7,20至0.027 ug / mL); BL =空白对照;TS =测试样品

BL

BL

TS

TS

DS1

DS1

DS2

DS2

DS3

DS3

 

 

DS4

DS4

 

 

DS5

DS5

 

 

DS6

DS6

 

 

DS7

DS7

 

 

表2.  每个孔的试剂组成

Well

Volume

Reagent

DS1-DS7

50 uL

连续稀释 (20 to 0.027 ug/mL)

BL

50 uL

缓冲液 (Component B)

TS

50 uL

实验样品

  1. 根据表1和表2提供的布局,制备dsDNA标准品(DS)、空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 uL试剂,而不是50 uL。注:根据需要处理细胞或组织样本。
  2. 添加50 uL Helixyte Green-BR染料工作液(2X)分别加入dsDNA标准液、空白对照液和供试品中,使总分析体积为100ul/孔。对于384孔板,添加25 uL的Helixyte Green-BR染料工作溶液,每孔总体积为50 uL/孔。
  3. 在室温下避光培养2分钟。
  4. 在Ex/Em=490/530 nm(截止=515nm)处用荧光酶标仪检测荧光强度。

 

图示

 

 

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒   货号17645

图1.用Helixyte Green dsDNA定量试剂盒在96孔黑色孔板中测量了dsDNA剂量反应。

 

 

参考文献

A new reporter design based on DNA origami nanostructures for quantification of short oligonucleotides using microbeads
Authors: Choi, Y., Schmidt, C., Tinnefeld, P., Bald, I., Rodiger, S.
Journal: Sci Rep (2019): 4769

A universal fluorescence-based toolkit for real-time quantification of DNA and RNA nuclease activity
Authors: Sheppard, E. C., Rogers, S., Harmer, N. J., Chahwan, R.
Journal: Sci Rep (2019): 8853

Effects of Quantification Methods, Isolation Kits, Plasma Biobanking, and Hemolysis on Cell-Free DNA Analysis in Plasma
Authors: Streleckiene, G., Forster, M., Inciuraite, R., Lukosevicius, R., Skieceviciene, J.
Journal: Biopreserv Biobank (2019): ersion=”1.0″ encoding=”UTF-8″ ?>17645.enlEndNote1117Streleckiene, G.Forster, M.Inciuraite, R.Lukosevicius, R.Skieceviciene, J.1Institute for Digestive Research, Lithuanian University of Health Sciences, Kaunas, Lithuania. 2Institute of Clinical Molecu

Flat-top TIRF illumination boosts DNA-PAINT imaging and quantification
Authors: Stehr, F., Stein, J., Schueder, F., Schwille, P., Jungmann, R.
Journal: Nat Commun (2019): 1268

Molecular-Recognition-Based DNA Nanodevices for Enhancing the Direct Visualization and Quantification of Single Vesicles of Tumor Exosomes in Plasma Microsamples
Authors: He, D., Ho, S. L., Chan, H. N., Wang, H., Hai, L., He, X., Wang, K., Li, H. W.
Journal: Anal Chem (2019): 2768-2775

Quantification of fixed adherent cells using a strong enhancer of the fluorescence of DNA dyes
Authors: Ligasova, A., Koberna, K.
Journal: Sci Rep (2019): 8701

A fluorescent reporter for quantification and enrichment of DNA editing by APOBEC-Cas9 or cleavage by Cas9 in living cells
Authors: St Martin, A., Salamango, D., Serebrenik, A., Shaban, N., Brown, W. L., Donati, F., Munagala, U., Conticello, S. G., Harris, R. S.
Journal: Nucleic Acids Res (2018): e84

Accuracy of human sperm DNA oxidation quantification and threshold determination using an 8-OHdG immuno-detection assay
Authors: Vorilhon, S., Brugnon, F., Kocer, A., Dollet, S., Bourgne, C., Berger, M., Janny, L., Pereira, B., Aitken, R. J., Moazamian, A., Gharagozloo, P., Drevet, J., Pons-Rejraji, H.
Journal: Hum Reprod (2018): 553-562

Cell Type-Specific Quantification of Telomere Length and DNA Double-strand Breaks in Individual Lung Cells by Fluorescence In Situ Hybridization and Fluorescent Immunohistochemistry
Authors: van Batenburg, A. A., Kazemier, K. M., Peeters, T., van Oosterhout, M. F. M., van der Vis, J. J., Grutters, J. C., Goldschmeding, R., van Moorsel, C. H. M.
Journal: J Histochem Cytochem (2018): 485-495

Identification and Quantification of Heterogeneously-methylated DNA Fragments Using Epiallele-sensitive Droplet Digital Polymerase Chain Reaction (EAST-ddPCR)
Authors: Menschikowski, M., J and eck, C., Friedemann, M., Richter, S., Thiem, D., Lange, B. S., Suttorp, M.
Journal: Cancer Genomics Proteomics (2018): 299-312

说明书
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Helixyte Green 双链DNA定量试剂 货号17597-AAT Bioquest荧光染料

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Helixyte Green 双链DNA定量试剂

Helixyte Green 双链DNA定量试剂

货号 17597 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 ml 价格 3924
Ex (nm) 502 Em (nm) 522
分子量 661.17 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Helixyte Green dsDNA染料是美国AAT Bioquest生产的一种超灵敏荧光核酸染料,用于定量溶液中的双链DNA(dsDNA)。最近,Helixyte Green dsDNA染料用于PCR产物的直接循环测序方法中的PCR扩增产量。使用标准光谱荧光计和2.5 ng / mL带有荧光酶标仪的dsDNA检测到少至25 pg / mL的dsDNA(在2 mL测定体积中50 pg dsDNA),在ssDNA,RNA和ss存在下检测效果最小 游离核苷酸。该测定在三个数量级上是线性的并且几乎没有序列依赖性。它是从多种来源准确测量DNA的理想选择,包括基因组DNA,病毒DNA,小量制备DNA或PCR。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte Green 双链DNA定量试剂。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

分析方案

以下方案是使用Helixyte Green 定量dsDNA的实例。 在打开样品瓶之前,让Helixyte Green 温热至室温。

注意:没有数据可用于解决Helixyte Green dsDNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合,所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理,并进行适当的处理。 应特别小心处理DMSO储备溶液,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

1.准备Helixyte Green 工作解决方案:

1.1通过在TE(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 7.5-8.0)中浓缩DMSO溶液200倍稀释,制备Helixyte Green的水性工作溶液。 例如,将50μLHelixyteGreen添加至10 mL TE,以制备足够的工作溶液,以在200μL终体积中测定100个样品。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注1:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注2:为获得最佳结果,该溶液应在制备后几小时内使用。

 

2.准备dsDNA标准品的连续稀释液(0至3 ng / mL):

2.1在ddH2O中制备1mg / mL的dsDNA原液(如来自Sigma的小牛胸腺DNA)。

2.2将10μL1mg / mL dsDNA原液(步骤2.1)加入到998 L TE缓冲液中,得到10μg/ mL dsDNA溶液,然后进行1:10和1:2连续稀释,得到1000,100,50,25 ,12.5,6.25,3.125和0 ng / mL。

2.3如说明书中的表1和2中所述,将dsDNA标准品和含有测试样品的DNA添加到96孔固体黑色微孔板中。

 

3.运行dsDNA测定:

3.1将100μLdsDNA测定混合物(来自步骤1.1)添加至dsDNA标准品的每个孔,空白对照和测试样品(参见步骤2.3)以使总dsDNA测定体积为200μL/孔。

注1:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLdsDNA测定混合物。

注2:对于基于曲线的测定,每曲线添加1mL样品和1mL dsDNA测定混合物。

3.2在室温下孵育反应5至10分钟,避光。

3.3使用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(在515nm处截止)观察荧光增加。

3.4空白孔中的荧光(仅含TE缓冲液)用作对照,并从具有dsDNA反应的那些孔的值中减去。 从DNA标准曲线中产生的标准曲线确定样品的DNA浓度。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

说明书
Helixyte Green 双链DNA定量试剂.pdf

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 货号17651-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒    货号17651 货号 17651 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 502 Em (nm) 522
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于DNA定量的试剂盒,Helixyte 绿色dsDNA定量测定试剂盒可用于在ssDNA,RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性地检测低至25 pg / ml的dsDNA。 Helixyte Green与dsDNA结合后显示出较大的荧光增强。 该测定法在三个数量级上是线性的,并且几乎没有序列依赖性,使您能够准确地测量来自多种来源的DNA,包括基因组DNA,病毒DNA,微量制备DNA或PCR扩增产物。 Helixyte 绿色dsDNA定量分析试剂盒比紫外吸收读数的灵敏度高几个数量级。 在等摩尔量的RNA存在下,它对dsDNA具有特异性。 该套件具有混合和读取格式的强大功能。 它可以与台式荧光计或手持式荧光计(例如Qubit荧光计)一起使用。 该试剂盒是Quant-iT PicoGreen®dsDNA分析试剂盒(Quant-iT 和PicoGreen®是Invitrogen的商标)的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒。

 

适用仪器


荧光分光光度计  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm

产品说明书

样品实验方案

简要概述

向每个比色皿中添加1mL dsDNA标准液或测试样品
加入1mL Helixyte Green 工作溶液
在室温下孵育5-10分钟
监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光

 

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1分析缓冲液(1X)
用无菌,蒸馏,无DNase的水将浓缩的缓冲液稀释20倍,从而制备1X检测缓冲液。

2.标准溶液

dsDNA标准
对于高范围标准曲线:
将30 µL 100 µg / mL dsDNA储备溶液(组分C)添加到1.47 mL的1X分析缓冲液中以得到2000 ng / mL dsDNA溶液,然后进行1:2和1:10连续稀释以获得1000、100、10 ,1和0 ng / mL。

对于低范围标准曲线:
将40 µL 2 µg / mL dsDNA储备液添加到1.56 mL 1X分析缓冲液中,以得到50 ng / mL dsDNA溶液,然后以1:2和1:10连续稀释以获得25、2.5、0.25、0.025和0 ng / mL。

3.工作溶液

通过在1X分析缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备Helixyte Green 工作溶液。 例如,要准备足够的工作溶液以测定2 mL最终体积中的10个样品,请将50μLHelixyte Green (组分A)添加到10 mL分析缓冲液(组分B)中。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得最佳结果,该溶液应在准备后的几个小时内使用。

 

样品示例及操作

1.向每个装有1 mL dsDNA标准品,空白对照和测试样品的比色皿中加入1 mL Helixyte Green 工作溶液,以使dsDNA测定总体积为2 mL /比色皿。

2.在避光条件下,于室温下孵育反应5至10分钟。

3.使用分光光度计在Ex / Em = 490/525 nm处监视荧光的增加。 注意:为使光漂白效应最小化,请对所有样品保持恒定的荧光测量时间。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

 

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产品名称 货号
Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 适合酶标仪检测检测 Cat#17650

说明书
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Helixyte mRNA转染试剂 货号60031-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Helixyte mRNA转染试剂

Helixyte mRNA转染试剂

Helixyte mRNA转染试剂    货号60031 货号 60031 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 5 ml 价格 11628
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Helixyte mRNA 转染试剂是一种功能强大且用途广泛的转染试剂,它是将更多的 mRNA 引入真核细胞,或更具体地说,引入动物细胞。 它在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高转染效率,包括难以转染的细胞。不需要核摄取,这导致比 DNA 转染更快的蛋白质表达,而没有基因组整合的风险。 Helixyte mRNA转染试剂的低毒性可提高转染细胞的生存能力。 Helixyte mRNA 转染试剂不需要特殊培养基,与大多数商业转染试剂相比更易于使用。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备转染细胞
2.制备 Helixyte mRNA 转染试剂-RNA 混合物
3.将 Helixyte mRNA 转染试剂-RNA 混合物添加到细胞培养物中
4.过夜培养细胞
5.用合适的方法分析转染效率

 

细胞准备

1.在转染时将细胞培养至 ~ 90% 汇合。
2.转染前更换新鲜培养基。例如,6 孔板每孔更换 2 mL 培养基,10 cm 板更换 6 mL 培养基。

 

工作溶液配制

1.Helixyte mRNA 转染试剂-RNA 混合物
2.将 2.5 µg mRNA 与 200 µL 无血清培养基混合。
3.在步骤 1 中加入 7.5 µL Helixyte mRNA 转染试剂。
4.混匀并在室温下孵育 20 分钟。
注意:Helixyte mRNA 转染试剂与 mRNA 的比例需要针对不同的细胞系进行优化。 通常,Helixyte mRNA 转染试剂 (µL) 与 mRNA (µg) 的比率 =(3 至 5 µL)至 1 µg。

6孔板样品方案

组分 6孔板(每孔)
新鲜培养基 2ml
纯化的mRNA ~2.5ug
无血清培养基 200ul
Helixyte mRNA 转染试剂 -7.5ul

 

操作步骤

1.转染方案

1.1将 Helixyte mRNA 转染试剂 – mRNA 混合物加入培养板并培养过夜。
注意:重组蛋白表达可以在转染后的8小时内检测到。 转染后约24小时可观察到最大表达水平。

Helixyte mRNA转染试剂    货号60031

图 1. HeLa 细胞中的转染效率比较(上图)和细胞毒性比较(下图)。 HeLa 细胞在 6 孔板中培养至~90% 汇合。 2.5 µg mRNA 分别用 Lipofactamin MessengerMAX 和 Helixyte mRNA 转染试剂转染。 转染后 18 小时,使用带有 FITC 通道的荧光显微镜(上图)拍摄图像。 Lipofactamin MessengerMAX 和 Helixyte mRNA 转染试剂的转染效率相似。用 Helixyte mRNA 转染试剂转染的细胞看起来比用 Lipofatamin MessengerMAX 转染的细胞健康得多(下图)。

 

参考文献

A Systematic Study of Unsaturation in Lipid Nanoparticles Leads to Improved mRNA Transfection In Vivo.
Authors: Lee, Sang M and Cheng, Qiang and Yu, Xueliang and Liu, Shuai and Johnson, Lindsay T and Siegwart, Daniel J
Journal: Angewandte Chemie (International ed. in English) (2021): 5848-5853

A synthetic mRNA cell reprogramming method using CYCLIN D1 promotes DNA repair generating improved genetically stable human induced pluripotent stem cells.
Authors: Alvarez-Palomo, Ana Belén and Requena-Osete, Jordi and Delgado-Morales, Raul and Moreno-Manzano, Victoria and Grau-Bove, Carme and Tejera, Agueda M and Otero, Manel Juan and Barrot, Carme and Santos-Barriopedro, Irene and Vaquero, Alejandro and Mezquita-Pla, Jovita and Moran, Sebastian and Naya, Carlos Hobeich and Garcia-Martínez, Iris and Pérez, Francisco Vidal and Blasco, María A and Esteller, Manel and Edel, Michael J
Journal: Stem cells (Dayton, Ohio) (2021)

CD40 signaling augments IL-10 expression and the tolerogenicity of IL-10-induced regulatory dendritic cells.
Authors: Dawicki, Wojciech and Huang, Hui and Ma, Yanna and Town, Jennifer and Zhang, Xiaobei and Rudulier, Chris D and Gordon, John R
Journal: PloS one (2021): e0248290

Expediting in vitro characterization of mRNA-based gene therapies via high-content fluorescent imaging.
Authors: Vigil, Toriana N and Zhang-Hulsey, Diana and Santos, Jose Luis and Patrick Hussmann, G
Journal: Analytical biochemistry (2021): 114259

LipoParticles: Lipid-Coated PLA Nanoparticles Enhanced In Vitro mRNA Transfection Compared to Liposomes.
Authors: Ayad, Camille and Libeau, Pierre and Lacroix-Gimon, Céline and Ladavière, Catherine and Verrier, Bernard
Journal: Pharmaceutics (2021)

Live-cell Imaging of Single-Cell Arrays (LISCA) – a Versatile Technique to Quantify Cellular Kinetics.
Authors: Reiser, Anita and Woschée, Daniel and Kempe, Simon Maximilian and Rädler, Joachim Oskar
Journal: Journal of visualized experiments : JoVE (2021)

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Authors: He, Jiaxi and Xu, Songhui and Leng, Qixin and Mixson, A James
Journal: The journal of gene medicine (2021): e3295

PEGylation of poly(amine-co-ester) polyplexes for tunable gene delivery.
Authors: Grun, Molly K and Suberi, Alexandra and Shin, Kwangsoo and Lee, Teresa and Gomerdinger, Victoria and Moscato, Zoe M and Piotrowski-Daspit, Alexandra S and Saltzman, W Mark
Journal: Biomaterials (2021): 120780

Preclinical evaluation of CD8+ anti-BCMA mRNA CAR T cells for treatment of multiple myeloma.
Authors: Lin, Liang and Cho, Shih-Feng and Xing, Lijie and Wen, Kenneth and Li, Yuyin and Yu, Tengteng and Hsieh, Phillip A and Chen, Hailin and Kurtoglu, Metin and Zhang, Yi and Andrew Stewart, C and Munshi, Nikhil and Anderson, Kenneth C and Tai, Yu-Tzu
Journal: Leukemia (2021): 752-763

Sustained release of PKR inhibitor C16 from mesoporous silica nanoparticles significantly enhances mRNA translation and anti-tumor vaccination.
Authors: Zhang, Wei and Liu, Yi and Min Chin, Jas and Phua, Kyle K L
Journal: European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics : official journal of Arbeitsgemeinschaft fur Pharmazeutische Verfahrenstechnik e.V (2021): 179-187

说明书
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Helixyte Green ssDNA 试剂 货号17621-AAT Bioquest荧光染料

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Helixyte Green ssDNA 试剂

Helixyte Green ssDNA 试剂

货号 17621 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10000 Tests 价格 11628
Ex (nm) 498 Em (nm) 519
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

合成寡核苷酸用于多种分子生物学技术,例如 DNA 测序、定点诱变、DNA 扩增和原位杂交。测量寡核苷酸和 ssDNA 浓度的最常用技术是测定 260 nm (A260) 处的吸光度。然而,吸光度法受到核酸制剂中常见的各种污染物的极大干扰,包括核苷酸、双链核酸和蛋白质。 Helixyte Green ssDNA 定量试剂是定量 ssDNA 和寡核苷酸的绝佳替代品,它的灵敏度和选择性大大提高。 Helixyte Green ssDNA 试剂是一种带正电荷的荧光探针,它与 ssDNA 的疏水基团结合,通过疏水力、氢键和静电相互作用的协同作用形成高度发光的复合物。 Helixyte Green ssDNA 试剂具有极低的固有荧光,与 ssDNA 结合后固有荧光明显增强。它使研究人员能够使用标准分光光度计和荧光素激发和发射波长对低至 100 pg/mL 的寡核苷酸或 ssDNA (~500 pg/mL) 进行定量。这种灵敏度比吸光度法高出几个数量级。可使用荧光酶标仪检测低至 1 ng/mL 的寡核苷酸或 ssDNA。 Helixyte Green ssDNA 试剂具有从 100 pg/mL 到 1 μg/mL 的较大线性检测范围。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
Cutoff: 515nm
孔板: 黑色孔板

产品说明书

实验方案

概述

1.添加 100 µL 核酸标准品或测试样品
2.添加 100 µL Helixyte Green ALL溶液
3.在室温下孵育 5-10 分钟
4.检测Ex/Em=490/525 nm 处的荧光强度

注:以下方案是使用 Helixyte Green ssDNA 定量 ssDNA 的示例。打开前让所有成分升至室温。没有关于 Helixyte Green ssDNA 染色剂的致突变性或毒性的数据。由于该试剂与核酸结合,因此应将其视为潜在的诱变剂并小心处理。应特别小心处理 DMSO 原液,因为已知 DMSO 可促进有机分子进入组织。

 

溶液制备
ssDNA 标准溶液
将 10 uL 100 ug/mL ssDNA 标准溶液(未提供)添加到您选择的 190 uL 缓冲液中以获得 5 ug/mL 标准溶液,然后进行 1:3 稀释以获得连续稀释的 ssDNA 标准 (SS2-SS7) .请使用AAT Bioquest连续稀释计算器以方便数据处理。

 

Helixyte Green ssDNA 工作溶液
将 100 μL Helixyte Green ssDNA 试剂加入您选择的 10 mL 缓冲液中,制备 Helixyte™ Green ssDNA 工作溶液。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。
注意:建议在塑料容器而不是玻璃容器中制备工作溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为获得最佳效果,该溶液应在稀释后几小时内使用。
注意:10 mL 的工作溶液对于一个 96 孔板就足够了。
注意:10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 和 0.1 mM EDTA 可用于制备工作溶液和标准品。

 

操作步骤

表 1. ssDNA 标准品和测试样品在纯黑色 96 孔板中的布局。 SS= ssDNA 标准品(SS1 – SS7,1667 至 2.3 ng/mL); BL=空白控制; TS=测试样品

BL BL TS TS
SS1 SS1
SS2 SS2
SS3 SS3    
SS4 SS4    
SS5 SS5    
SS6 SS6    
SS7 SS7    

 

表2.各孔试剂组成

体积 试剂
SS1-SS7 100ul 连续稀释(1667 至 2.3 ng/mL)
BL 100ul 缓冲液
TS 100ul 样品


1.根据表 1和表 2 中提供的布局准备 ssDNA 标准 (NS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板,每孔使用 25 μL 试剂,而不是 100 μL。
2.将 100 µL Helixyte Green ssDNA 工作溶液加入 ssDNA 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中,使测定体积为 200 µL/孔。 对于 384 孔板,将 25 µL 的 Helixyte Green ssDNA 工作溶液添加到每个孔中,以获得 50 µL/孔的总体积。
3.在室温下避光孵育反应 5 到 10 分钟。
4.使用 Ex/Em = 490/525 nm(Cutoff在 515 nm)处的荧光酶标仪检测荧光增加。

 

图示

Helixyte Green ssDNA 试剂   货号17621

图 1. 使用 Helixyte Green ssDNA 试剂在 96 孔黑色实心板中测量 ssDNA 剂量反应。

 

参考文献

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说明书
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