生物素-cAMP偶联物 货号17105-AAT Bioquest荧光染料

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生物素-cAMP偶联物

生物素-cAMP偶联物

生物素-cAMP偶联物    货号17105 货号 17105 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ug 价格 2604
Ex (nm) Em (nm)
分子量 988.11 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:17105

产品名称:生物素-cAMP偶联物

规格:100ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:988.11

溶剂:DMSO

激发波长(nm):N/A

发射波长(nm):N/A

 

产品介绍

环磷酸一腺苷(cAMP)是用于细胞内信号诱导的第二信使。 它是由三磷酸腺苷(ATP)通过附着在代谢型受体上的酶(g蛋白)合成的,并在受体被激活后释放。 环状AMP参与糖原,糖和脂质代谢的调节。 这种cAMP NHS酯是出色的荧光染料,可用于开发cAMP探针和测定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的生物素-cAMP偶联物。 

 

参考文献

Making and Breaking of an Essential Poison: the Cyclases and Phosphodiesterases That Produce and Degrade the Essential Second Messenger Cyclic di-AMP in Bacteria
Authors: Commichau, F. M., Heidemann, J. L., Ficner, R., Stulke, J.
Journal: J Bacteriol (2019): se name=”17102.enl” path=”C:UsersaatbiDropbox (AAT Bioquest)Website Working FilesProduct References17102.enl”>17102.enlEndNote2217Commichau, F. M.Heidemann, J. L.Ficner, R.Stulke, J.Department of General Microbiology, Institute of Microbiology and G

Roles of Cyclic AMP Response Element Binding Activation in the ERK1/2 and p38 MAPK Signalling Pathway in Central Nervous System, Cardiovascular System, Osteoclast Differentiation and Mucin and Cytokine Production
Authors: Koga, Y., Tsurumaki, H., Aoki-Saito, H., Sato, M., Yatomi, M., Takehara, K., Hisada, T.
Journal: Int J Mol Sci (2019): ersion=”1.0″ encoding=”UTF-8″ ?>17102.enlEndNote1117Koga, Y.Tsurumaki, H.Aoki-Saito, H.Sato, M.Yatomi, M.Takehara, K.Hisada, T.Department of Allergy and Respiratory Medicine, Gunma University Graduate School of Medicine, 3-39-15 sho-wa machi Maebashi, Gun

Cyclic di-AMP in host-pathogen interactions
Authors: Devaux, L., Kaminski, P. A., Trieu-Cuot, P., Firon, A.
Journal: Curr Opin Microbiol (2018): 21-28

Natural products as modulators of the cyclic-AMP pathway: evaluation and synthesis of lead compounds
Authors: Sengupta, S., Mehta, G.
Journal: Org Biomol Chem (2018): 6372-6390

Perspective of ions and messengers: an intricate link between potassium, glutamate, and cyclic di-AMP
Authors: Gundlach, J., Commichau, F. M., Stulke, J.
Journal: Curr Genet (2018): 191-195

Cyclic GMP-AMP as an Endogenous Second Messenger in Innate Immune Signaling by Cytosolic DNA
Authors: Kato, K., Omura, H., Ishitani, R., Nureki, O.
Journal: Annu Rev Biochem (2017): 541-566

Interrogating cyclic AMP signaling using optical approaches
Authors: Jiang, J. Y., Falcone, J. L., Curci, S., Hofer, A. M.
Journal: Cell Calcium (2017): 47-56

Regulation of Cancer Cell Responsiveness to Ionizing Radiation Treatment by Cyclic AMP Response Element Binding Nuclear Transcription Factor
Authors: D’Auria, F., Centurione, L., Centurione, M. A., Angelini, A., Di Pietro, R.
Journal: Front Oncol (2017): 76

Regulation of IP3 receptors by cyclic AMP
Authors: Taylor, C. W.
Journal: Cell Calcium (2017): 48-52

Role of cyclic AMP in the eye with glaucoma
Authors: Shim, M. S., Kim, K. Y., Ju, W. K.
Journal: BMB Rep (2017): 60-70

说明书
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赖氨酸Lys EDANS标记 CAS 146998-27-8 货号5040-AAT Bioquest荧光染料

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赖氨酸Lys EDANS标记 CAS 146998-27-8

赖氨酸Lys EDANS标记 CAS 146998-27-8

赖氨酸Lys EDANS标记 CAS 146998-27-8    货号5040 货号 5040 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 mg 价格 1272
Ex (nm) Em (nm)
分子量 619.71 溶剂 DMF
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:5040

产品名称:赖氨酸Lys EDANS标记

CAS:146998-27-8

规格:100mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:619.71

溶剂:DMF

激发波长(nm):428

发射波长(nm):N/A

 

产品介绍

FMOC-Lys(DABCYL)-OH是DABCYL的顺序Lys标记的构件。DABCYL是制备FRET肽(通常与EDANS或TF1配对)的最常见的受体染料之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的FMOC-谷氨酸(生物素基PEG)-OH染料。 

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参考文献

Pharmacophore Generation from a Drug-like Core Molecule Surrounded by a Library Peptide via the 10BASEd-T on Bacteriophage T7
Authors: Yuuki Tokunaga, Yuuki Azetsu, Keisuke Fukunaga, Takaaki Hatanaka, Yuji Ito, Masumi Taki
Journal: Molecules (2014): 2481–2496

ADIBO-based “click” chemistry for diagnostic peptide micro-array fabrication: physicochemical and assay characteristics
Authors: Denis Prim, Fabien Rebeaud, Vincent Cosandey, Roger Marti, Philippe Passeraub, Marc E Pfeifer
Journal: Molecules (2013): 9833–9849

Site-specific C-terminal and internal loop labeling of proteins using sortase-mediated reactions
Authors: Carla P Guimaraes, Martin D Witte, Christopher S Theile, Gunes Bozkurt, Lenka Kundrat, Annet EM Blom, Hidde L Ploegh
Journal: Nature protocols (2013): 1787–1799

 

相关产品

产品名称 货号
天冬氨酸Asp DABCYL标记 Cat#5204
谷氨酸Glu DABCYL标记 Cat#5234
赖氨酸Lys Cy5标记 Cat#5055

说明书
赖氨酸Lys EDANS标记 CAS 146998-27-8.pdf

zFluor 635琥珀酰亚胺酯 货号1501-AAT Bioquest荧光染料

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zFluor 635琥珀酰亚胺酯

zFluor 635琥珀酰亚胺酯

货号 1501 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3000
Ex (nm) 667 Em (nm) 692
分子量 1336.89 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:1501

产品名称:zFluor 635琥珀酰亚胺酯

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1336.89

溶剂:DMSO

激发波长(nm):667

发射波长(nm):692

 

产品介绍

与市场上其他同类波长的染料相比,我们的zFluor 系列染料经过开发可在给定波长下具有最高的光稳定性。 zFluor 635具有与流行的Cy5®(GE Healthcare)和AlexaFluor®647(ThermoFisher)相似的光谱特性。其非常高的热稳定性和光稳定性使其成为单分子检测应用和高分辨率显微镜(如PALM,dSTORM和STED)的绝佳选择。在相同的测试条件下,zFluor 635的臭氧稳定性比Cy5®和AlexaFluor®647高得多,这使其成为微孔板和其他基于生物研究应用的更好选择。此功能对于荧光原位杂交(FISH)极为有用。此外,zFluor 标记的寡核苷酸和肽段比AlexaFluor®647和Cy5®标记的寡核苷酸和肽段更明亮,更光稳定。同样,在我们的qPCR测试中,zFluor 635标记的寡核苷酸表现出比用Cy5®或AlexaFluor®647制备的相应缀合物更高的信号。

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说明书
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iFluor 810 酸 货号1385-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor 810 酸

iFluor 810 酸

iFluor 810 酸    货号1385 货号 1385 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 811 Em (nm) 822
分子量 1403.43 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 810 酸是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,iFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。iFluor 染料也具有比经典荧光标记染料更好的标记性能,如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸而不包含性能的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的极佳试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1)溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2)反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3)反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4)反应温度:大多数缀合在室温下进行。然而,特定标记反应可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 810 酸。 

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  • AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得极佳标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得极佳标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定极佳染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定极佳染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定极佳的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的极佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Nanovesicle delivery to the liver via retinol binding protein and platelet-derived growth factor receptors: how targeting ligands affect biodistribution
Authors: Ching-Yun Hsu, Chun-Han Chen, Ibrahim A Aljuffali, You-Shan Dai, Jia-You Fang
Journal: Nanomedicine (2017)

 

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产品名称 货号
iFluor 810 琥珀酰亚胺酯 Cat#1389
iFluor 810 马来酰亚胺 Cat#1388

说明书
iFluor 810 酸.pdf

Tide Fluor 3琥珀酰亚胺酯 Cy3的卓越代替品 货号2271-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Tide Fluor 3琥珀酰亚胺酯 Cy3的卓越代替品

Tide Fluor 3琥珀酰亚胺酯 Cy3的卓越代替品

Tide Fluor 3琥珀酰亚胺酯 Cy3的卓越代替品     货号2271 货号 2271 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 2604
Ex (nm) 554 Em (nm) 578
分子量 555.58 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Tide Fluor 3琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,Tide Fluor 3(TF3)系列的光谱特性与Cy3的光谱特性基本相同。与Cy3探针相比,TF3家族具有更强的荧光和更高的光稳定性。此外,它们的荧光与pH不相关,pH值为3至11.这些特性使这种新染料系列成为Cy3的优良替代品。TF3标记的肽和核苷酸比用Cy3标记的肽具有更强的荧光和更高的光稳定性。在与我们的Tide Quencher 3(TQ3)配对时,可以开发多种FRET肽和核苷酸,用于检测具有增强的灵敏度和稳定性的蛋白酶和分子信标。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Tide Fluor 3琥珀酰亚胺酯。 

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产品说明书

用Tide Fluor 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

        以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm)的专有寡核苷酸。 您需要根据您的特定实验调整操作方案。 您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.准备Oligo溶液(溶液A)

1.1将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话,反应可以孵育过夜。然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

 

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

4.1.1将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

4.1.2充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

4.1.3将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

4.1.4小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Fluor 染料标记肽

        以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要根据您的实验,调整实验方案。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

 

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

Real-Time Detection of a Self-Replicating RNA Enzyme
Authors: Charles Olea, Gerald F Joyce
Journal: Molecules (2016): 1310

Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
Authors: Lang Zhou, Mary Arugula, Christopher J Easley, Curtis Shannon, Aleksandr Simonian
Journal: ECS Transactions (2015): 9–16

Maternal serum glycosylated fibronectin as a point-of-care biomarker for assessment of preeclampsia
Authors: Juha Rasanen, Matthew J Quinn, Amber Laurie, Eric Bean, Charles T Roberts, Srinivasa R Nagalla, Michael G Gravett
Journal: American journal of obstetrics and gynecology (2015): 82–e1

Array of biodegradable microrafts for isolation and implantation of living, adherent cells
Authors: Yuli Wang, Colleen N Phillips, Gabriela S Herrera, Christopher E Sims, Jen Jen Yeh, Nancy L Allbritton
Journal: RSC advances (2013): 9264–9272

Development of SNAP-Tag Fluorogenic Probes for Wash-Free Fluorescence Imaging
Authors: Xiaoli Sun, Aihua Zhang, Brenda Baker, Luo Sun, Angela Howard, John Buswell, Damien Maurel, Anastasiya Masharina, Kai Johnsson, Christopher J Noren
Journal: ChemBioChem (2011): 2217–2226

FERRAMENTAS PARA ESTUDO DA BIOLOGIA DE GPCRS (G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS)
Authors: Frederico Marianetti Soriani, Remo Castro Russo
Journal: Unknown

 

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