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PhosphoWorks 发光测定ATP测定试剂盒*稳定发光*
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货号 | 21608 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 10 Plates | 价格 | 12588 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
PhosphoWorks 发光测定ATP测定试剂盒*稳定发光*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量生成，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供了一种快速，简单且均一的发光检测方法，用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 该测定可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行。 此测定法的高灵敏度允许在许多生物系统，环境样品和食品中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP检测试剂盒具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光，无需混合或分离，并且配方具有最小的动手时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的PhosphoWorks 发光测定ATP测定试剂盒*稳定发光*。
适用仪器
| 发光酶标仪 | |
| 推荐孔板： | 白色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的ATP工作溶液（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.检测发光强度
溶液配制
工作溶液配制
1.将整个小瓶10 mL反应缓冲液（组分C）转移到ATP传感器（组分B）中并充分混合。
2.将20 µL ATP监测酶（组分A）添加到组分B + C的瓶子中，并充分混合以制成ATP工作溶液。 注意：避免来自外源性生物来源的潜在ATP污染。
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样品操作
1.运行ATP分析：
1.1通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL的10X化合物（用于96孔板）或5 µL的5X化合物（用于384孔板）来用测试化合物处理细胞（或样品）。对于空白孔（没有细胞的培养基），添加相应量的化合物缓冲液。
1.2将细胞板在37°C，5％CO2培养箱中孵育所需的时间，例如24、48或96小时。
1.3向每个孔中添加100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）的ATP工作溶液。
1.4在室温下孵育10-20分钟。
1.5使用标准发光计监控发光强度。
2.生成标准ATP校准曲线：
如果需要计算样品中ATP的绝对量，则应与上述测定法一起生成ATP标准曲线。
2.1通过包含不含ATP的样品（作为对照）来测量背景发光，在含0.1％BSA的PBS缓冲液中稀释一系列ATP。注意：通常，ATP浓度从1 nM到10 µM是合适的。
2.2将相同量的稀释的ATP溶液添加到一个空板中（对于96孔板是100 µL，对于384孔板是25 µL）。
2.3加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的ATP工作溶液。
2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。
2.5使用标准发光计监控发光强度。
2.6生成ATP标准曲线。
参考文献
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