Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测 货号22801-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22801 货号 22801 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 508 Em (nm) 524
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞仪检测 是美国AAT Bioquest研发的用于检测线粒体膜电位的试剂盒,JC-1在许多实验室中被广泛使用,但其水溶性差导致极大的不便。即使在1μM浓度下,JC-1也倾向于在水性缓冲液中沉淀。当需要高染料浓度时,JC-10被开发成为JC的优异替代品。与JC-1相比,JC-10具有更好的水溶性。 JC-10能够选择性地进入线粒体,并随着膜电位的增加可逆地将其颜色从绿色变为橙色。该性质是由于膜极化时JC-10聚集体的可逆形成导致发射光从520nm(即JC-10单体形式的发射)向570nm(即J-聚集体形式的发射)的移动。当在490nm处激发时,随着线粒体膜变得更加极化,JC-10的颜色从绿色橙色可逆地变为绿色橙色。使用通常安装在所有流式细胞仪中的过滤器可以检测两种颜色。可以在荧光通道1(FL1)中分析绿色发射,在通道2(FL2)中分析绿色橙色发射。除了用于流式细胞仪外,它还可用于荧光成像和荧光微孔板平台。这种Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测,并为监测线粒体膜电位变化提供了最强大的检测方法。

这种Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测,并为监测线粒体膜电位变化提供了最可靠的检测方法。该试剂盒基于阳离子亲脂性JC-10染料检测细胞中线粒体膜电位的变化。在正常细胞中,JC-10浓缩在线粒体基质中,在那里形成红色荧光聚集体。然而,在凋亡和坏死细胞中,JC-10扩散出线粒体。它变成单体形式并以绿色荧光染色细胞。该试剂盒可用于筛选凋亡激活剂和抑制剂。可以以方便的96孔和384孔荧光微量滴定板形式进行测定。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的线粒体膜电位荧光探针。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30 nm, 575/26 nm滤波片
通道: FITC,PE通道

产品说明书

96孔板样品分析

概述

用密度为5×105到1×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

用500μL1XJC-10染料加载溶液重悬细胞(2-5×105细胞/管)

37°C孵育/ 室温15-30分钟

用流式细胞仪分析FL1通道(绿色荧光单体信号)和FL2通道(橙色荧光聚合信号)

 

操作方法

1.准备细胞:
以5×105至1×106个细胞/ mL的密度制备细胞。
注意:应根据个体评估每个细胞系,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

 

2.准备JC-10染料加载溶液:
2.1使用前在室温下清洗所有试剂盒中的试剂。
2.2将25μL的200X JC-10(组分A)加入5mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合。
注意:将未使用的200X JC-10(组分A)等分并保存在-20℃。 避免反复冻/融循环。

 

3.运行JC-10测定:
3.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间以诱导细胞凋亡。设置并行控制实验。
对于阴性对照:仅用载体处理细胞。
对于阳性对照:在37℃,5%CO2培养箱中用2-10μM的FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。
注意:CCCP或FCCP可与JC-10染料加载溶液同时添加(来自步骤2.2)。可能需要滴定CCCP或FCCP以获得具有单个细胞系的最佳结果。
3.2离心细胞,每管2-5×105个细胞。
注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞摄入,用含有血清的培养基洗涤细胞一次,然后用JC-10染料加载溶液孵育(参见步骤3.3)。
3.3在500μLJC-10染料加载溶液中重悬细胞(来自步骤2.2)。
3.4在室温下或在37℃,5%CO2培养箱中孵育染料装载细胞15-60分钟,避光。
注意:适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
3.5通过在FL1通道中使用流式细胞仪检测荧光强度,获得绿色荧光单体信号(在凋亡细胞中),并使用FL2通道检测橙色荧光聚集信号(在健康细胞中)。建议使用FCCP或CCCP处理的细胞进行补偿校正(见附录)。

 

数据分析

1.在活的非凋亡细胞中,JC-10作为细胞溶质染色绿色中的单体存在,并且还在线粒体染成红色的聚集体中积累。 在凋亡细胞和死细胞中,JC-10仅以单体形式存在,染色细胞溶质绿。
2.使用FL2通道可检测到健康细胞中含有红色JC-10聚集体的线粒体。 通过使用FL1通道(FITC)可检测凋亡细胞中的绿色JC-10单体。
3. FL1与FL2的强度比用于监测化合物处理诱导的线粒体膜电位变化。

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22801

图1. FCCP诱导的JurKat细胞线粒体膜电位变化的影响。 将JurKat细胞染色载有JC-10染料加载溶液以及DMSO(Top)或5μMFCCP(低)10分钟。 使用FL1和FL2通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量J-聚集体和单体形式JC-10的荧光强度。 将未补偿的数据(左栏)与补偿数据(右栏)进行比较。

 

参考文献

Anticancer properties of a new non-oxido vanadium (IV) complex with a catechol-modified 3, 3′-diindolylmethane ligand
Authors: Katja Dankhoff, Aamir Ahmad, Birgit Weber, Bernhard Biersack, Rainer Schobert
Journal: Journal of Inorganic Biochemistry (2019)

BDE-47 decreases progesterone levels in BeWo cells by interfering with mitochondrial functions and genes related to cholesterol transport
Authors: Anqi Shan, Mengxue Li, Xuejun Li, Yaoyan Li, Mengfan Yan, Ping Xian, Ying Chang, Xi Chen, Nai-jun Tang
Journal: Chemical Research in Toxicology (2019)

Enhancing magnetic resonance/photoluminescence imaging-guided photodynamic therapy by multiple pathways
Authors: Pei Liu, Jinghua Ren, Yuxuan Xiong, Zhe Yang, Wei Zhu, Qianyuan He, Zushun Xu, Wenshan He, Jing Wang
Journal: Biomaterials (2019)

5-Fluorouracil inhibits neural differentiation via Mfn1/2 reduction in human induced pluripotent stem cells
Authors: Shigeru Yamada, Daiju Yamazaki, Yasunari Kanda
Journal: The Journal of Toxicological Sciences (2018): 727–734

Determination of Hepatotoxicity in iPSC-Derived Hepatocytes by Multiplexed High Content Assays
Authors: Oksana Sirenko, Evan F Cromwell
Journal: (2018): 339–354

Yap1 safeguards mouse embryonic stem cells from excessive apoptosis during differentiation
Authors: Lucy LeBlanc, Bum-Kyu Lee, C Yu Andy, Mijeong Kim, Aparna V Kambhampati, Shannon M Dupont, Davide Seruggia, Byoung U Ryu, Stuart H Orkin, Jonghwan Kim
Journal: eLife (2018): e40167

Boosted Membrane Potential as Bioenergetic Response to Anoxia in Dinoroseobacter shibae
Authors: Christian Kirchhoff, Heribert Cypionka
Journal: Frontiers in Microbiology (2017): 695

Evaluation of anticancer properties of a new α-methylene-δ-lactone DL-249 on two cancer cell lines
Authors: Dorota K Pomorska, Katarzyna Gach-Janczak, Rafal Jakubowski, Tomasz Janecki, Jacek Szymański, Anna Janecka
Journal: Open Life Sciences (2017): 178–189

In vitro cardiotoxicity assessment of environmental chemicals using an organotypic human induced pluripotent stem cell-derived model
Authors: Oksana Sirenko, Fabian A Grimm, Kristen R Ryan, Yasuhiro Iwata, Weihsueh A Chiu, Frederick Parham, Jessica A Wignall, Blake Anson, Evan F Cromwell, Mamta Behl
Journal: Toxicology and Applied Pharmacology (2017)

Study of the relationship between AGEs and oxidative stress damage to trophoblast cell mitochondria
Authors: Lingling Jiang, Jianying Yan, Lixiang Wu
Journal: Ginekologia Polska (2017): 372–378

 

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Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合微孔板检测 Cat#22800

说明书
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天冬氨酸Asp EDANS标记 CAS 182253-73-2 货号5001-AAT Bioquest荧光染料

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天冬氨酸Asp EDANS标记 CAS 182253-73-2

天冬氨酸Asp EDANS标记 CAS 182253-73-2

天冬氨酸Asp EDANS标记 CAS 182253-73-2    货号5001 货号 5001 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 g 价格 9948
Ex (nm) 336 Em (nm) 455
分子量 603.64 溶剂 DMF
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:5001

产品名称:天冬氨酸Asp EDANS标记

CAS:182253-73-2

规格:1g

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:603.64

溶剂:DMF

激发波长(nm):335

发射波长(nm):493

 

产品介绍

FMOC-Asp(EDANS)-OH是EDANS对序列肽Asp标记的构件。EDANS是制备FRET肽(通常与Dabcyl配对)的最常见的供体染料之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的天冬氨酸Asp EDANS标记。 

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参考文献

Pharmacophore Generation from a Drug-like Core Molecule Surrounded by a Library Peptide via the 10BASEd-T on Bacteriophage T7
Authors: Yuuki Tokunaga, Yuuki Azetsu, Keisuke Fukunaga, Takaaki Hatanaka, Yuji Ito, Masumi Taki
Journal: Molecules (2014): 2481–2496

ADIBO-based “click” chemistry for diagnostic peptide micro-array fabrication: physicochemical and assay characteristics
Authors: Denis Prim, Fabien Rebeaud, Vincent Cosandey, Roger Marti, Philippe Passeraub, Marc E Pfeifer
Journal: Molecules (2013): 9833–9849

Site-specific C-terminal and internal loop labeling of proteins using sortase-mediated reactions
Authors: Carla P Guimaraes, Martin D Witte, Christopher S Theile, Gunes Bozkurt, Lenka Kundrat, Annet EM Blom, Hidde L Ploegh
Journal: Nature protocols (2013): 1787–1799

 

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Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒 货号13840-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒

Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒

Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒    货号13840 货号 13840 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测草酰乙酸的试剂盒,草酰乙酸是柠檬酸循环的重要组成部分,它与乙酰辅酶A反应生成柠檬酸盐。它还涉及糖异生,尿素循环,乙醛酸循环,氨基酸合成和脂肪酸合成。草酰乙酸的缺乏限制了糖原异生和尿素循环功能,并且可以导致能量产生减少。草酰乙酸也可用作血液谷氨酸清除剂,在创伤性脑损伤后提供神经保护,表现为海马神经元损失减少和神经功能改善。Amplite 比色草酰乙酸检测试剂盒提供了一种灵敏的检测方法,用于定量生物样品中的草酰乙酸。草酰乙酸转化为丙酮酸,通过酶偶联反应产生过氧化氢。用吸光度酶标仪在575nm处用Amplite Red监测过氧化氢的产生。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 575nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

96孔板测定示例

概述

准备测试样品(50μL)和连续稀释的草酰乙酸标准品(50μL)

加入等体积的测定混合物(50μL)

在室温下孵育30分钟至1小时

监测575nm处的吸光度强度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.准备连续稀释的草酰乙酸标准品和测试样品:

1.1将100μLDdH2O加入到草酰乙酸盐标准小瓶(组分E)中以制备100mM草酰乙酸标准溶液。

1.2制备草酰乙酸标准稀释液:将10μL100mM草酰乙酸盐(来自步骤1.1)加入990μL测定缓冲液(组分C)中,得到1mM草酰乙酸溶液。 将320μL的1mM草酰乙酸标准溶液加入680μL测定缓冲液中以制备320μM草酰乙酸溶液。 进行1:2连续稀释,得到160,80,40,20,10,5μM连续稀释的草酰乙酸标准品。

1.3根据说明书中的表1,将50μL含草酰乙酸的样品和连续稀释的草酰乙酸标准品加入透明底96孔微量培养板中。

 

2.准备草酰乙酸测定混合物:

2.1Make Amplite 红色底物原液(200X):将50μLDMSO(组分F)加入Amplite Red底物(组分A)中,制成200X Amplite Red底物原液。

2.2制备草酰乙酸脱羧酶(OAC)储备溶液(100X):将50μLddH2O加入草酰乙酸脱羧酶(组分D)中以制备100×草酰乙酸脱羧酶原液。

2.3制备测定混合物:将5mL测定缓冲液(组分C)加入一个酶混合瓶(组分B)中充分混合。 将50μLOAC储备溶液(来自步骤2.2)和25μL200XAmplite Red储备溶液(来自步骤2.1)转移到瓶中并充分混合。

注意1:分析混合物不稳定,及时使用,避免直接暴露在光线下。

注意2:将未使用的200X Amplite Red原液储存在-20℃,避免光照和反复冻融循环。

 

3.运行草酰乙酸测定:

3.1将50μL测定混合物(来自步骤2.3)添加到草酰乙酸标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤1.3),以使总草酰乙酸测定体积为100μL/孔。

注意1:对于384孔板,每孔加入25μL样品,25μLAssay混合液。

注意2:在pH 6.5至7.0下进行草酰乙酸测定。

3.2在室温下孵育反应混合物30分钟至1小时。

3.3使用575 nm的吸光度读板仪检测吸光度的增加。

 

参考文献

Enzymatic assay for D-aspartic acid using D-aspartate oxidase and oxaloacetate decarboxylase
Authors: Kato S, Ikuta T, Hemmi H, Takahashi S, Kera Y, Yoshimura T.
Journal: Biosci Biotechnol Biochem (2012): 2150

Assay of blood and tissue oxaloacetate and alpha-ketoglutarate by isotope dilution gas chromatography-mass spectrometry
Authors: Laplante A, Comte B, Des Rosiers C.
Journal: Anal Biochem (1995): 580

Effect of oxaloacetate and phosphorylation on ATP-citrate lyase activity
Authors: Pentyala SN, Benjamin WB.
Journal: Biochemistry (1995): 10961

Novel oxaloacetate effect on mitochondrial Ca2+ movement
Authors: Leikin YN, Zharova TV, Tjulina OV.
Journal: FEBS Lett (1993): 35

A sensitive multienzymatic assay for the measurement of pyruvate, dihydroxyacetone phosphate, oxaloacetate, and acetoacetate in clear extracts from biological samples
Authors: Arias-Mendoza F, Pina E.
Journal: Prep Biochem (1991): 211

Flow-injection analysis of amino acids and their metabolites by immobilized vitamin B6-dependent enzymes. Sensitive determination of L-aspartate, L-glutamate, 2-oxoglutarate, and oxaloacetate
Authors: Kurkijarvi K, Vierijoki T, Korpela T.
Journal: Ann N Y Acad Sci (1990): 394

Pyruvate dehydrogenase activity in osmotically shocked rat brain mitochondria: stimulation by oxaloacetate
Authors: Haas RH, Thompson G, Morris B, Conright K, Andrews T.
Journal: J Neurochem (1988): 673

Activity of maize leaf phosphoenolpyruvate carboxylase in relation to tautomerization and nonenzymatic decarboxylation of oxaloacetate
Authors: Walker GH, Ku MS, Edwards GE.
Journal: Arch Biochem Biophys (1986): 489

Kinetic mechanism of Escherichia coli isocitrate dehydrogenase and its inhibition by glyoxylate and oxaloacetate
Authors: Nimmo HG.
Journal: Biochem J (1986): 317

The interaction of dithiothreitol and acetyl coenzyme A in a radiochemical assay for rat brain ATP:citrate oxaloacetate lyase
Authors: Simpson J.
Journal: J Neurochem (1981): 100

 

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说明书
Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒.pdf

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22842-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测     货号22842 货号 22842 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 537 Em (nm) 618
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞活力和增殖的工具。有多种参数可用于监测细胞活力和增殖。在正常细胞中,DNA密度根据细胞的生长,分裂,静止执行其正常功能而变化。细胞周期的进程受各种细胞周期调节因子之间复杂的相互作用控制。这些调节剂激活转录因子,该转录因子与DNA结合并开启或关闭导致细胞分裂的蛋白质的产生。这种调节级联中的任何失误都会导致异常细胞增殖,这是许多病理状况(例如肿瘤形成)的基础。活细胞研究的潜在应用是确定细胞DNA含量和细胞周期分布,以检测生长模式的变化,检测凋亡,评估肿瘤细胞的行为和抑制基因的机制。该特定试剂盒旨在使用Nuclear Red CCS1(固定细胞中的细胞周期染色剂)检测细胞周期进程和增殖。染料穿过透化的膜并插入细胞DNA中。试剂盒中提供的RNase降解RNA后,Nuclear Red CCS1的信号强度与DNA含量成正比。可以使用流式细胞仪(FL2通道)检测给定样品中处于G0 / G1,S和G2 / M期的细胞百分比,以及处于凋亡之前的sub-G1期的细胞百分比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 610/20nm滤波片
通道: PE-Texas Red通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106cell/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 用70%乙醇固定细胞
  3. 将0.5 µL 100X Nuclear Red CCS1和5 µL RNase A加入0.5 mL细胞溶液中
  4. 在室温下孵育30-60分钟
  5. 使用带有FL2通道的流式细胞仪分析细胞

 

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞,以诱导凋亡或其他细胞周期功能。

2.对于每个样品,用0.5 mL PBS制备细胞,密度为5×105至1×106细胞/ mL。

2.1对于贴壁细胞:将细胞用胰蛋白酶消化,悬浮在10%FBS培养基中,离心(1000 rpm,5分钟),然后将沉淀重悬于PBS中。

2.2对于悬浮细胞:将细胞离心(1000 rpm,5分钟),并将沉淀物悬浮在PBS(1 mL)中。 注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

3.用70%乙醇固定细胞:

3.1将0.5 mL细胞悬液吸移至1.2 mL无水乙醇中(最终浓度约为70%)。

3.2在冰上孵育细胞至少2小时(或在-20°C过夜)。在染色之前,细胞可以在-20°C下保存2年。注意:在用单克隆抗体染色细胞表面抗原后,通常将乙醇用于固定,而在用单克隆抗体染色细胞内抗原后,通常将甲醇用于固定。在此过程中,将固定并分析整个细胞。由于仍然存在整个细胞团,因此通常包括使用RNase来消除任何双链RNA。尽管已经对整个细胞进行了分析,但尝试检测与DNA结合的某些细胞内抗原的尝试可能会失败,因为蛋白质会从透化的细胞中漏出(例如绿色荧光蛋白)。在这些情况下,在酒精固定之前,用PBS中的1%低聚甲醛进行短暂的预固定(在4-6°C下10分钟),将有助于将蛋白质保留在细胞中。

4.用Nuclear Red CCS1染色细胞:

4.1以1000 rpm的速度沉淀细胞5分钟,并用冷PBS至少洗涤一次。

4.2将沉淀物悬浮在0.5 mL测定缓冲液(组分C)中。

4.3加入5 µL 100X Nuclear Red CCS1(组分A)和5 µL 100X RNase A(组分B)。

4.4在室温下孵育细胞30至60分钟。 注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.5可选:将细胞以1000 rpm离心5分钟,然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。

4.6使用FL2通道(Ex / Em = 490/620 nm),通过流式细胞仪检测荧光强度。 

 

参考文献 

Cell cycle synchronization of Escherichia coli using the stringent response, with fluorescence labeling assays for DNA content and replication
Authors: Ferullo DJ, Cooper DL, Moore HR, Lovett ST.
Journal: Methods (2009): 8

DNA replication, cell cycle progression and the targeted gene repair reaction
Authors: Engstrom JU, Kmiec EB.
Journal: Cell Cycle (2008): 1402

Morin inhibits the growth of human leukemia HL-60 cells via cell cycle arrest and induction of apoptosis through mitochondria dependent pathway
Authors: Kuo HM, Chang LS, Lin YL, Lu HF, Yang JS, Lee JH, Chung JG.
Journal: Anticancer Res (2007): 395

Direct control of cell cycle gene expression by proto-oncogene product ACTR, and its autoregulation underlies its transforming activity
Authors: Louie MC, Revenko AS, Zou JX, Yao J, Chen HW.
Journal: Mol Cell Biol (2006): 3810

Cell cycle markers for live cell analyses
Authors: Easwaran HP, Leonhardt H, Cardoso MC.
Journal: Cell Cycle (2005): 453

Dynamic relocalization of hOGG1 during the cell cycle is disrupted in cells harbouring the hOGG1-Cys326 polymorphic variant
Authors: Luna L, Rolseth V, Hildrestr and GA, Otterlei M, Dantzer F, Bjoras M, Seeberg E.
Journal: Nucleic Acids Res (2005): 1813

Dynamics of relative chromosome position during the cell cycle
Authors: Essers J, van Cappellen WA, Theil AF, van Drunen E, Jaspers NG, Hoeijmakers JH, Wyman C, Vermeulen W, Kanaar R.
Journal: Mol Biol Cell (2005): 769

Cell cycle regulation of the murine 8-oxoguanine DNA glycosylase (mOGG1): mOGG1 associates with microtubules during interphase and mitosis
Authors: Conlon KA, Zharkov DO, Berrios M.
Journal: DNA Repair (Amst) (2004): 1601

Description of a flow cytometry approach based on SYBR-14 staining for the assessment of DNA content, cell cycle analysis, and sorting of living normal and neoplastic cells
Authors: Nunez R, Garay N, Villafane C, Bruno A, Lindgren V.
Journal: Exp Mol Pathol (2004): 29

Differential roles of STAT1alpha and STAT1beta in fludarabine-induced cell cycle arrest and apoptosis in human B cells
Authors: Baran-Marszak F, Feuillard J, Najjar I, Le Clorennec C, Bechet JM, Dusanter-Fourt I, Bornkamm GW, Raphael M, Fagard R.
Journal: Blood (2004): 2475

说明书
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Cyber Green 20X水溶液PCR定量 货号17591-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cyber Green 20X水溶液PCR定量

Cyber Green 20X水溶液PCR定量

Cyber Green 20X水溶液PCR定量     货号17591 货号 17591 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5×1 ml 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 N/A 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Cyber Green 染料是美国AAT Bioquest生产的一种绿色荧光核酸染料,具有使染料可用于多种应用的功能,包括qPCR,熔解曲线分析,嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测,常规溶液DNA定量和结晶染料的激发和发射光谱与荧光素(FAM)或SYBR®GreenI的激发和发射光谱非常接近,使染料与配备488 nm氩激光器或任何可见光激发波长的仪器兼容。 Green 染料在热和水解方面都非常稳定,在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合后变得高度荧光.Cyber Green 染料的独特性质使其在定量实时PCR(qPCR)应用中特别有用。与广泛使用的SYBR Green I相比,Cyber Green 对PCR的抑制作用较小,不太可能引起非特异性扩增。因此,Cyber Green 可以比SYBR Green我高得多的染料浓度使用,从而产生更强大的PCR信号。更重要的是,定量PCR允许的较高的CYber Green 浓度消除了“染料再分布”问题,这可能在PCR后DNA融解曲线分析期间与SYBR Green一起发生。

Cyber Green 20X水溶液专为qPCR使用而配制。可以使用现有的SYBR Green I或FAM光学设置在任何商业实时PCR循环仪上监测PCR反应。下面提供的qPCR协议用于使用常规非热启动Taq的PCR。使用热启动Taq可能需要在离子强度和pH方面对PCR缓冲液组成进行一些调整,以最好地利用Cyber Green 。例如,化学修饰的Taq,例如AmpliTaq Gold,可能更喜欢低低浓度的氯化钾或不含KCl的和较高的的Tris浓度(高达50mM的)。此外,经常加入水溶性溶剂如DMSO或甘油以稳定主混合物。可能需要根据所用的酶优化这些组分和pH值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cyber Green 核酸凝胶染料。 

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产品说明书

染色方案

建议将以下方案用于非热启动Taq酶。

1.设置PCR反应如下:

5μL不含Mg+2的10倍的聚合酶缓冲液

2.5μL50mMMgCl2

每种5mM的2mM dNTP

2.5μL20XCyber Green

1-5单位的Taq DNA聚合酶

每种引物0.1-1μM(最终浓度)

双蒸水至终体积为50μL。

 

2.在热循环荧光计上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

注意:使用ABI序列检测系统时,请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。

 

参考文献

Plasmalemma permeability and necrotic cell death phenotypes after intracerebral hemorrhage in mice
Authors: Zhu X, Tao L, Tejima-Mandeville E, Qiu J, Park J, Garber K, Ericsson M, Lo EH, Whalen MJ.
Journal: Stroke (2012): 524

Intra-organ Biodistribution of Gold Nanoparticles Using Intrinsic Two-photon Induced Photoluminescence
Authors: Park J, Estrada A, Schwartz JA, Diagaradjane P, Krishnan S, Dunn AK, Tunnell JW.
Journal: Lasers Surg Med (2010): 630

Screening by imaging: scaling up single-DNA-molecule analysis with a novel parabolic VA-TIRF reflector and noise-reduction techniques
Authors: van ‘t Hoff M, Reuter M, Dryden DT, Oheim M.
Journal: Phys Chem Chem Phys (2009): 7713

Novel anatomic structures in the brain and spinal cord of rabbit that may belong to the Bonghan system of potential acupuncture meridians
Authors: Lee BC, Kim S, Soh KS.
Journal: J Acupunct Meridian Stud (2008): 29

Triplet fraction buildup effect of the DNA-YOYO complex studied with fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Kinjo M.
Journal: Anal Biochem (2007): 87

DNA length evaluation using cyanine dye and fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Tsuruoka M.
Journal: Biomacromolecules (2005): 2703

Implementation of accurate and fast DNA cytometry by confocal microscopy in 3D
Authors: Ploeger LS, Huisman A, van der Gugten J, van der Giezen DM, Belien JA, Abbaker AY, Dullens HF, Grizzle W, Poulin NM, Meijer GA, van Diest PJ.
Journal: Cell Oncol (2005): 225

Green-light transilluminator for the detection without photodamage of proteins and DNA labeled with different fluorescent dyes
Authors: Alba FJ, Bermudez A, Daban JR.
Journal: Electrophoresis (2001): 399

Oxazole yellow homodimer YOYO-1-labeled DNA: a fluorescent complex that can be used to assess structural changes in DNA following formation and cellular delivery of cationic lipid DNA complexes
Authors: Wong M, Kong S, Dragowska WH, Bally MB.
Journal: Biochim Biophys Acta (2001): 61

Photophysical properties of fluorescent DNA-dyes bound to single- and double-stranded DNA in aqueous buffered solution
Authors: Cosa G, Focsaneanu KS, McLean JR, McNamee JP, Scaiano JC.
Journal: Photochem Photobiol (2001): 585

说明书
Cyber Green 20X水溶液PCR定量 .pdf