Amplite 荧光法法丙二醇（MDA）定量试剂盒
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货号 |
10072 |
存储条件 |
在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 |
200 Tests |
价格 |
5244 |
| Ex (nm) |
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Em (nm) |
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| 分子量 |
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溶剂 |
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| 产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法法丙二醇（MDA）定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛（MDA）是脂质过氧化过程中的天然副产物之一。它被广泛用作确定氧化应激的可靠生物标志物，MDA的定量是评估病理生理过程中氧化应激的必不可少的方法。Amplite 荧光丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了一种新的方法来测量MDA，而无需基于TBARS的MDA分析所需的加热步骤。MDA Green 可以与MDA反应，以方便的96孔或384孔板形式增强绿色荧光信号。与其他商用MDA分析试剂盒不同，该分析功能强大且对MDA具有特异性，几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法法丙二醇（MDA）定量试剂盒。
适用仪器
| 荧光酶标仪 |
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| 激发： |
480nm |
| 发射： |
555nm |
| cutoff： |
530nm |
| 推荐孔板： |
黑色透明 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
- 准备MDA标准品或测试样品（50 µL）
- 添加MDA Green 工作溶液（50 µL）
- 在室温下孵育6分钟
- 添加MDA终止液（50 µL）
- 检测Ex / Em = 480/555 nm的荧光强度
溶液制备
储备溶液
1. MDA标准溶液（100 mM）：将100µL ddH2O加入MDA标准溶液（组分C）的样品瓶中，制成100 mM MDA标准溶液。
2. MDA Green 储备溶液（250 X）：将20µL DMSO（组分E）添加到一小瓶MDA Green （组分A）中，制成MDA Green 储备溶液。注意：制备后，所有储备溶液应储存在-20oC下。避免重复冻融循环。
标准溶液
将10 µL 100 mM MDA标准溶液加到990 µL MDA分析缓冲液（组分B）中，以生成1000 µM MDA标准溶液（MDA7）。取1000 µM MDA标准溶液（MDA7）并进行1：3连续稀释，以得到带有MDA分析缓冲液（组分B）的系列稀释MDA标准溶液（MDA6- MDA1）。
工作溶液
MDA Green 工作溶液：将20µL 250 X MDA Green 储备溶液添加到5 mL MDA分析缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MDA Green 工作溶液。 注意：该MDA Green 工作溶液应在实验前准备好，并避免光照。
样品分析
表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,6.25至400μM），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL |
BL |
TS |
TS |
| MDA1 |
MDA1 |
… |
… |
| MDA2 |
MDA2 |
… |
… |
| MDA3 |
MDA3 |
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| MDA4 |
MDA4 |
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| MDA5 |
MDA5 |
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| MDA6 |
MDA6 |
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| MDA7 |
MDA7 |
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表2.每个孔的试剂组成
| 孔 |
容积 |
试剂 |
| MDA1-MDA7 |
50ul |
连续稀释（6.25至400μM） |
| BL |
50ul |
稀释缓冲液（组分B） |
| TS |
50ul |
测试样品 |
- 根据表1和2中提供的布局，准备MDA标准品（MDA），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。
- 将50 µL MDA Green 工作溶液添加到MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。对于384孔板，请在每个孔中添加25 µL MDA Green™工作溶液。
- 在避光条件下，于室温下孵育反应5-6分钟。
- 向反应的每个孔中加入50 µL MDA终止溶液（组分D）。对于384孔板，向每个孔中添加25 µL MDA终止液（组分D）。
- 使用荧光板读数器在Ex / Em = 480/555 nm（截止= 530 nm）处检测荧光强度。
参考文献
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Journal: Int Immunopharmacol (2018): 113-118
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说明书
Amplite 荧光法法丙二醇（MDA）定量试剂盒.pdf
