Lumitube 3.5ml type 检测用试管 品牌:Kikkoman CAS No.:


品牌:Kikkoman
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

300-09351

1000 tubes

Lumitube 3.5ml type                                                      检测用试管             品牌:Kikkoman  CAS No.:


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Merck-22-6 品牌:Synikinase CAS No.:12847-42-4


品牌:Synikinase
CAS No.:12847-42-4
储存条件:+4℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

SYN-1118-M001

1 mg

Merck-22-6                                                                品牌:Synikinase  CAS No.:12847-42-4


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iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG 货号45270-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270 货号 45270 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 557 Em (nm) 570
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 555 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 555酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 555 Styramide PSA试剂盒。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3/TRITC滤波片组
发射: Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG.pdf

细胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0 货号17537-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

细胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0

细胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0

细胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0    货号17537 货号 17537 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1944
Ex (nm) 371 Em (nm) 438
分子量 560.95 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:17537

产品名称:Hoechst 34580细胞核染料

CAS:911004-45-0

规格:5mg

储存条件:-20℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:560.95

外观:亮黄色粉末

溶剂:水或DMSO

激发波长(nm):368

发射波长(nm):437

 

产品介绍

Hoechst 34580细胞核染料,用于在荧光显微镜中标记DNA。 因为这些荧光染色标记DNA,它们也常用于可视化细胞核和线粒体。 通常使用这些密切相关的双苯并酰亚胺中的两种,Hoechst 33258和Hoechst 33342。 两种染料都被约350nm的紫外光激发,并且都发射蓝/青色荧光,发射最大值为461nm。 Hoechst染色剂可以与活细胞或固定细胞一起使用,并且通常用作另一种核酸染色剂DAPI的替代物。 它们之间的关键区别在于Hoechst 33342的额外乙基使其更具亲脂性,因此更容易穿过完整的细胞膜。在某些应用中,Hoechst 33258的渗透性明显低于Hoechst 33342。这些染料也可用于通过绘制标准的发射 – 含量曲线来检测样品DNA的含量。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Hoechst 33342细胞核染料。 

产品说明书

染色细胞分析方案

        以下程序适用于大多数细胞类型。 生长培养基,细胞密度,其他细胞类型的存在和其他因素可能影响染色。 玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的真实或明显染色,导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

        通过离心沉淀细胞并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中,在pH7.4下具有最佳染料结合。培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。使用0.5和5uM之间的浓度添加Hoechst染色,并将其孵育15至60分钟。在最初的实验中,最好在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生最佳染色的浓度。

 

参考文献

Amine terminated G-6 PAMAM dendrimer and its interaction with DNA probed by Hoechst 33258
Authors: Choi YS, Cho TS, Kim JM, Han SW, Kim SK.
Journal: Biophys Chem (2006): 142

Design of new bidentate ligands constructed of two Hoechst 33258 units for discrimination of the length of two A3T3 binding motifs
Authors: Tanada M, Tsujita S, Sasaki S.
Journal: J Org Chem (2006): 125

DNA sequence recognition by Hoechst 33258 conjugates of hairpin pyrrole/imidazole polyamides
Authors: Correa BJ, Canzio D, Kahane AL, Reddy PM, Bruice TC.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2006): 3745

Recognition of B-DNA by neomycin–Hoechst 33258 conjugates
Authors: Willis B, Arya DP.
Journal: Biochemistry (2006): 10217

The Hoechst 33258 Covalent Dimer Covers a Total Turn of the Double-stranded DNA
Authors: Streltsov SA, Gromyko AV, Oleinikov VA, Zhuze AL.
Journal: J Biomol Struct Dyn (2006): 285

Activity of Hoechst 33258 against Pneumocystis carinii f. sp. muris, Candida albicans, and Candida dubliniensis
Authors: Disney MD, Stephenson R, Wright TW, Haidaris CG, Turner DH, Gigliotti F.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2005): 1326

Association of the minor groove binding drug Hoechst 33258 with d(CGCGAATTCGCG)2: volumetric, calorimetric, and spectroscopic characterizations
Authors: Han F, Taulier N, Chalikian TV.
Journal: Biochemistry (2005): 9785

Hoechst 33258 as a pH-sensitive probe to study the interaction of amine oxide surfactants with DNA
Authors: Goracci L, Germani R, Savelli G, Bassani DM.
Journal: Chembiochem (2005): 197

Hydration changes in the association of Hoechst 33258 with DNA
Authors: Kiser JR, Monk RW, Smalls RL, Petty JT.
Journal: Biochemistry (2005): 16988

Recognition of a 10 base pair sequence of DNA and stereochemical control of the binding affinity of chiral hairpin polyamide-Hoechst 33258 conjugates
Authors: Reddy PM, Toporowski JW, Kahane AL, Bruice TC.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2005): 5531

说明书
细胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0.pdf