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品牌：Enzo
CAS No.：116673-45-1 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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BML-L123-0005 |
– | 5mg | – | 4,400.00 | – | – |
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货号 | 13537 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 100 tests | 价格 | 2472 | |
| Ex (nm) | 336 | Em (nm) | 455 | |
| 分子量 | 2034.36 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
冠状病毒（CoV）是一种可以感染人类和多种动物，因其形态看上去像中世纪欧洲帝王的皇冠，因此命名为“冠状病毒”。这类病毒具有胃肠道、呼吸道和神经系统的嗜性，可以导致多种疾病。在2019年底，一种新型的冠状病毒被称为严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2（SARS-CoV-2），开始在全球蔓延。即使大多数受感染的患者仅患有轻度症状，例如发烧和咳嗽，但该疾病可能发展为致命的肺炎和急性呼吸衰竭病例，尤其是在多病体弱的的老人中。该病毒仅仅从出现开始的三四个月，全球已经感染了超过100万人。当前，尚无用于治疗Covid-19的任何具体有效的选择。目前，Covid-19的临床治疗主要是对症治疗，并结合上市的抗病毒药物（如瑞德昔韦和抗生素）以治疗继发感染。目前全世界都迫切需要开发抗SARS-CoV-2的特异性抗病毒治疗方法和疫苗，而冠状病毒主蛋白酶是抗CoV药物设计的重要靶点，在病毒基因表达和复制中起着关键作用。目前已掌握的治疗人类免疫缺陷病毒（HIV）和丙型肝炎的成功策略是抑制蛋白水解酶消灭病毒蛋白酶。而且证明了蛋白酶抑制剂治疗病毒感染具有非常大的潜力。同样，SARS-CoV-2病毒必须要进行复制的酶便是蛋白酶，因此Covid-19是抗病毒治疗极好的靶点。
Covidyte ED450是一种包含11个氨基酸序列的肽底物，可被冠状病毒蛋白酶切割。FRET肽的”N”和”C”末端分别包含Dabcyl（淬灭剂）和Edans（供体），当该肽完整时，Edans的荧光可被Dabcy有效地淬灭。当该肽被冠状病毒蛋白酶水解时，Edans片段产生明显增强的荧光，因为其荧光不再被Dabcyl淬灭。冠状病毒蛋白酶的活性可以通过Edans的荧光强度有效地检测到。Covidyte ED450是筛选冠状病毒蛋白酶抑制剂的便捷工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Covidyte肽底物系列产品。
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适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| 激发： | 350nm |
| 发射： | 460nm |
| cutoff： | 420nm |
| 推荐孔板： | 黑色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
溶液配制
储备溶液配制
1.Covidyte ED450储备液（200X）：向Covidyte ED450小瓶中添加25 µL（对于cat＃13537）或250 µL（对于cat＃13538）DMSO。
注意：制成单次使用的等分试样，并储存在-20°C下。
工作溶液配制
1.Covidyte ED450工作溶液：在20 mM Tris缓冲液（pH 7.5）或自备缓冲液中以1：200稀释底物储备液。每个实验在96孔板中使用50μL底物溶液。
2.冠状病毒蛋白酶稀释：根据需要稀释冠状病毒蛋白酶。
实验步骤
（一个96孔板的样品方案）
对于动力学读数：立即开始连续不断地测量荧光强度，并每5分钟记录一次数据，持续30-120分钟。
对于终点读数：在避光的条件下，将反应在所需温度下孵育30至120分钟。然后测量荧光强度。
图示
 图1蛋白酶在蛋白质激活、细胞调节和信号转导以及氨基酸的生成中起着至关重要的作用，用于蛋白质合成或其他代谢途径。 FRET蛋白酶底物广泛用于检测蛋白酶活性，特别是用于病毒蛋白酶的检测，这些病毒蛋白酶经常需要较长的肽序列才能实现最佳结合，例如冠状病毒，HIV和HCV蛋白酶。原理：内部淬灭的FRET肽底物被蛋白酶消化，荧光强度与蛋白酶活性成正比，从而产生高荧光的肽片段。Tide Quencher、Tide Fluor 和iFluor 染料都是研发用于高通量筛选应用的FRET蛋白酶底物的极其有效的淬灭剂。 |
相关产品
| 品牌 | 品名 | 货号 | 规格 | 描述 |
| AAT | Covidyte IF670 | #13542 | 100 Tests |
1.包含可被冠状病毒蛋白酶切割的14个氨基酸序列的肽底物 2.#13542:当该肽被冠状病毒蛋白酶水解时，iFluor 670片段产生明显增强的荧光，因为其荧光不再被TQ5淬灭;#13541:当该肽被冠状病毒蛋白酶水解时，TF5片段产生明显增强的荧光，因为其荧光不再被TQ5淬灭 |
| AAT | Covidyte TF670 | #13541 | 1000 Tests | |
| AAT | Covidyte EN450 | #13535 | 100 Tests | |
| AAT | Covidyte ED450 | #13537 | 100 Tests | 包含可被冠状病毒蛋白酶切割的11个氨基酸序列的肽底物 |
参考文献
Synthesis, modification and docking studies of 5-sulfonyl isatin derivatives as SARS-CoV 3C-like protease inhibitors.
Authors: Liu, Wei and Zhu, He-Min and Niu, Guo-Jun and Shi, En-Zhi and Chen, Jie and Sun, Bo and Chen, Wei-Qiang and Zhou, Hong-Gang and Yang, Cheng
Journal: Bioorganic & medicinal chemistry (2014): 292-302
Synthesis and evaluation of pyrazolone compounds as SARS-coronavirus 3C-like protease inhibitors.
Authors: Ramajayam, R and Tan, Kian-Pin and Liu, Hun-Ge and Liang, Po-Huang
Journal: Bioorganic & medicinal chemistry (2010): 7849-54
Evaluation of metal-conjugated compounds as inhibitors of 3CL protease of SARS-CoV.
Authors: Hsu, John T-A and Kuo, Chih-Jung and Hsieh, Hsing-Pang and Wang, Yeau-Ching and Huang, Kuo-Kuei and Lin, Coney P-C and Huang, Ping-Fang and Chen, Xin and Liang, Po-Huang
Journal: FEBS letters (2004): 116-20
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品牌：Enzo
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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ALX-201-820-0010 |
– | 10 µg | – | 3,790.00 | – | – |
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货号 | 1110 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 2 Labelings | 价格 | 1944 | |
| Ex (nm) | 412 | Em (nm) | 505 | |
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
ReadiLink Rapid mFluor 510 蛋白标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。该试剂盒仅需要两个简单的混合步骤而无需纯化步骤。 试剂盒中使用的iFluor 和mFluor 染料的琥珀酰亚胺酯（SE）显示出与蛋白质的脂族胺的良好反应性和选择性，并形成羧酰胺键，其与天然肽键相同且稳定。 iFluor 和mFluor-抗体缀合物可用于免疫荧光染色，荧光原位杂交，流式细胞术和其他生物学应用。 每个ReadiLink 抗体标记试剂盒都提供了进行两次偶联反应（2×50μg蛋白质）的所有必需成分。 每个试剂盒可用于标记50-100μg单克隆，多克隆抗体或其他蛋白质（> 10 kDa），只需两个简单的混合步骤。抗体标记试剂盒ReadiLink Rapid mFluor 510是美国AAT Bioquest研发的产品。
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产品说明书
标准操作规程（标记50μg蛋白质）
将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心，并在开始结合前准备所需的溶液。 以下SOP是标记抗HDAC IgG抗体的实例。
1.准备蛋白质溶液（溶液A）：
为了标记50g蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1mg / mL），将5L（总反应体积的10％）的反应缓冲液（组分B）与50L目标蛋白质溶液混合。
注1.如果您的蛋白质浓度不同，请相应调整蛋白质体积，使~50μg蛋白质可用于标记反应。
注2：为了标记100g蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1mg / mL），将10μL（总反应体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100μL目标蛋白质溶液混合。
注3：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中;如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，必须用1X PBS（pH 7.2-7.4）透析，或使用Amicon Ultra-0.5超滤管，Ultracel-10超滤膜，10 kDa（来自Millipore的cat＃UFC501008）去除用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（如硫酸铵和乙酸铵）。
注4：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记。
注5：如果蛋白质浓度小于1 mg / mL，则结合效率会降低。为获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
2.运行结合反应：
2.1将蛋白质溶液（溶液A）加入到一瓶标记染料（组分A）中，通过反复移液几次将其混合均匀，或将小瓶涡旋几秒钟。
注意：如果要标记100 µg蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg蛋白质分成2 x 50 µg蛋白质，并使每个50 µg蛋白质与一小瓶标记染料反应，然后合并两个小瓶，用于下一步。
2.2将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。
注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。
3.停止共轭反应：
3.1加入5 µL TQ染色淬灭缓冲液（组分C）（对于50 µg蛋白质）或加入10 µL TQ染色淬灭缓冲液（组分C）（对于100 µg蛋白质）。加入的缓冲液是总反应体积的10％。
3.2在室温下孵育10分钟。
3.3标记的蛋白质（抗体）完成。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
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| 抗体标记试剂盒 ReadiLink mFluor 510 | Cat#1110 |
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品牌：Pall
CAS No.： 储存条件：室温 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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365-06921 |
– | 12 plates | – | 咨询 | – | – |
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