SunRed 醋酸 细胞活性检测 货号11405-AAT Bioquest荧光染料

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SunRed 醋酸 细胞活性检测

SunRed 醋酸 细胞活性检测

SunRed 醋酸 细胞活性检测     货号11405 货号 11405 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 mg 价格 1272
Ex (nm) 653 Em (nm) 661
分子量 ~350 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

SunRed 醋酸 细胞活性检测是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活性检测的试剂盒,酯酶可催化水解SunRed 乙酸盐(SRA)产生Sun Red荧光基团,该荧光基团在633nm处可以被激发,发射光波长在~660nm处。Sun Red荧光基团可以用Cy5滤光片检测,大多数商业荧光仪器中都装有Cy5滤光片。尽管Sun Red在633nm处被激发,~660nm发出红光;但是SRA在633nm处的光吸收很小,在没有红光发射的条件下,这使SRA成为最灵敏的NIR(近红外)酯酶底物之一。在流行的荧光色彩应用于其它细胞功能分析时,SRA提供另一种颜色用于可行性细胞的分析。SRA是一个非荧光性的疏水性化合物,它可以通过细胞膜,在细胞内酯酶水解乙酸盐基团作用下,产生高强度荧光的产物Sun Red。Sun Red分子在完整细胞膜结构的细胞内积累至产生足够深的红色荧光,因此可以用作细胞的标签。细胞膜结构不完整或者代谢活性弱的细胞,不能够积累荧光产物,因此不显现深色的红色荧光。SRA可以与绿色荧光染料试剂(例如FITC或者Alexa Fluor 488标记的抗体)结合使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的SunRed 醋酸 细胞活性检测。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: 620nm
发射: 660nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy5滤波片组
荧光酶标仪  
激发: 620nm
发射: 660nm
cutoff: 640nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.去除培养基
3.添加SunRed 醋酸酯工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
4.在37°C,5%CO2培养箱中孵育1小时
5.用HHBS清洗并更换工作溶液
6.读取Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度(截止640 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 醋酸盐原液(2至10 mM)
准备2至10 mM的SunRed 醋酸盐在DMSO中的储备溶液。 应立即使用原液。

  

2.工作溶液

SunRed 醋酸盐工作溶液:
在实验前,在含有20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液的1X Hank盐溶液中,以5至10μM制备SunRed 醋酸盐工作溶液。

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样品分析

1.从细胞中取出培养基。

2.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的SunRed 乙酸盐工作溶液。

3.将SunRed 醋酸盐工作溶液板在室温或37°C下孵育1小时,避光。 适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 对于非粘附细胞,建议在孵育后以800rpm离心细胞板2分钟。

4.监测Ex / Em = 620 / 660nm处的荧光强度(截止640nm)。

 

参考文献

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[Esterase-6 gene-enzyme system and resistance of Drosophila to increased temperature]
Authors: Totskii VN, Eserkepova EV, Dzhan ZU.
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说明书
SunRed 醋酸 细胞活性检测 .pdf

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