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钙离子荧光探针Fura Red, AM 货号21046-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura Red, AM

钙离子荧光探针Fura Red, AM

钙离子荧光探针Fura Red, AM 货号21046 货号 21046 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 4584
Ex (nm) 435 Em (nm) 639
分子量 1088.99 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：21046

产品名称：钙离子荧光探针Fura Red, AM

CAS：149732-62-7

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：1088.99

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：458

发射波长(nm)：597

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 435，470nm
发射： 630，650nm
cutoff: Ex/Em = 435/630, cutoff 610. Ex/Em = 470/650, cut off 630
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

 

产品介绍

钙离子荧光探针Fura Red, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Fura Red是一种可见光可激发的fura-2类似物，当与单激发，绿色荧光钙指示剂一起使用时，通过显微光度法，成像或流式细胞术为单细胞中的钙离子比率测量提供了独特的可能性。 Fura Red AM是用于非侵入性细胞内负载的Fura Red的细胞渗透型。 Fura Red AM可以同时装入Fluo-3 AM，Fluo-8 AM或Cal-520 AM的细胞中。 组合两种钙染料的优点是可以使用具有较长激发波长的染料。 与使用用UV或近紫外光（例如Fura-2）激发的比率染料相比，这通常对细胞造成的伤害更小，因为可见光波长的光具有较低的光毒性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura Red, AM。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

参考文献

Ratiometric analysis of fura red by flow cytometry: a technique for monitoring intracellular calcium flux in primary cell subsets
Authors: Wendt ER, Ferry H, Greaves DR, Keshav S.
Journal: PLoS One (2015): e0119532

A flow cytometric comparison of Indo-1 to fluo-3 and Fura Red excited with low power lasers for detecting Ca(2+) flux
Authors: Bailey S, Macardle PJ.
Journal: J Immunol Methods (2006): 220

Use of co-loaded Fluo-3 and Fura Red fluorescent indicators for studying the cytosolic Ca(2+)concentrations distribution in living plant tissue
Authors: Walczysko P, Wagner E, Albrechtova JT.
Journal: Cell Calcium (2000): 23

[Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red]
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Calcium transient alternans in blood-perfused ischemic hearts: observations with fluorescent indicator fura red
Authors: Wu Y, Clusin WT.
Journal: Am J Physiol (1997): H2161

Problems associated with using Fura-2 to measure free intracellular calcium concentrations in human red blood cells
Authors: Blackwood AM, Sagnella GA, Markandu ND, MacGregor GA.
Journal: J Hum Hypertens (1997): 601

IgG-induced Ca2+ oscillations in differentiated U937 cells; a study using laser scanning confocal microscopy and co-loaded fluo-3 and fura-red fluorescent probes
Authors: Floto RA, Mahaut-Smith MP, Somasundaram B, Allen JM.
Journal: Cell Calcium (1995): 377

Improved sensitivity in flow cytometric intracellular ionized calcium measurement using fluo-3/Fura Red fluorescence ratios
Authors: Novak EJ, Rabinovitch PS.
Journal: Cytometry (1994): 135

Localization of calcium entry through calcium channels in olfactory receptor neurones using a laser scanning microscope and the calcium indicator dyes Fluo-3 and Fura-Red
Authors: Schild D, Jung A, Schultens HA.
Journal: Cell Calcium (1994): 341

The distribution of intracellular calcium chelator (fura-2) in a population of intact human red cells
Authors: Lew VL, Etzion Z, Bookchin RM, daCosta R, Vaananen H, Sassaroli M, Eisinger J.
Journal: Biochim Biophys Acta (1993): 152

说明书
钙离子荧光探针Fura Red, AM.pdf

Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯(混合异构体) CAS 216972-99-5 货号475-AAT Bioquest荧光染料

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Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯(混合异构体) CAS 216972-99-5

Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯(混合异构体) CAS 216972-99-5

Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯(混合异构体) CAS 216972-99-5 货号475 货号 475 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 2604
Ex (nm) 586 Em (nm) 603
分子量 816.94 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：475

产品名称：Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯(混合异构体)

CAS：216972-99-5

规格：5mg

储存条件：-15℃，避光干燥

保质期：12个月

 

物理化学光谱特性

分子量：816.94

溶剂：DMSO

Ex(nm):585

Em(nm):602

 

产品介绍

Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光染料，Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯（胺反应性德克萨斯红®-X，琥珀酰亚胺酯）是Texas Red的优良替代品。 它具有与Texas Red相同的光谱特性，但它更容易与生物膜结合，具有更高的共轭产率。 它可用于产生具有激发/发射最大值~595 / 615nm的亮红色荧光生物共轭物。与TexasRed®相比，该活性染料在荧光团和琥珀酰亚胺酯基团之间含有另外的七个原子氨基己酰基间隔基（“X”）。 该间隔基有助于将荧光团与其连接点分离，潜在地减少荧光团与其缀合的生物分子的相互作用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯。 

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参考文献

A comparative study of the potential of solid triglyceride nanostructures coated with chitosan or poly(ethylene glycol) as carriers for oral calcitonin delivery
Authors: Garcia-Fuentes M, Prego C, Torres D, Alonso MJ.
Journal: Eur J Pharm Sci (2005): 133

Bead-based cellular analysis, sorting and multiplexing
Authors: Sanchez-Martin RM, Muzerelle M, Chitkul N, How SE, Mittoo S, Bradley M.
Journal: Chembiochem (2005): 1341

Budding dynamics of multicomponent tubular vesicles
Authors: Li L, Liang X, Lin M, Qiu F, Yang Y.
Journal: J Am Chem Soc (2005): 17996

Emission characteristics of fluorescent labels with respect to temperature changes and subsequent effects on DNA microchip studies
Authors: Liu WT, Wu JH, Li ES, Selamat ES.
Journal: Appl Environ Microbiol (2005): 6453

Fluorescence properties of fluorescein, tetramethylrhodamine and Texas Red linked to a DNA aptamer
Authors: Unruh JR, Gokulrangan G, Wilson GS, Johnson CK.
Journal: Photochem Photobiol (2005): 682

Orientational dynamics and dye-DNA interactions in a dye-labeled DNA aptamer
Authors: Unruh JR, Gokulrangan G, Lushington GH, Johnson CK, Wilson GS.
Journal: Biophys J (2005): 3455

Purification and fluorescent labeling of the human serotonin transporter
Authors: Rasmussen SG, Gether U.
Journal: Biochemistry (2005): 3494

Transepithelial transport of fluorescent p-glycoprotein and MRP2 substrates by insect Malpighian tubules: confocal microscopic analysis of secreted fluid droplets
Authors: Leader JP, O’Donnell MJ.
Journal: J Exp Biol (2005): 4363

Measurement of normal and anomalous diffusion of dyes within protein structures fabricated via multiphoton excited cross-linking
Authors: Basu S, Wolgemuth CW, Campagnola PJ.
Journal: Biomacromolecules (2004): 2347

Multistep fluorescence resonance energy transfer in sequential chromophore array constructed on oligo-DNA assemblies
Authors: Ohya Y, Yabuki K, Hashimoto M, Nakajima A, Ouchi T.
Journal: Bioconjug Chem (2003): 1057

 

相关产品

产品名称 货号
Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯 Cat#475

说明书
Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯(混合异构体) CAS 216972-99-5.pdf

Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷*红色荧光* 货号14035-AAT Bioquest荧光染料

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Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷*红色荧光*

Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷*红色荧光*

Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷*红色荧光* 货号14035 货号 14035 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2472
Ex (nm) Em (nm)
分子量 591.63 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Xite Red β-D-半乳糖吡喃糖苷是β-半乳糖苷酶（β-gal）的荧光底物。与现有的β-半乳糖苷酶底物（例如，常用的FDG）相比，它具有更好的细胞通透性。Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷很容易进入细胞，并被β-gal裂解，从而产生强荧光产品Xite Red。强烈荧光的Xite Red可以很好地保留在细胞中，从而易于通过流式细胞仪和荧光显微镜进行检测。Xite Red β-D-半乳糖吡喃糖苷提供了一种简单而灵敏的工具来检测β-半乳糖苷酶的活性。Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷可以作为检测细胞中细胞衰老的工具，因为β-gal已被确定为细胞衰老的可靠标记。此外，Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷是可固定的。Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷产生的红色荧光可以很容易地与其他颜色的荧光探针（例如DAPI或GFP）结合使用，以进行多色荧光分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Xite Red β-D-半乳糖吡喃糖苷。 

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 575/26 nm滤波片
通道： PE滤波片组
荧光显微镜  
激发： Cy3/TRITC滤波片
发射： Cy3/TRITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明

 

产品说明书

样品实验方案

以下是我们推荐的方案，仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。

简要概述

  1. 根据需要处理样品
  2. 准备Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷工作溶液并将其添加到样品中
  3. 在37°C下孵育样品15至45分钟
  4. 使用带有575/26 nm滤光片的流式细胞仪（PE通道）或带有Cy3/TRITC滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度 

 

溶液配制

储备溶液配制

Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷储备溶液：在Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷中加入适量的DMSO，制成2-5 mM Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷原液。注意：将未使用的Xite Red β D-吡喃半乳糖苷原液以等份储存在-20°C下。
 
工作溶液配制
Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷工作溶液：在自备的缓冲液中制备1-20 µM Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷工作溶液。注意1：Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷工作溶液应立即使用。注意2：Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷的浓度应针对不同的细胞类型和条件进行优化。

 

操作步骤

  1. 根据需要处理样品。
  2. 处理并用自备的缓冲液（例如DPBS）洗涤细胞。
  3. 加入Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷工作溶液15-45分钟，然后在37°C的培养箱中培养样品。
    注意：孵育的最佳时间需要通过实验确定。
  4. 取出工作溶液并用自备的缓冲液洗涤细胞。
  5. 将细胞重悬在自备的缓冲液中，并使用流式细胞仪使用575/26 nm滤光片（PE通道）或带有Cy3/TRITC滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。

 

图示

 

 

Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷*红色荧光* 货号14035

图1.用Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷测量β-gal的表达。将9L-LacZ细胞（过度表达β-gal的细胞）与Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷在37°C下孵育30分钟。使用NovoCyte流式细胞仪（ACEA Biosciences）通过PE通道获取信号。

 

 

参考文献

Acridinium Benzoates for Ratiometric Fluorescence Imaging.
Authors: Wen, Min and Wang, Xijing and Wang, Ting and Sun, Yan and Fan, Mengting and Li, Min and Zhu, Junru and Zhang, Dazhi and Cui, Xiaoyan and Shan, Yongkui
Journal: Chemistry (Weinheim an der Bergstrasse, Germany) (2020): 3247-3251

Fluorescence Signal Amplification by Using β-Galactosidase for Flow Cytometry; Advantages of an Endogenous Activity-Free Enzyme.
Authors: Nobori, Takanobu and Kawamura, Masumi and Yoshida, Ryosuke and Joichi, Taisei and Kamino, Kenta and Kishimura, Akihiro and Baba, Eishi and Mori, Takeshi and Katayama, Yoshiki
Journal: Analytical chemistry (2020): 3069-3076

Amphiphilic triphenylamine-benzothiadiazole dyes: preparation, fluorescence and aggregation behavior, and enzyme fluorescence detection.
Authors: Ishi-I, Tsutomu and Kawai, Kazuki and Shirai, Yuya and Kitahara, Ikumi and Hagiwara, Yoshinori
Journal: Photochemical & photobiological sciences : Official journal of the European Photochemistry Association and the European Society for Photobiology (2019): 1447-1460

Macrotheranostic Probe with Disease-Activated Near-Infrared Fluorescence, Photoacoustic, and Photothermal Signals for Imaging-Guided Therapy.
Authors: Zhen, Xu and Zhang, Jianjian and Huang, Jiaguo and Xie, Chen and Miao, Qingqing and Pu, Kanyi
Journal: Angewandte Chemie (International ed. in English) (2018): 7804-7808

Impact of plasma protein binding on cargo release by thermosensitive liposomes probed by fluorescence correlation spectroscopy.
Authors: Mittag, Judith J and Kneidl, Barbara and Preiβ, Tobias and Hossann, Martin and Winter, Gerhard and Wuttke, Stefan and Engelke, Hanna and Rädler, Joachim O
Journal: European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics : official journal of Arbeitsgemeinschaft fur Pharmazeutische Verfahrenstechnik e.V (2017): 215-223

Isolation and Fluorescence-Activated Cell Sorting of Mouse Keratinocytes Expressing β-Galactosidase.
Authors: Kasper, Maria and Toftgård, Rune and Jaks, Viljar
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2016): 123-36

Small quinolinium-based enzymatic probes via blue-to-red ratiometric fluorescence.
Authors: Wang, Pan and Du, Jiajun and Liu, Huijing and Bi, Guoqiang and Zhang, Guoqing
Journal: The Analyst (2016): 1483-7

Sensitive β-galactosidase-targeting fluorescence probe for visualizing small peritoneal metastatic tumours in vivo.
Authors: Asanuma, Daisuke and Sakabe, Masayo and Kamiya, Mako and Yamamoto, Kyoko and Hiratake, Jun and Ogawa, Mikako and Kosaka, Nobuyuki and Choyke, Peter L and Nagano, Tetsuo and Kobayashi, Hisataka and Urano, Yasuteru
Journal: Nature communications (2015): 6463

A fluorescence-based method coupled with Disruptor filtration for rapid detection of F + RNA phages.
Authors: Yang, Y and Griffiths, M W
Journal: Letters in applied microbiology (2014): 177-83

Quantitative Fluorescence Assays Using a Self-Powered Paper-Based Microfluidic Device and a Camera-Equipped Cellular Phone.
Authors: Thom, Nicole K and Lewis, Gregory G and Yeung, Kimy and Phillips, Scott T
Journal: RSC advances (2014): 1334-1340

说明书
Xite Red β-D-吡喃半乳糖苷*红色荧光*.pdf

mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯（停产） 货号1190-AAT Bioquest荧光染料

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mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯（停产）

mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯（停产）

mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯（停产） 货号1190 货号 1190 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 0
Ex (nm) 680 Em (nm) 695
分子量 956.40 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的最佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：当使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺如Tris和甘氨酸和硫醇化合物的缓冲液。在进行染料结合之前，还必须除去广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，对于特定的标记反应，可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯。 

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产品说明书

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。

注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
mFluor Red 700 酸 Cat#1146
mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯 Cat#1191

说明书
mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯（停产）.pdf

钙离子荧光探针Fura Red,钾盐 货号21045-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura Red,钾盐

钙离子荧光探针Fura Red,钾盐

钙离子荧光探针Fura Red,钾盐 货号21045 货号 21045 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 4584
Ex (nm) 435 Em (nm) 639
分子量 808.98 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Fura Red是可见光可激发的fura-2类似物，当与单一激发的绿色荧光钙指示剂一起使用时，通过显微光度法，成像或流式细胞术，可用于比率测量单细胞中的钙离子，提供了独特的可能性。Fura Red AM是用于非侵入性细胞内装载的Fura Red的细胞渗透性版本。Fura Red AM可以使用Fluo-3 AM，Fluo-8 AM或Cal-520 AM同时加载到单元中。结合两种钙染料的优点是可以使用具有更长激发波长的染料。与使用比例或紫外线或近紫外线（例如Fura-2）激发的比例染料相比，这通常对细胞造成的伤害较小，因为可见波长的光的光毒性较小。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Ratiometric analysis of fura red by flow cytometry: a technique for monitoring intracellular calcium flux in primary cell subsets
Authors: Wendt ER, Ferry H, Greaves DR, Keshav S.
Journal: PLoS One (2015): e0119532

A flow cytometric comparison of Indo-1 to fluo-3 and Fura Red excited with low power lasers for detecting Ca(2+) flux
Authors: Bailey S, Macardle PJ.
Journal: J Immunol Methods (2006): 220

Use of co-loaded Fluo-3 and Fura Red fluorescent indicators for studying the cytosolic Ca(2+)concentrations distribution in living plant tissue
Authors: Walczysko P, Wagner E, Albrechtova JT.
Journal: Cell Calcium (2000): 23

[Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red]
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Calcium transient alternans in blood-perfused ischemic hearts: observations with fluorescent indicator fura red
Authors: Wu Y, Clusin WT.
Journal: Am J Physiol (1997): H2161

Problems associated with using Fura-2 to measure free intracellular calcium concentrations in human red blood cells
Authors: Blackwood AM, Sagnella GA, Markandu ND, MacGregor GA.
Journal: J Hum Hypertens (1997): 601

IgG-induced Ca2+ oscillations in differentiated U937 cells; a study using laser scanning confocal microscopy and co-loaded fluo-3 and fura-red fluorescent probes
Authors: Floto RA, Mahaut-Smith MP, Somasundaram B, Allen JM.
Journal: Cell Calcium (1995): 377

Improved sensitivity in flow cytometric intracellular ionized calcium measurement using fluo-3/Fura Red fluorescence ratios
Authors: Novak EJ, Rabinovitch PS.
Journal: Cytometry (1994): 135

Localization of calcium entry through calcium channels in olfactory receptor neurones using a laser scanning microscope and the calcium indicator dyes Fluo-3 and Fura-Red
Authors: Schild D, Jung A, Schultens HA.
Journal: Cell Calcium (1994): 341

The distribution of intracellular calcium chelator (fura-2) in a population of intact human red cells
Authors: Lew VL, Etzion Z, Bookchin RM, daCosta R, Vaananen H, Sassaroli M, Eisinger J.
Journal: Biochim Biophys Acta (1993): 152

说明书
钙离子荧光探针Fura Red,钾盐.pdf