Helixyte Green 双链DNA定量试剂 货号17598-AAT Bioquest荧光染料

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Helixyte Green 双链DNA定量试剂

Helixyte Green 双链DNA定量试剂

货号 17598 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 ml 价格 25836
Ex (nm) 502 Em (nm) 522
分子量 661.17 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Helixyte Green dsDNA染料是美国AAT Bioquest生产的一种超灵敏荧光核酸染料,Helixyte Green dsDNA染色是一种超灵敏荧光核酸染色,用于定量溶液中的双链DNA(dsDNA)。最近,Helixyte Green dsDNA染料用于PCR产物的直接循环测序方法中的PCR扩增产量。使用标准光谱荧光计和2.5 ng / mL带有荧光酶标仪的dsDNA检测到少至25 pg / mL的dsDNA(在2 mL测定体积中50 pg dsDNA),在ssDNA,RNA和ss存在下检测效果最小 游离核苷酸。该测定在三个数量级上是线性的并且几乎没有序列依赖性。它是从多种来源准确测量DNA的理想选择,包括基因组DNA,病毒DNA,小量制备DNA或PCR。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte Green 双链DNA定量试剂。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

分析方案

以下方案是使用Helixyte Green 定量dsDNA的实例。 在打开样品瓶之前,让Helixyte Green 温热至室温。

注意:没有数据可用于解决Helixyte Green dsDNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合,所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理,并进行适当的处理。 应特别小心处理DMSO储备溶液,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

1.准备Helixyte Green 工作解决方案:

1.1通过在TE(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 7.5-8.0)中浓缩DMSO溶液200倍稀释,制备Helixyte Green的水性工作溶液。 例如,将50μLHelixyteGreen添加至10 mL TE,以制备足够的工作溶液,以在200μL终体积中测定100个样品。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注1:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注2:为获得最佳结果,该溶液应在制备后几小时内使用。

2.准备dsDNA标准品的连续稀释液(0至3 ng / mL):

2.1在ddH2O中制备1mg / mL的dsDNA原液(如来自Sigma的小牛胸腺DNA)。

2.2将10μL1mg / mL dsDNA原液(步骤2.1)加入到998 L TE缓冲液中,得到10μg/ mL dsDNA溶液,然后进行1:10和1:2连续稀释,得到1000,100,50,25 ,12.5,6.25,3.125和0 ng / mL。

2.3如说明书中的表1和2中所述,将dsDNA标准品和含有测试样品的DNA添加到96孔固体黑色微孔板中。

3.运行dsDNA测定:

3.1将100μLdsDNA测定混合物(来自步骤1.1)添加至dsDNA标准品的每个孔,空白对照和测试样品(参见步骤2.3)以使总dsDNA测定体积为200μL/孔。

注1:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLdsDNA测定混合物。

注2:对于基于曲线的测定,每曲线添加1mL样品和1mL dsDNA测定混合物。

3.2在室温下孵育反应5至10分钟,避光。

3.3使用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(在515nm处截止)观察荧光增加。

3.4空白孔中的荧光(仅含TE缓冲液)用作对照,并从具有dsDNA反应的那些孔的值中减去。 从DNA标准曲线中产生的标准曲线确定样品的DNA浓度。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

说明书
Helixyte Green 双链DNA定量试剂.pdf