FAM-xtra 亚磷酰胺

	货号	6037	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	50 umoles	价格	1164
	Ex (nm)	493	Em (nm)	517
	分子量	879.94	溶剂	MeCN
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：6037

产品名称：FAM-xtra 亚磷酰胺

规格：50 umoles

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：879.94

溶剂：MeCN

产品介绍

6-FAM亚磷酰胺可能是最流行的荧光构建基块，已广泛用于通过荧光素荧光团有效标记5’端的寡核苷酸。标准裂解和氢氧化铵脱保护用于释放荧光素标记的寡核苷酸。尽管6-FAM已普遍用于开发各种qPCR探针，但其荧光受到两个作用限制：1.高度依赖pH值；2.光漂白迅速。目前我们已开发出FAM-xtra 亚磷酰胺解决了这两个局限性，同时完整保留了6-FAM亚磷酰胺的所有优点。 FAM-xtra亚磷酰胺可在相同操作条件下与6-FAM亚磷酰胺完全一样​​使用，而无需进行任何更改。由FAM-xtra亚磷酰胺制成的寡核苷酸具有许多优点：1.FAM-xtra标记的寡核苷酸具有与6-FAM标记的寡核苷酸相同的光谱。 2.FAM-xtra标记的寡核苷酸比相应的FAM-标记的寡核苷酸明亮得多。 3.FAM-xtra标记的寡核苷酸比相应的FAM-标记的寡核苷酸具有更高的光稳定性。4.与相应的FAM标记的寡核苷酸相比，FAM-xtra标记的寡核苷酸的荧光对pH的敏感度低得多。在生理条件下，FAM-xtra标记的寡核苷酸的荧光基本上与pH无关，这使得FAM-xtra标记的寡核苷酸的qPCR探针更加稳定。

参考文献

Development of an Innovative Intradermal siRNA Delivery System Using a Combination of a Functional Stearylated Cytoplasm-Responsive Peptide and a Tight Junction-Opening Peptide.
Authors: Ibaraki, Hisako and Kanazawa, Takanori and Takashima, Yuuki and Okada, Hiroaki and Seta, Yasuo
Journal: Molecules (Basel, Switzerland) (2016)

Non-nucleoside phosphoramidites of xanthene dyes (FAM, JOE, and TAMRA) for oligonucleotide labeling.
Authors: Kvach, Maksim V and Tsybulsky, Dmitry A and Shmanai, Vadim V and Prokhorenko, Igor A and Stepanova, Irina A and Korshun, Vladimir A
Journal: Current protocols in nucleic acid chemistry (2013): Unit 4.55

Practical synthesis of isomerically pure 5- and 6-carboxytetramethylrhodamines, useful dyes for DNA probes.
Authors: Kvach, Maksim V and Stepanova, Irina A and Prokhorenko, Igor A and Stupak, Aleksander P and Bolibrukh, Dmitry A and Korshun, Vladimir A and Shmanai, Vadim V
Journal: Bioconjugate chemistry (2009): 1673-82

Synthesis and cellular uptake of fluorescently labeled multivalent hyaluronan disaccharide conjugates of oligonucleotide phosphorothioates.
Authors: Karskela, Marika and Virta, Pasi and Malinen, Melina and Urtti, Arto and Lönnberg, Harri
Journal: Bioconjugate chemistry (2008): 2549-58

Synthesis of HyBeacons and dual-labelled probes containing 2′-fluorescent groups for use in genetic analysis.
Authors: Dobson, Neil and McDowell, David G and French, David J and Brown, Lynda J and Mellor, John M and Brown, Tom
Journal: Chemical communications (Cambridge, England) (2003): 1234-5

Amplified fragment length polymorphism (AFLP) protocol for genotyping the malarial parasite Plasmodium falciparum.
Authors: Rubio, J M and Berzosa, P J and Benito, A
Journal: Parasitology (2001): 331-6

Recovery of an oligonucleotide using silver ions immobilized onto paramagnetic particles.
Authors: Ramírez-Vick, J E and García, A A and Lee, J
Journal: Preparative biochemistry & biotechnology (1998): 243-60

Fluorescent dye phosphoramidite labelling of oligonucleotides.
Authors: Theisen, P and McCollum, C and Andrus, A
Journal: Nucleic acids symposium series (1992): 99-100

5-FAM 5-羧基荧光素炔烃

	货号	132	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10 mg	价格	1944
	Ex (nm)	493	Em (nm)	517
	分子量	413.38	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

5-羧基荧光素炔烃是美国AAT Bioquest生产的荧光素，5-FAM炔烃是通过与炔基反应开发荧光生物共轭物的良好试剂。 5-FAM是羧基荧光素的纯化单一异构体。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的5-羧基荧光素炔烃。 

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产品说明书

操作方案

标记寡核苷酸

1.准备以下试剂：

200mMTHPTA [tris（3-羟丙基三唑基甲基）胺]水溶液

100mM CuSO₄水溶液

炔烃修饰的低聚水溶液（尽可能浓缩，例如>10 mg / mL）

100mM抗坏血酸钠水溶液

10mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）

2.在反应前将CuSO₄与THPTA以1：2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为2-5当量）。

4.加入5当量的THPTA / CuSO₄工作溶液（来自步骤1）。

5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过所需的方法（例如HPLC）沉淀或纯化乙醇。

标记肽

1.准备以下试剂：

200mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO₄水溶液

炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液（取决于您的肽溶解度，>10 mg / mL）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO₄与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。

4.加入5-10当量的THPTA / CuSO₄。

5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过HPLC纯化您想要的肽。

标记炔烃有机小分子

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO₄水溶液

炔烃化合物水溶液或DMF溶液（取决于您的化合物溶解度，> 10mg / mL，）

100mM抗坏血酸钠水溶液

10mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO₄与THPTA配体。当冷冻时，该溶液可稳定数周。

3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。

4.加入25当量的THPTA / CuSO₄。

5.加入50当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。

7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。

标记生物聚合物

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO₄水溶液

炔烃改性的水中生物聚合物（尽可能浓缩，例如> 5毫克/毫升）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO₄与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物（负载比：5-20染料叠氮化物/炔烃）。

4.加入5摩尔当量（参考染料叠氮化物）的THPTA / CuSO₄。

5.加入10当量的抗坏血酸钠（参见染料叠氮化物）。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。

标记细胞，细胞裂解物或生物样品

1.准备以下试剂：

100mM THPTA配体水溶液

20mM CuSO₄水溶液

300mM抗坏血酸钠水溶液

2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液

2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品，将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中，然后短暂涡旋混合。

50μL细胞或细胞裂解液样品

50μLPBS缓冲液

50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（或染料炔烃）检测试剂

3.加入10μL100mM THPTA溶液，短暂涡旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO₄溶液，短暂涡旋振荡。

5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应，短暂涡旋混合。

6.保护点击反应不受光照，使其在室温下孵育30分钟。

7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和分析。

参考文献

Multicellular Vascularized Engineered Tissues through User-Programmable Biomaterial Photodegradation
Authors: Christopher K Arakawa, Barry A Badeau, Ying Zheng, Cole A DeForest
Journal: Advanced Materials (2017)

Green tea inhibited the elimination of nephro-cardiovascular toxins and deteriorated the renal function in rats with renal failure
Authors: Yu-Hsuan Peng, Douglas H Sweet, Shiuan-Pey Lin, Chung-Ping Yu, Pei-Dawn Lee Chao, Yu-Chi Hou
Journal: Scientific reports (2015)

Advances in Quantitative FRET-Based Methods for Studying Nucleic Acids
Authors: Søren Preus, L Marcus Wilhelmsson
Journal: ChemBioChem (2012): 1990–2001

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