Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测 货号22801-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22801 货号 22801 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 508 Em (nm) 524
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞仪检测 是美国AAT Bioquest研发的用于检测线粒体膜电位的试剂盒,JC-1在许多实验室中被广泛使用,但其水溶性差导致极大的不便。即使在1μM浓度下,JC-1也倾向于在水性缓冲液中沉淀。当需要高染料浓度时,JC-10被开发成为JC的优异替代品。与JC-1相比,JC-10具有更好的水溶性。 JC-10能够选择性地进入线粒体,并随着膜电位的增加可逆地将其颜色从绿色变为橙色。该性质是由于膜极化时JC-10聚集体的可逆形成导致发射光从520nm(即JC-10单体形式的发射)向570nm(即J-聚集体形式的发射)的移动。当在490nm处激发时,随着线粒体膜变得更加极化,JC-10的颜色从绿色橙色可逆地变为绿色橙色。使用通常安装在所有流式细胞仪中的过滤器可以检测两种颜色。可以在荧光通道1(FL1)中分析绿色发射,在通道2(FL2)中分析绿色橙色发射。除了用于流式细胞仪外,它还可用于荧光成像和荧光微孔板平台。这种Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测,并为监测线粒体膜电位变化提供了最强大的检测方法。

这种Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测,并为监测线粒体膜电位变化提供了最可靠的检测方法。该试剂盒基于阳离子亲脂性JC-10染料检测细胞中线粒体膜电位的变化。在正常细胞中,JC-10浓缩在线粒体基质中,在那里形成红色荧光聚集体。然而,在凋亡和坏死细胞中,JC-10扩散出线粒体。它变成单体形式并以绿色荧光染色细胞。该试剂盒可用于筛选凋亡激活剂和抑制剂。可以以方便的96孔和384孔荧光微量滴定板形式进行测定。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的线粒体膜电位荧光探针。

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30 nm, 575/26 nm滤波片
通道: FITC,PE通道

产品说明书

96孔板样品分析

概述

用密度为5×105到1×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

用500μL1XJC-10染料加载溶液重悬细胞(2-5×105细胞/管)

37°C孵育/ 室温15-30分钟

用流式细胞仪分析FL1通道(绿色荧光单体信号)和FL2通道(橙色荧光聚合信号)

 

操作方法

1.准备细胞:
以5×105至1×106个细胞/ mL的密度制备细胞。
注意:应根据个体评估每个细胞系,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

 

2.准备JC-10染料加载溶液:
2.1使用前在室温下清洗所有试剂盒中的试剂。
2.2将25μL的200X JC-10(组分A)加入5mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合。
注意:将未使用的200X JC-10(组分A)等分并保存在-20℃。 避免反复冻/融循环。

 

3.运行JC-10测定:
3.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间以诱导细胞凋亡。设置并行控制实验。
对于阴性对照:仅用载体处理细胞。
对于阳性对照:在37℃,5%CO2培养箱中用2-10μM的FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。
注意:CCCP或FCCP可与JC-10染料加载溶液同时添加(来自步骤2.2)。可能需要滴定CCCP或FCCP以获得具有单个细胞系的最佳结果。
3.2离心细胞,每管2-5×105个细胞。
注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞摄入,用含有血清的培养基洗涤细胞一次,然后用JC-10染料加载溶液孵育(参见步骤3.3)。
3.3在500μLJC-10染料加载溶液中重悬细胞(来自步骤2.2)。
3.4在室温下或在37℃,5%CO2培养箱中孵育染料装载细胞15-60分钟,避光。
注意:适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
3.5通过在FL1通道中使用流式细胞仪检测荧光强度,获得绿色荧光单体信号(在凋亡细胞中),并使用FL2通道检测橙色荧光聚集信号(在健康细胞中)。建议使用FCCP或CCCP处理的细胞进行补偿校正(见附录)。

 

数据分析

1.在活的非凋亡细胞中,JC-10作为细胞溶质染色绿色中的单体存在,并且还在线粒体染成红色的聚集体中积累。 在凋亡细胞和死细胞中,JC-10仅以单体形式存在,染色细胞溶质绿。
2.使用FL2通道可检测到健康细胞中含有红色JC-10聚集体的线粒体。 通过使用FL1通道(FITC)可检测凋亡细胞中的绿色JC-10单体。
3. FL1与FL2的强度比用于监测化合物处理诱导的线粒体膜电位变化。

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22801

图1. FCCP诱导的JurKat细胞线粒体膜电位变化的影响。 将JurKat细胞染色载有JC-10染料加载溶液以及DMSO(Top)或5μMFCCP(低)10分钟。 使用FL1和FL2通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量J-聚集体和单体形式JC-10的荧光强度。 将未补偿的数据(左栏)与补偿数据(右栏)进行比较。

 

参考文献

Anticancer properties of a new non-oxido vanadium (IV) complex with a catechol-modified 3, 3′-diindolylmethane ligand
Authors: Katja Dankhoff, Aamir Ahmad, Birgit Weber, Bernhard Biersack, Rainer Schobert
Journal: Journal of Inorganic Biochemistry (2019)

BDE-47 decreases progesterone levels in BeWo cells by interfering with mitochondrial functions and genes related to cholesterol transport
Authors: Anqi Shan, Mengxue Li, Xuejun Li, Yaoyan Li, Mengfan Yan, Ping Xian, Ying Chang, Xi Chen, Nai-jun Tang
Journal: Chemical Research in Toxicology (2019)

Enhancing magnetic resonance/photoluminescence imaging-guided photodynamic therapy by multiple pathways
Authors: Pei Liu, Jinghua Ren, Yuxuan Xiong, Zhe Yang, Wei Zhu, Qianyuan He, Zushun Xu, Wenshan He, Jing Wang
Journal: Biomaterials (2019)

5-Fluorouracil inhibits neural differentiation via Mfn1/2 reduction in human induced pluripotent stem cells
Authors: Shigeru Yamada, Daiju Yamazaki, Yasunari Kanda
Journal: The Journal of Toxicological Sciences (2018): 727–734

Determination of Hepatotoxicity in iPSC-Derived Hepatocytes by Multiplexed High Content Assays
Authors: Oksana Sirenko, Evan F Cromwell
Journal: (2018): 339–354

Yap1 safeguards mouse embryonic stem cells from excessive apoptosis during differentiation
Authors: Lucy LeBlanc, Bum-Kyu Lee, C Yu Andy, Mijeong Kim, Aparna V Kambhampati, Shannon M Dupont, Davide Seruggia, Byoung U Ryu, Stuart H Orkin, Jonghwan Kim
Journal: eLife (2018): e40167

Boosted Membrane Potential as Bioenergetic Response to Anoxia in Dinoroseobacter shibae
Authors: Christian Kirchhoff, Heribert Cypionka
Journal: Frontiers in Microbiology (2017): 695

Evaluation of anticancer properties of a new α-methylene-δ-lactone DL-249 on two cancer cell lines
Authors: Dorota K Pomorska, Katarzyna Gach-Janczak, Rafal Jakubowski, Tomasz Janecki, Jacek Szymański, Anna Janecka
Journal: Open Life Sciences (2017): 178–189

In vitro cardiotoxicity assessment of environmental chemicals using an organotypic human induced pluripotent stem cell-derived model
Authors: Oksana Sirenko, Fabian A Grimm, Kristen R Ryan, Yasuhiro Iwata, Weihsueh A Chiu, Frederick Parham, Jessica A Wignall, Blake Anson, Evan F Cromwell, Mamta Behl
Journal: Toxicology and Applied Pharmacology (2017)

Study of the relationship between AGEs and oxidative stress damage to trophoblast cell mitochondria
Authors: Lingling Jiang, Jianying Yan, Lixiang Wu
Journal: Ginekologia Polska (2017): 372–378

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合微孔板检测 Cat#22800

说明书
Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测 .pdf