别藻蓝蛋白APC

	货号	2554	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	1008
	Ex (nm)	651	Em (nm)	660
	分子量	~105000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

分子量：~105,000

Ex(nm):651

Ex(nm):662

荧光量子产率（QY）：0.68

产品介绍

别藻蓝蛋白 APC是由藻胆蛋白提取出的一种荧光染料。藻胆蛋白由许多亚基组成，每个亚基具有蛋白质骨架，线性四吡咯发色团与其共价结合。藻红蛋白（红色）和藻蓝蛋白（蓝色）是两种主要的藻胆蛋白。藻红蛋白（PE）的吸收最大值介于490和570nm之间，而藻蓝蛋白（PC）的吸收最大值介于610和665nm之间。通常，当作为硫酸铵沉淀物冷藏储存时，藻胆蛋白具有良好的长期稳定性。纯化的胆脂蛋白可以在酸性或碱性条件下解离成亚基，但在室温下在中性pH下相对稳定，浓度大于0.1mg / mL。解离的亚基通常具有比天然色素更低的着色和荧光。建议将所有藻胆蛋白及其结合物（优选在中性缓冲溶液中）冷藏，从不冷冻。

藻胆蛋白[包括B-藻红蛋白（B-PE），R-藻红蛋白（R-PE）和别藻蓝蛋白（APC）]是用于生物学检测的超灵敏荧光染料。 它们比传统的有机荧光团灵敏度高100倍。 即使在诸如流式细胞术和免疫测定的实际应用中，藻胆蛋白缀合的抗体的灵敏度通常远大于相应的有机分子缀合物的灵敏度。 Phycobiliproteins是最亮的荧光标签，具有多个位点，可与许多生物和合成材料形成稳定的结合。

• 藻红蛋白（B-PE）具有三个吸收带，在545nm处具有最大吸收。 B-PE的亚基结构类似于R-PE，但亚基的发色团含量不同，导致吸收峰的相对强度不同：α和β亚基仅含有PEB，而γ亚基含有PEB和PUB。 B-PE存在于蓝细菌和红藻中。 B-PE的强烈粉红色和橙色荧光几乎与肉眼无法区分的R-PE。别藻蓝蛋白在主要的藻胆蛋白中是最不稳定的，在低浓度下易于解离，包括进行某些测定的浓度。 出于这个原因，许多研究人员更喜欢使用在α和β亚基之间化学交联的CL-APC，并且比APC更稳定。

• 藻红蛋白（R-PE）从红藻中分离。其主要吸收峰位于565nm，第二峰位于496nm和545nm。 次生峰的相对突出性在来自不同物种的R-PE之间显着不同。R-PE具有三种类型的亚基：α（~20,000道尔顿），β（~20,000道尔顿）和γ（~30,000道尔顿）。已发现完整R-PE的分子量为约240,000道尔顿，并且已确定（αβ）6γ的亚基结构。R-PE的α亚基仅含有藻红蛋白（PEB）发色团，而β和γ亚基含有PEB和藻蓝蛋白（PUB）。来自不同物种的R-PE的吸收光谱的可变性反映了亚基的PEB / PUB比率的差异。R-PE和密切相关的B-PE是最强荧光的藻胆蛋白，其量子效率可能超过90％，并且在任何中等浓度的溶液中，其橙色荧光很容易被肉眼看到。

C-藻蓝蛋白（C-PC）在许多蓝细菌中作为主要的藻胆蛋白发生，在一些红藻中作为次生的藻胆蛋白发生。该颜料在615和620nm之间具有单个可见吸收最大值，在~650nm处具有最大荧光发射。其分子量在70,000至110,000道尔顿之间。颜料由两个亚基α和β组成，它们以相同的数量出现，但构成分子的α和β对的确切数目可能因物种而异。α和β亚基都仅含有PCB发色团。 除了直接吸收光之外，这种强烈的蓝色颜料通过荧光能量转移接受来自藻红蛋白的量子，其中存在PE的生物体。C-PC的红色荧光转移到别藻蓝蛋白。AAT Bioquest研发的RPE、APC试剂及试剂盒被国内外科研人员灵活运用，达到不俗的科研成果。

图示

图1.藻蓝蛋白（APC）是一种与藻蓝蛋白，藻红蛋白和藻红蛋白同时存在的光采藻胆蛋白家族蛋白。 它是叶绿素的辅助色素。 所有藻胆蛋白都是水溶性的，因此不能像类胡萝卜素那样存在于膜内，而是聚集形成聚集在膜上的簇，称为藻胆体。 藻蓝蛋白吸收并发出红光，并且容易在蓝藻和红藻中发现。 藻胆素颜料具有出色的荧光特性，对于流式细胞仪的免疫测定非常有用。

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参考文献

Chromophore attachment to phycobiliprotein beta-subunits: phycocyanobilin:cysteine-beta84 phycobiliprotein lyase activity of CpeS-like protein from Anabaena Sp. PCC7120
Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
Journal: J Biol Chem (2006): 8573

Excitation energy transfer from phycobiliprotein to chlorophyll d in intact cells of Acaryochloris marina studied by time- and wavelength-resolved fluorescence spectroscopy
Authors: Petrasek Z, Schmitt FJ, Theiss C, Huyer J, Chen M, Larkum A, Eichler HJ, Kemnitz K, Eckert HJ.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2005): 1016

Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
Authors: Loos D, Cotlet M, De Schryver F, Habuchi S, Hofkens J.
Journal: Biophys J (2004): 2598

Evaluation of Tolypothrix germplasm for phycobiliprotein content
Authors: Prasanna R, Prasanna BM, Mohammadi SA, Singh PK.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2003): 59

Isolation and characterisation of phycobiliprotein rich mutant of cyanobacterium Synechocystis sp
Authors: Prasanna R, Dhar DW, Dominic TK, Tiwari ON, Singh PK.
Journal: Acta Biol Hung (2003): 113

Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
Authors: Noubir S, Luque I, Ochoa de Alda JA, Perewoska I, Tandeau de Marsac N, Cobley JG, Houmard J.
Journal: Mol Microbiol (2002): 749

Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
Authors: Ting CS, Rocap G, King J, Chisholm SW.
Journal: Microbiology (2001): 3171

Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9

Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226

[Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay]
Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

Buccutite APC-Cy7抗体标记试剂盒 标记100ug抗体

	货号	1321	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
	规格	2 Labelings	价格	6564
	Ex (nm)	754	Em (nm)	779
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Buccutite APC-Cy7抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。APC-Cy7是流式细胞仪中常用的颜色。其主要吸收峰位于651 nm，发射峰位于〜780 nm。 AAT Bioquest提供这种Buccutite 快速标记试剂盒，以促进APC-Cy7串联结合抗体和其他蛋白质，如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂。 Buccutite APC-Cy7串联缀合试剂盒提供了一种稳定且方便的将抗体与APC缀合的方法。该试剂盒包含预活化的APC-Cy7串联和反应缓冲液。缀合的抗体可用于WB，ELISA和IHC应用。该试剂盒足以进行2次标记反应，每次反应最多100μg抗体。任何新抗体试剂的最佳比例必须通过实验确定。我们的试剂盒提供预活化的APC-Cy7串联，以促进APC-Cy7串联结合抗体和其他蛋白质，如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂。我们的预活化APC-Cy7串联已准备好结合，产生比常规繁琐的基于SMCC的缀合化学高得多的产率。此外，我们的预活化APC-Cy7串联通过其蛋白质丰富的氨基与蛋白质缀合，而SMCC化学靶向必须通过抗体还原而再生的硫醇基团。Buccutite APC-Cy7抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA（组分B）的小瓶中，并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意：如果需要，抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

2.制备抗体-APC-Cy7缀合物

2.1通过向Buccutite FOL活化的APC-Cy7（组分A）的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的APC-Cy7溶液，通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

2.2将整瓶Buccutite FOL活化的APC-Cy7溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液（来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液）中，充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

2.3抗体-APC-Cy7结合物现在可以使用了。 注意：立即使用时，抗体-APC-Cy7结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意：对于长期储存，需要浓缩或冷冻干燥抗体-APC-Cy7结合物溶液。

3.抗体-APC-Cy7共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时，抗体-APC-Cy7缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存，可以将抗体-APC-Cy7缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

参考文献

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Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

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Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

	货号	22837	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
	规格	100 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	651	Em (nm)	660
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，膜联蛋白V可以与包括APC的荧光染料缀合。保留了其对磷脂酰丝氨酸（PS）的高亲和力，因此可作为流式细胞仪分析细胞凋亡的灵敏探针。由于PS的外部化发生在凋亡的早期阶段，因此APC Annexin V染色比基于核变化（如DNA片段化）的测定可更早地鉴定凋亡。 APC Annexin V染色是在膜完整性丧失之前，伴随着由凋亡或坏死过程导致的细胞死亡的最新阶段。因此，用APC Annexin V染色通常与诸如碘化丙锭（PI）或7-氨基放线菌素（7-AAD）等重要染料结合使用，以使研究者能够识别早期凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter  APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.加入APC-膜联蛋白V测定溶液
3.在室温下孵育20-60分钟
4.使用FL4通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 635/660 nm）

储备溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. APC-Annexin V原液（100X）：
将含有0.2％BSA的200μLPBS加入到APC-膜联蛋白V缀合物（组分A）的小瓶中并充分混合以制备100X APC-膜联蛋白V储备溶液。 注意：将重构的100X APC-Annexin V储备溶液储存在4 ℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

2.离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.向细胞中加入2μL100XAPC-膜联蛋白V原液。

5.可选：将2μL100X碘化丙啶（组分C）加入细胞中，用于坏死细胞。

6.在室温下孵育20至60分钟，避光。

7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。

8.使用具有FL4通道的流式细胞仪（Ex / Em = 635 / 660nm）监测APC-膜联蛋白V的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，APC-膜联蛋白V检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，APC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外叶上，因此导致染色强度增加。

参考文献

ALDH1 Bio-activates Nifuroxazide to Eradicate ALDHHigh Melanoma-Initiating Cells
Authors: Sana Sarvi, Richard Crispin, Yuting Lu, Lifan Zeng, Thomas D Hurley, Douglas R Houston, Alex von Kriegsheim, Che-Hong Chen, Daria Mochly-Rosen, Marco Ranzani
Journal: Cell Chemical Biology (2018)

CHIP functions as an oncogene by promoting colorectal cancer metastasis via activation of MAPK and AKT signaling and suppression of E-cadherin
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Journal: Journal of Translational Medicine (2018): 169

Ubiquitin ligase CHIP functions as an oncogene and activates the AKT signaling pathway in prostate cancer
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Journal: International journal of oncology (2018)

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