膜电位荧光探针DiBAC4(5) CAS 63560-89-4 货号21410-AAT Bioquest荧光染料

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膜电位荧光探针DiBAC4(5) CAS 63560-89-4

膜电位荧光探针DiBAC4(5) CAS 63560-89-4

膜电位荧光探针DiBAC4(5) CAS 63560-89-4    货号21410 货号 21410 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 mg 价格 1944
Ex (nm) 591 Em (nm) 615
分子量 542.67 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

DiBAC4(5)是一种敏感的膜电位探针,具有更长的激发和发射波长。它是用于测量细胞膜电位的慢响应探针。通常,慢响应探针在跨膜分布中表现出电位依赖性变化,并伴有荧光变化。它们的光学响应幅度远远大于快速响应探针(通常每mV荧光变化1%)。慢响应探针,包括阳离子碳花青素,罗丹明和阴离子恶臭酚,适用于检测由呼吸活动,离子通道通透性,药物结合和其他因素引起的非兴奋性细胞的平均膜电位变化。

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产品说明书

操作步骤

1.准备细胞:

1.1对于贴壁细胞:将细胞在生长培养基中以40,000至80,000个细胞/孔/ 100 µL(对于96孔板)过夜,以10,000至20,000个细胞/孔/ 25 µL(对于384孔板)过夜。

1.2对于非贴壁细胞:从培养基中离心细胞,然后将细胞沉淀以125,000至250,000个细胞/孔/ 100 µL 的浓度悬浮在等量的HHBS和MP染料上样溶液中(请参阅下面的步骤2.2),持续96-以及聚赖氨酸d板或30,000至60,000个细胞/孔/25μL的用于384孔聚赖氨酸d板。实验前将板以800 rpm的速度离心2分钟,并关闭制动器。

 

2.准备DiSBAC2(3)染料加载溶液

2.1准备10至30 mM的DiSBAC2(3)的高品质无水DMSO 储备溶液。储备溶液应及时使用;任何剩余的溶液都需要等分并在< -20 o C 冷冻。

注意:避免重复的冻融循环,并避光。

2.2准备一个2X 的DiSBAC 2(3)染料加载 溶液: 在实验的当天,无论是溶解的DiSBAC 2(3) 固体在DMSO或解冻的等分试样的DiSBAC 2(3)的储备溶液至室温。用0.04%的制备的在Hanks(HHBS)20至40μM和20mM Hepes缓冲液,pH为7的2X工作溶液到0.08%的Pluronic ® F-127(目录#20053)和2mM 锥虫红加 (目录#2456),将它们混合均匀。该工作溶液在室温下至少稳定2小时。

 

3.运行膜电位测定:

3.1将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的DiSBAC2(3)染料加载溶液(来自步骤2.2)添加到细胞板中。

注1:如果您的筛选化合物干扰了g 培养基和血清因子,则在添加DiSBAC2(3)上染 溶液之前,用等体积的HHBS缓冲液替换生长培养基。或者,细胞可以在无血清条件下生长。

注2:上色后请勿清洗细胞。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育30至60分钟。

注意:在某些情况下,在室温下孵育30至60分钟可能会更好。

3.3使用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。

3.4通过监测Ex / Em = 540/590 nm(目录号21414)的荧光强度进行膜电位测定。

注意:在实验之前进行信号测试非常重要。不同的仪器具有各自的强度范围。将信号测试强度调整为最大仪器强度计数的10%到15%的水平。例如,FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000,因此应调整仪器设置,使其信号测试强度约为7,000至10,000。

 

参考文献

A Membrane Potential-and Calpain-Dependent Reversal of Caspase-1 Inhibition Regulates Canonical NLRP3 Inflammasome
Authors: Yifei Zhang, Hua Rong, Fang-Xiong Zhang, Kun Wu, Libing Mu, Junchen Meng, Bailong Xiao, Gerald W Zamponi, Yan Shi
Journal: Cell reports (2018): 2356–2369

Effects of 1, 4-naphthoquinone Aged Carbon Black Particles on the Cell Membrane of Human Bronchial Epithelium
Authors: Yongming Zhang, Li Wang, Huimin Feng, Guiping Hu, Lele Wang, Jiaxing Liu, Xin Gao, Jing Shang, Tong Zhu, Shichuan Tang
Journal: Environmental Toxicology and Pharmacology (2017)

Humic analog AQDS can act as a selective inhibitor to enable anoxygenic photosynthetic bacteria to outcompete sulfate-reducing bacteria under microaerobic conditions
Authors: Xingzu Wang, Xiang Cheng, Yiwei Ren, Guihua Xu, Jing Tang
Journal: Journal of Chemical Technology and Biotechnology (2015)

Mitochondrial ROS-K+ channel signaling pathway regulated secretion of human pulmonary artery endothelial cells
Authors: Jin-Sheng Ouyang, Yu-Ping Li, Cheng-Ye Li, Chang Cai, Cheng-Shui Chen, Shao-Xian Chen, Yan-Fan Chen, Li Yang, Yu-Peng Xie
Journal: Free radical research (2012): 1437–1445

说明书
膜电位荧光探针DiBAC4(5) CAS 63560-89-4.pdf