上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite™荧光法β-半乳糖苷酶检测试剂盒 *适合于流式细胞仪*(断货)
| 货号 | 12600 | 存储条件 | 建议在低于-15℃温度下冷冻保存 |
| 规格 | 1 kit | 价格 | 断货 |
| Ex (nm) | 499 | Em (nm) | 514 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
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| 货号 | 12600 | 存储条件 | 建议在低于-15℃温度下冷冻保存 |
| 规格 | 1 kit | 价格 | 断货 |
| Ex (nm) | 499 | Em (nm) | 514 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
| 货号 | 14010 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
| 规格 | 25 mg | 价格 | 1008 | |
| Ex (nm) | 341 | Em (nm) | 441 | |
| 分子量 | 338.32 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
产品基本信息
货号:14010
产品名称:MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝
CAS:6160-78-7
规格:25mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:338.32
溶剂:DMSO
激发波长(nm):360
发射波长(nm):449
产品介绍
MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,MUG是荧光MU底物,用于使用荧光酶标仪或荧光计检测细胞提取物和纯化的酶制剂中的半乳糖苷酶。 7-羟基-4-甲基香豆素(4-甲基伞形酮,MU)的有机和无机酯和糖苷是最常用的荧光底物。 这些底物产生水溶性蓝色荧光香豆素荧光团。 MU在pH 10以上产生最大荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MUG β半乳糖苷酶检测试剂。
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参考文献
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Authors: Louis MH, Dutoit S, Denoux Y, Erbacher P, Deslandes E, Behr JP, Gauduchon P, Poulain L.
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Journal: Appl Environ Microbiol (2005): 4225
A novel synthetic peptide derivative from lactoferrin exhibiting antimicrobial activity
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Construction of transcriptional and translational lacZ gene reporter plasmids for use in Streptococcus mutans
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Optimisation of an enzymatic method for beta-galactosidase
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Adenoviral gene transfer to spinal-cord neurons: intrathecal vs. intraparenchymal administration
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Comparative performance of Colisure
Authors: McFeters GA, Broadaway SC, Pyle BH, Pickett M, Egozy Y.
Journal: J Am Water Works Assoc (1997): 112
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| 货号 | 12601 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 500 Tests | 价格 | 3924 |
| Ex (nm) | 498 | Em (nm) | 517 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Amplite 荧光法β-半乳糖苷酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于β-半乳糖苷酶的试剂盒,大肠杆菌β-半乳糖苷酶是一个四聚体。β-半乳糖苷酶的每个单元包含五个区域,其中第三个是激活位点。它是细胞中一种必需酶。缺乏这种酶会导致半乳糖唾液沉积症和Morquio B综合症。在大肠杆菌中,β-半乳糖苷酶通过LacZ操作子激活。LacZ表达的检测已经成为已经成为惯例,已经能够在每个细胞中检出少至5个复制的β-半乳糖苷酶。Amplite 荧光法β-半乳糖苷酶检测试剂盒 *绿色荧光* 使用一种荧光性半乳糖苷酶底物,它可以很敏感地的辨别LacZ+细胞和LacZ-细胞。它可以用于ELISA检测系统中,β-半乳糖苷酶的检测;也可以用于细胞表达LacZ基因的检测。这种半乳糖苷酶-断裂产物的Ex/Em = 490/520。nm,可以通过带有FITC滤光器的荧光设备检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法β-半乳糖苷酶检测试剂盒。
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适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| 激发: | 490nm |
| 发射: | 525nm |
| cutoff: | 515nm |
| 推荐孔板: | 黑色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用LacZ基因制备稳定或瞬时转染的细胞
2.用测试化合物孵育细胞(样品)
3.裂解细胞
4.将裂解液转移至微量滴定板
5.添加FDG工作解决方案
6.根据细胞类型,在室温或37°C孵育至少5分钟
7.添加停止解决方案
8.监测Ex / Em = 490/525 nm的荧光强度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 FDG储备溶液(1倍):
将125 µL DMSO(组分E)加入FDG(组分A)小瓶中,制成1X FDG储备液。 注意:25 µL FDG足以装满1个板,避光。
2.标准溶液
β-半乳糖苷酶标准品
可选(如果需要标准曲线):用0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液制备一系列β-半乳糖苷酶(大肠杆菌)标准品的稀释液。 将标准曲线上每个点的等分试样50 µL转移至平板的对照孔中。 β-半乳糖苷酶的最高推荐量为200 mU / mL(200-400 ng)。 建议对标准曲线进行2倍系列稀释,包括8个点。 注意:调整标准曲线以适合特定的实验条件,例如细胞类型,数量,转染效率和培养板的大小。 每次进行测定时,必须新鲜制备标准曲线的稀释液。
3.工作溶液
3.1 0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液:
将30 µLβ-巯基乙醇(组分F)添加到10 mL反应缓冲液(组分B)中,并充分混合。
注意:制备酶稀释缓冲液需要额外的缓冲液,用于生成标准曲线。
3.2 FDG工作方案:
将25 µL 1X FDG储备溶液加到5 mL的0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液中。 注意:请勿将FDG溶液在室温下长时间放置,否则会发生自发水解。
3.3 裂解缓冲液工作液:
使用前,将5 µLβ-巯基乙醇(组分F)加入5 mL裂解缓冲液(组分D)中。 注意:在裂解细胞之前,始终将0.1%β-巯基乙醇添加到裂解缓冲液中
样品操作及分析
表1.细胞培养板推荐的Lysis Buffer工作溶液体积
| 培养板类型 | 裂解缓冲液工作溶液(µL /孔) |
| 96孔板 | 50 |
| 24孔板 | 250 |
| 12孔板 | 500 |
| 6孔板 | 1000 |
| 60毫米板 | 2000 |
| 100毫米板 | 4000 |
1.从哺乳动物细胞制备细胞提取物
1.1用测试化合物处理含有LacZ基因的细胞所需的时间。
1.2用1X PBS洗涤细胞两次。不要移动细胞。
1.3用Lysis Buffer工作溶液相应地裂解细胞。
1.3.1对于贴壁细胞:将Lysis Buffer工作溶液添加至培养板。有关建议的数量,请参见表1。
1.3.2对于非贴壁细胞:将细胞沉淀到离心管中,并向管中加入50-2000 µL Lysis Buffer工作溶液(取决于细胞沉淀的大小)。
1.4将上一步的细胞在室温下孵育10-15分钟,然后轻轻旋转平板或试管数次以确保完全裂解。
1.5继续进行FDG测定或将样品在-80°C下冷冻直至使用。注意:通过快速的冻融循环(在-20°C到-80°C冷冻1-2小时,然后在室温解冻)也可以获得良好的裂解。或者,将细胞裂解液离心2-3分钟以沉淀不溶物,然后测定上清液。
2.运行ß-半乳糖苷酶测定
2.1如果需要,在室温下解冻裂解细胞管或板。如果细胞接种在96孔板上,则直接在96孔板上进行测定。
2.2在96孔板的每个孔中加入50 µL细胞提取物。如果需要标准曲线,请为标准曲线保存一些对照孔(50 uL /孔)。注意:如有必要,当转染效率很高时,可在裂解缓冲液工作溶液中稀释裂解液,或在转染效率低时减少裂解液的体积。如果在96孔板上进行转染,或将稳定的细胞系接种到96孔板上,请直接在板上进行测定。对于内源性β-半乳糖苷酶活性控制,请添加50 µL非转染细胞的细胞裂解液。对于空白对照,添加50 µL 1X裂解缓冲液。
2.3向每个孔中加入50 µL FDG工作溶液。根据细胞类型,将板在室温或37°C下孵育大约5分钟至4小时。
2.4向每个孔中添加50 µL终止缓冲液(组分C)。终止缓冲液除了终止反应之外,还引起产物的荧光强度增加。
2.5用荧光酶标仪在Ex / Em = 490/525 nm处测量每个孔中溶液的荧光强度。
2.6根据线性标准曲线定量ß-半乳糖苷酶表达。
参考文献
BZLF1 Attenuates Transmission of Inflammatory Paracrine Senescence in Epstein-Barr Virus-Infected Cells by Downregulating Tumor Necrosis Factor Alpha
Authors: Xubing Long, Yuqing Li, Mengtian Yang, Lu Huang, Weijie Gong, Ersheng Kuang
Journal: Journal of Virology (2016): 7880–7893
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| Amplite 荧光法β-半乳糖苷酶检测试剂盒 | Cat#12603 |
| Amplite 比色法β-半乳糖苷酶检测试剂盒 | Cat#12604 |
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| 货号 | 14003 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
| 规格 | 10 mg | 价格 | 0 | |
| Ex (nm) | 352 | Em (nm) | 407 | |
| 分子量 | 368.29 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
产品基本信息
货号:14003
产品名称:CUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝(停产)
规格:10mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:368.29
溶剂:DMSO
激发波长(nm):486
发射波长(nm):448
产品介绍
CUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,CUG是具有羧基反应性手柄的荧光半乳糖苷酶底物,可用于缀合。7-羟基香豆素的有机和无机酯和糖苷是最常用的荧光底物。这些底物在与酶相互作用时产生水溶性蓝色荧光香豆素荧光团。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的CUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝。
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参考文献
The translation of an antiapoptotic protein HIAP2 is regulated by an upstream open reading frame
Authors: Warnakulasuriyarachchi D, Ungureanu NH, Holcik M.
Journal: Cell Death Differ (2003): 899
Absence of effect of varying Thr-Leu codon pairs on protein synthesis in a T7 system
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The CUG-binding protein binds specifically to UG dinucleotide repeats in a yeast three-hybrid system
Authors: Takahashi N, Sasagawa N, Suzuki K, Ishiura S.
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An AUG initiation codon, not codon-anticodon complementarity, is required for the translation of unleadered mRNA in Escherichia coli
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A carboxyl-terminal domain in fibroblast growth factor (FGF)-2 inhibits FGF-1 release in response to heat shock in vitro
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Fibroblast growth factor 3, a protein with dual subcellular localization, is targeted to the nucleus and nucleolus by the concerted action of two nuclear localization signals and a nucleolar retention signal
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Molecular characterisation of the pifC gene encoding translation initiation factor 3, which is required for normal photosynthetic complex formation in Rhodobacter sphaeroides NCIB 8253
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Authors: Khudyakov Yu E, Neplyueva VS, Kalinina TI, Smirnov VD.
Journal: FEBS Lett (1988): 369
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| 货号 | 14016 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
| 规格 | 5 mg | 价格 | 1008 | |
| Ex (nm) | 341 | Em (nm) | 441 | |
| 分子量 | 352.29 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
产品基本信息
货号:14016
产品名称:MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝
CAS:881005-91-0
规格:5mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:352.29
溶剂:DMSO
激发波长(nm):360
发射波长(nm):449
产品介绍
MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,MUGlcU是MU的一种荧光底物,可通过荧光酶标仪或荧光光度计读取,用来检测细胞抽提物和纯化酶制剂中的半乳糖苷酶。有机、无机脂类和7-羟基-4-甲基香豆素(4-methylumbelliferone, MU)中的糖苷都是使用的最普通的荧光底物。这些底物产生水溶性的蓝色荧光香豆素荧光团。MU在pH 10以上有最大荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝。
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参考文献
Coumarin Schiff-bases: as antioxidant and possibly anti-inflammatory agents
Authors: Gacche RN, Gond DS, Dhole NA, Dawane BS.
Journal: J Enzyme Inhib Med Chem (2006): 157
Examination of lectins, polysaccharopeptide, polysaccharide, alkaloid, coumarin and trypsin inhibitors for inhibitory activity against human immunodeficiency virus reverse transcriptase and glycohydrolases
Authors: Wang HX, Ng TB.
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Induction of indoleamine 2,3-dioxygenase in alveolar interstitial cells of mouse lung by bacterial lipopolysaccharide
Authors: Urade Y, Yoshida R, Kitamura H, Hayaishi O.
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Determination of dicumarol metabolites in bile of rats
Authors: Conway WD, Lee FH, Neufeld L.
Journal: J Pharm Sci (1975): 1158