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品牌：Nippon Gene
CAS No.：81458-04-0 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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317-00244 |
– | 1000 U×10 | – | 咨询 | – | – |
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货号 | 71578 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 10 mg | 价格 | 15300 | |
| Ex (nm) | 836 | Em (nm) | 879 | |
| 分子量 | 1422 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
iFluor 840琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的优秀的荧光标记染料，iFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。iFluor 染料也具有比经典荧光标记染料更好的标记性能，如FITC，TRITC，Texas Red ，Cy3 ，Cy5和Cy7。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸而不包含性能的极便宜的荧光染料（替代Alexa Fluor 染料）。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料（如DyLight 染料）的光谱特性相匹配。
琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的极佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺（如Tris和甘氨酸）和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）也必须在进行染料缀合之前除去（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，特定标记反应可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的iFluor 840马来酰亚胺。
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产品说明书
染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml，如果可能）混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯抗体、牛血清白蛋白（BSA）或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显着降低。为获得极佳标记效率，建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B）。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。
3.确定极佳染料/蛋白质比例（可选）：
注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定极佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。
3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）（见说明书）。
3.6运行上述4种结合物的功能测试，确定极佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。
4.运行结合反应：
4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。
注意：溶液B /溶液的极佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。
注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Nanovesicle delivery to the liver via retinol binding protein and platelet-derived growth factor receptors: how targeting ligands affect biodistribution
Authors: Ching-Yun Hsu, Chun-Han Chen, Ibrahim A Aljuffali, You-Shan Dai, Jia-You Fang
Journal: Nanomedicine (2017)
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SI PVC材质 用于玻璃巴斯德吸 1个
原厂型号
品牌
单件重量
货期
| brand 接头 (SI, PVC材质)，用于玻璃巴斯德吸， |
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| 货号 | 20053 | 存储条件 | 室温储存不要冷冻 |
| 规格 | 10 mL | 价格 | 1008 |
| Ex (nm) | Em (nm) | ||
| 分子量 | ~13000 | 溶剂 | Water |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
产品基本信息
货号：20053
产品名称：Pluronic F-127 10%水溶液
CAS：9003-11-6
规格：10ml
储存条件：室内储存不要冷冻
保质期：6个月
产品物理化学光谱特性
分子量：~12500
溶剂：水
注意：不要冷藏或冻结Pluronic F-127溶液，因为它可能沉淀。如果观察到沉淀，则可在使用前加热至37°C并进行涡流处理。
产品介绍
Pluronic F-127是一种非离子表面活性剂，100％活性，对低浓度细胞无毒，常用于染料AM酯，如Indo-1 AM，Fura-2 AM，Calcein AM，Fluo-3 AM，Fluo-4 AM，Quest Fluo-8 AM和Quest Rhod-4 AM等，以改善其水溶性。 Pluronic F-127也可用于分散其他亲脂性探针。应进行适当的控制以确保Pluronic F-127不会改变细胞的膜特性。为方便起见，我们还提供10％Pluronic F-127水溶液（Cat＃20053）和固体（Cat＃20050）。
产品说明书
操作说明
注意：以下是我们推荐的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.将10％Pluronic F-127储备溶液稀释到细胞上样缓冲液（如Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）中，稀释度为1：1000至1：500，得到0.02至0.04％的工作溶液。
2.然后将AM酯的DMSO储备溶液稀释到0.02至0.04％的工作溶液（来自步骤1）中，以获得1μM至10μM的最终AM酯浓度。
注意：Pluronic F-127的最终浓度通常保持在0.08％或以下。
3.将细胞在所需温度下孵育10分钟至1小时。
注意：通常，希望使用所需的最少量的AM酯来获得足够的荧光信号噪声水平。
4.标记后，在开始实验之前用HHBS或新鲜培养基洗涤细胞。
参考文献
3D printed lattices as an activation and expansion platform for T cell therapy
Authors: Bahman Delalat, Frances Harding, Batjargal Gundsambuu, Elena M De-Juan-Pardo, Felix M Wunner, Marie-Luise Wille, Marek Jasieniak, Kristen AL Malatesta, Hans J Griesser, Antonio Simula
Journal: Biomaterials (2017)
GD2-specific CAR T Cells Undergo Potent Activation and Deletion Following Antigen Encounter but can be Protected From Activation-induced Cell Death by PD-1 Blockade
Authors: Tessa Gargett, Wenbo Yu, Gianpietro Dotti, Eric S Yvon, Susan N Christo, John D Hayball, Ian D Lewis, Malcolm K Brenner, Michael P Brown
Journal: Molecular Therapy (2016)
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Journal: Scientific reports (2016)
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Authors: Akash Bachhuka, Susan N Christo, Alex Cavallaro, Kerrilyn R Diener, Agnieszka Mierczynska, Louise E Smith, Romeo Marian, Jim Manavis, John D Hayball, Krasimir Vasilev
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CAS No.：500372-25-8 储存条件：-20°C 纯度：>95% (NMR) |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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CDX-N0052-M005 |
– | 5 mg | – | 1,010.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司客服。
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