LAMP Green™ *50X DMSO 溶液* 货号17555-AAT Bioquest荧光染料

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LAMP Green™ *50X DMSO 溶液*

LAMP Green™ *50X DMSO 溶液*

LAMP Green™ *50X DMSO 溶液*    货号17555 货号 17555 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ul 价格 3540
Ex (nm) Em (nm)
分子量 578.73 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

等温扩增方法以流线型、指数方式提供核酸靶序列的检测。现有成功检测 LAMP 反应的染料大多基于使用比色分析的终点法。 LAMP Green 可以对 LAMP 反应进行实时荧光测量。可以使用普通实时 PCR 仪器上的 SYBR 或 FAM 通道检测染料。 LAMP Green 与琼脂糖凝胶电泳兼容,可以在凝胶上运行并通过凝胶成像仪进行分析。

 

适用仪器


qPCR  
仪器规格: SYBR 或 FAM 滤波片
荧光酶标仪  
Ex(nm): 490
Em(nm): 525
cutoff: 515
推荐孔板: 纯黑色孔板

产品说明书

样品实验方案 

表 1. 25 μL LAMP 反应混合物

成分 DNA/RNA 目标检测 无模板对照(NTC)
LAMP master mix (2X) 12.5ul 12.5ul
LAMP primer mix (10X)  2.5ul 2.5ul
LAMP Green (50X) 0.5ul 0.5ul
Target DNA/RNA Varies 0ul
ddH2O Varies 9.5ul
总容积 25ul 25ul

以下方案可用作指导,应根据您的实验需要进行优化

1.在室温下解冻所有要使用的组件并放在冰上。 短暂涡旋混合并离心以收集材料。

2.如表 1 所述制备反应混合物。列出了 25 μL/LAMP 反应的体积。 根据使用情况相应调整体积。 如有必要,可以优化 LAMP Green 浓度。

3.涡旋反应混合物和离心机收集材料。

4.密封反应容器。

5.在 65°C 下孵育 30 分钟。 如有必要,可以延长时间(即,对于低拷贝目标、具有挑战性的样品类型或已知会产生较慢扩增时间的反应)

6.如果使用 qPCR仪,可以使用 SYBR 或 FAM 滤波片实时读取信号。 对于基于酶标仪的检测,在 Ex/Em = 490/525 nm(Cutoff = 515 nm)处测量信号

7.如果在 LAMP 反应完成后分析反应产物,则通过在 >80°C 下加热 5 分钟使酶失活。

注意:LAMP Green 与琼脂糖凝胶电泳兼容,因此可以在琼脂糖凝胶上分析样品。

 

图示

LAMP Green™ *50X DMSO 溶液*    货号17555

图1. HeLa 细胞中 BRCA1 的 LAMP 检测。 使用 ABI 7500 qPCR 仪将 HeLa 细胞中的 500 ng(绿色)、50 ng(蓝色)、5 ng(橙色)和 NTC(黑色)的 gDNA 用于与 LAMP Green 荧光染料的 LAMP 反应

 

说明书
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规格 100 ul 价格 3540
Ex (nm) Em (nm)
分子量 578.73 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

等温扩增方法以流线型、指数方式提供核酸靶序列的检测。现有成功检测 LAMP 反应的染料大多基于使用比色分析的终点法。 LAMP Green 可以对 LAMP 反应进行实时荧光测量。可以使用普通实时 PCR 仪器上的 SYBR 或 FAM 通道检测染料。 LAMP Green 与琼脂糖凝胶电泳兼容,可以在凝胶上运行并通过凝胶成像仪进行分析。

 

适用仪器


qPCR  
仪器规格: SYBR 或 FAM 滤波片
荧光酶标仪  
Ex(nm): 490
Em(nm): 525
cutoff: 515
推荐孔板: 纯黑色孔板

产品说明书

样品实验方案 

表 1. 25 μL LAMP 反应混合物

成分 DNA/RNA 目标检测 无模板对照(NTC)
LAMP master mix (2X) 12.5ul 12.5ul
LAMP primer mix (10X)  2.5ul 2.5ul
LAMP Green (50X) 0.5ul 0.5ul
Target DNA/RNA Varies 0ul
ddH2O Varies 9.5ul
总容积 25ul 25ul

以下方案可用作指导,应根据您的实验需要进行优化

1.在室温下解冻所有要使用的组件并放在冰上。 短暂涡旋混合并离心以收集材料。

2.如表 1 所述制备反应混合物。列出了 25 μL/LAMP 反应的体积。 根据使用情况相应调整体积。 如有必要,可以优化 LAMP Green 浓度。

3.涡旋反应混合物和离心机收集材料。

4.密封反应容器。

5.在 65°C 下孵育 30 分钟。 如有必要,可以延长时间(即,对于低拷贝目标、具有挑战性的样品类型或已知会产生较慢扩增时间的反应)

6.如果使用 qPCR仪,可以使用 SYBR 或 FAM 滤波片实时读取信号。 对于基于酶标仪的检测,在 Ex/Em = 490/525 nm(Cutoff = 515 nm)处测量信号

7.如果在 LAMP 反应完成后分析反应产物,则通过在 >80°C 下加热 5 分钟使酶失活。

注意:LAMP Green 与琼脂糖凝胶电泳兼容,因此可以在琼脂糖凝胶上分析样品。

 

图示

LAMP Green™ *50X DMSO 溶液*    货号17555

图1. HeLa 细胞中 BRCA1 的 LAMP 检测。 使用 ABI 7500 qPCR 仪将 HeLa 细胞中的 500 ng(绿色)、50 ng(蓝色)、5 ng(橙色)和 NTC(黑色)的 gDNA 用于与 LAMP Green 荧光染料的 LAMP 反应

 

说明书
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