Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测     货号22826 货号 22826 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 588 Em (nm) 604
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒,我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来监测细胞凋亡。在凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察到形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS,使用带有PE-Texas Red通道的流式细胞仪(红色荧光)优化了此特定的检测试剂盒,以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 561nm激光
发射: 610/20nm滤波片
通道: PE-Texas Red通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
2.添加Annexin V-iFluor 594检测溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光片组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜分析细胞

 

操作步骤

使用Annexin V-iFluor 594制备和孵育细胞:

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 594(组分A)加入细胞中。

5.在室温下孵育30至60分钟,避光。

6.在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,添加300μL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

7.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光器组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜监测荧光强度。

 

使用流式细胞仪分析:

使用流式细胞仪在Ex / Em = 590 / 620nm处定量膜联蛋白V-iFluor 594结合。 注意:粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而,Casciola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 

 

使用荧光显微镜分析:

1.孵育后移取细胞悬液,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。

2.将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。 注意:对于粘附细胞,建议直接在盖玻片上生长细胞。 与Annexin V-iFluor 594孵育后,用测定缓冲液冲洗1-2次,并将测定缓冲液加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并可视化细胞。 在与膜联蛋白V-iFluor 594孵育后,细胞也可以固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.使用TRITC或Texas Red通道在荧光显微镜下用膜联蛋白V-iFluor 594分析凋亡细胞。 质膜上的橙色染色表明膜联蛋白V-iFluor 594与细胞表面上的PS结合。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 594检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 594与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,导致染色强度增加。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测     货号22826

图1.用细胞仪膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒染色的Costar黑壁/透明底96孔板中Jurkat细胞的图像*红色荧光*。 (左):未处理的对照细胞。 (右):用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。

 

参考文献

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Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

 

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说明书
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 .pdf

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