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核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE 货号471-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE

核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE

核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE 货号471 货号 471 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 1944
Ex (nm) 558 Em (nm) 575
分子量 766.88 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：471

产品名称：核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE

规格：10mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：766.88

溶剂：DMSO

激发波长（nm）：557

发射波长（nm）：574

 

产品介绍

核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE是美国AAT Bioquest生产的核酸染料。虽然Lissamine罗丹明B氯化物是最常用的磺酰氯标记试剂之一，但它在水中非常不稳定。即使在无水DMF中，Lissamine罗丹明B氯化物也会产生非常复杂的反应混合物。它不加区别地与硫醇，醇，酚，脂族胺和芳香胺反应。 LRB Red 是一种琥珀酰亚胺酯，其光谱特性与Lissamine罗丹明B氯化物相同。 LRB Red 是丽丝胺罗丹明B氯化物的优质替代品。 LRB Red 仅与脂肪胺（如氨基酸，多肽和蛋白质）反应，生成极稳定的亮红色荧光缀合物。与Lissamine罗丹明B氯化物相比，LRB Red 具有更高的标记效率，更重要的是，它反应所得缀合物更容易被纯化。我们强烈建议您考虑使用LRB Red 替代Lissamine Rhodamine B chloride用于标记肽和寡核苷酸。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE。 

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参考文献

Entry of 6-Residue Antimicrobial Peptide Derived from Lactoferricin B into Single Vesicles and E. coli Cells without Damaging their Membranes
Authors: Md Moniruzzaman, Md Zahidul Islam, Sabrina Sharmin, Hideo Dohra, Masahito Yamazaki
Journal: Biochemistry (2017)

说明书
核酸多肽蛋白标记 LRB Red SE.pdf

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯 货号1191-AAT Bioquest荧光染料

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mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯 货号1191 货号 1191 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 629 Em (nm) 767
分子量 1328.65 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的最佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：当使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺如Tris和甘氨酸和硫醇化合物的缓冲液。在进行染料结合之前，还必须除去广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，对于特定的标记反应，可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯。 

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点击查看实验方案

产品说明书

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。

注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

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产品名称 货号
mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯 Cat#1190
mFluor Red 780 胺 Cat#1210
mFluor Red 780 酸 Cat#1147

说明书
mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯.pdf

Texas Red 尸胺 货号482-AAT Bioquest荧光染料

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Texas Red 尸胺

Texas Red 尸胺

Texas Red 尸胺 货号482 货号 482 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1944
Ex (nm) 586 Em (nm) 603
分子量 804.89 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：482

产品名称：Texas Red 尸胺

规格：5mg

储存条件：-15℃，避光干燥

保质期：12个月

 

物理化学光谱特性

分子量：804.89

溶剂：DMSO

Ex(nm):585

Em(nm):602

 

产品介绍

Texas Red 尸胺是美国AAT Bioquest生产的荧光染料，磺基罗丹明101尸胺(也被称为Texas Red(TR) 尸胺) 是使用的最多的基于杂环标记的TR试剂。它与羰基化合物（例如乙醛、酮类和酸）反应产生发强烈红色荧光的偶联物。通过胺基化反应，它广泛地用于标记糖蛋白和碳水化合物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Texas Red 尸胺。 

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参考文献

A comparative study of the potential of solid triglyceride nanostructures coated with chitosan or poly(ethylene glycol) as carriers for oral calcitonin delivery
Authors: Garcia-Fuentes M, Prego C, Torres D, Alonso MJ.
Journal: Eur J Pharm Sci (2005): 133

Bead-based cellular analysis, sorting and multiplexing
Authors: Sanchez-Martin RM, Muzerelle M, Chitkul N, How SE, Mittoo S, Bradley M.
Journal: Chembiochem (2005): 1341

Budding dynamics of multicomponent tubular vesicles
Authors: Li L, Liang X, Lin M, Qiu F, Yang Y.
Journal: J Am Chem Soc (2005): 17996

Emission characteristics of fluorescent labels with respect to temperature changes and subsequent effects on DNA microchip studies
Authors: Liu WT, Wu JH, Li ES, Selamat ES.
Journal: Appl Environ Microbiol (2005): 6453

Fluorescence properties of fluorescein, tetramethylrhodamine and Texas Red linked to a DNA aptamer
Authors: Unruh JR, Gokulrangan G, Wilson GS, Johnson CK.
Journal: Photochem Photobiol (2005): 682

Orientational dynamics and dye-DNA interactions in a dye-labeled DNA aptamer
Authors: Unruh JR, Gokulrangan G, Lushington GH, Johnson CK, Wilson GS.
Journal: Biophys J (2005): 3455

Purification and fluorescent labeling of the human serotonin transporter
Authors: Rasmussen SG, Gether U.
Journal: Biochemistry (2005): 3494

Transepithelial transport of fluorescent p-glycoprotein and MRP2 substrates by insect Malpighian tubules: confocal microscopic analysis of secreted fluid droplets
Authors: Leader JP, O’Donnell MJ.
Journal: J Exp Biol (2005): 4363

Measurement of normal and anomalous diffusion of dyes within protein structures fabricated via multiphoton excited cross-linking
Authors: Basu S, Wolgemuth CW, Campagnola PJ.
Journal: Biomacromolecules (2004): 2347

Multistep fluorescence resonance energy transfer in sequential chromophore array constructed on oligo-DNA assemblies
Authors: Ohya Y, Yabuki K, Hashimoto M, Nakajima A, Ouchi T.
Journal: Bioconjug Chem (2003): 1057

 

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Texas Red 酰肼 Cat#481
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说明书
Texas Red 尸胺.pdf

MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物 货号13522-AAT Bioquest荧光染料

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MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物

MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物

MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物 货号13522 货号 13522 存储条件
规格 100 Tests 价格 1272
Ex (nm) 545 Em (nm) 572
分子量 ~2000 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：13522

产品名称：MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物

规格：100 Tests

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：~2000

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：495

发射波长(nm)：572

 

产品介绍

基质金属蛋白酶（MMPs）是一个锌依赖性内肽酶家族，在细胞外基质中发挥作用。这些酶在负责结缔组织的分解，在骨重建、月经周期和组织损伤修复中起重要作用。虽然MMPs在某些病理过程中的确切作用尚不清楚，但MMPs似乎在关节炎以及肿瘤的侵袭和转移中起着关键作用。基质金属蛋白酶往往有多种基质，大多数家族成员都有能力降解不同类型的胶原蛋白以及弹性蛋白、明胶和纤连蛋白。很难找到对单一MMP酶有选择性的底物。该FRET底物被设计用于检测MMP酶的一般活性。当使用纯化的MMP酶时，它也可用于筛选MMP抑制剂。该FRET底物基于我们的tf3/TQ3，MMP Green FRET由于tf3/TQ3 FRET对分离，FRET肽底物增加。荧光增强与MMP酶活性成正比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的MMP Green 基质金属蛋白酶绿色荧光底物。 

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图示

MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物 货号13522

图1.内部淬火的FRET肽底物被蛋白酶消化以产生高荧光肽片段。荧光增强与蛋白酶活性成正比。

 

参考文献

Zinc ions regulate opening of tight junction favouring efflux of macromolecules via the GSK3β/snail-mediated pathway
Authors: Xiao, Ruyue and Yuan, Lan and He, Weijiang and Yang, Xiaoda
Journal: Metallomics (2018)

Connexin 43 Upregulation by Dioscin Inhibits Melanoma Progression via Suppressing Malignancy and Inducing M1 Polarization
Authors: Kou, Yu and Ji, Liyan and Wang, Haojia and Wang, Wensheng and Zheng, Hongming and Zou, Juan and Liu, Linxin and Qi, Xiaoxiao and Liu, Zhongqiu and Du, Biaoyan and others
Journal: International Journal of Cancer (2017)

DACT2, an epigenetic stimulator, exerts dual efficacy for colorectal cancer prevention and treatment
Authors: Lu, Linlin and Wang, Ying and Ou, Rilan and Feng, Qian and Ji, Liyan and Zheng, Hongming and Guo, Yue and Qi, Xiaoxiao and Kong, Ah-Ng Tony and Liu, Zhongqiu
Journal: Pharmacological research (2017)

Probing Cell Adhesion Profiles with a Microscale Adhesive Choice Assay
Authors: Kittur, Harsha and Tay, Andy and Hua, Avery and Yu, Min and Di Carlo, Dino
Journal: Biophysical Journal (2017): 1858–1867

Inhibition of BET bromodomain attenuates angiotensin II induced abdominal aortic aneurysm in ApoE-/- mice
Authors: Duan, Qiong and Mao, Xiaoxiao and Liao, Chaonan and Zhou, Haoyang and Sun, Zelin and Deng, Xu and Hu, Qiuning and Qi, Jun and Zhang, Guogang and Huang, He and others
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 428–432

Tissue inhibitor of metalloproteinase 1 influences vascular adaptations to chronic alterations in blood flow
Authors: M and el, Erin R and Uchida, Cass and ra and Nwadozi, Emmanuel and Makki, Armin and Haas, Tara L
Journal: Journal of Cellular Physiology (2016)

β-adrenoceptors are upregulated in human melanoma and their activation releases pro-tumorigenic cytokines and metalloproteases in melanoma cell lines
Authors: Moretti, Silvia and Massi, Daniela and Farini, Valentina and Baroni, Gianna and Parri, Matteo and Innocenti, Stefania and Cecchi, Roberto and Chiarugi, Paola
Journal: Laboratory Investigation (2013): 279–290

Matrix Remodeling Maintains Embryonic Stem Cell Self-Renewal by Activating Stat3
Authors: Przybyla, Laralynne M and Theunissen, Thorold W and Jaenisch, Rudolf and Voldman, Joel
Journal: Stem Cells (2013): 1097–1106

Identification and functional validation of CDH11, PCSK6 and SH3GL3 as novel glioma invasion-associated candidate genes
Authors: Delic, S and Lottmann, N and Jetschke, K and Reifenberger, G and Riemenschneider, Markus J
Journal: Neuropathology and applied neurobiology (2012): 201–212

EphA2 induces metastatic growth regulating amoeboid motility and clonogenic potential in prostate carcinoma cells
Authors: Taddei, Maria Letizia and Parri, Matteo and Angelucci, Adriano and Bianchini, Francesca and Marconi, Chiara and Giannoni, Elisa and Raugei, Giovanni and Bologna, Mauro and Calorini, Lido and Chiarugi, Paola
Journal: Molecular Cancer Research (2011): 149–160

说明书
MMP Red 基质金属蛋白酶红色荧光底物.pdf

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯 货号1191-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯 货号1191 货号 1191 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 629 Em (nm) 767
分子量 1328.65 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的最佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：当使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺如Tris和甘氨酸和硫醇化合物的缓冲液。在进行染料结合之前，还必须除去广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，对于特定的标记反应，可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯。 

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产品说明书

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。

注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

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mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯 Cat#1190
mFluor Red 780 胺 Cat#1210
mFluor Red 780 酸 Cat#1147

说明书
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