trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L) 货号16756-AAT Bioquest荧光染料

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trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)

trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)

trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)    货号16756 货号 16756 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 25836
Ex (nm) 333 Em (nm) 544
分子量 ~150000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:16756

产品名称:trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

溶剂:水

激发波长(nm):330

发射波长(nm):544

 

产品介绍

trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗,许多生物分子自身就具有荧光,它们广泛的纯在于生物器官里,如细胞、浆液和其他生物制品中。因此传统的敏感荧光素存在严重的局限性和不足,在进行生物监测分析时,生物分子的自发荧光形成很高的背景干扰。解决的方法是用长寿命的荧光素轭合物它具有高的时间分辨率(延长激发波谱和发射波普的检测)最大程度的减少背景荧光干扰。我们的 trFluor Eu荧光探针具有高灵敏度的能够做到时间分辨检测。在和传统的荧光探针相比(例如Alexa的Fluro和花箐染料), trFluor Eu 荧光探针具有较大的斯托克斯位移和极其长的发射光谱半衰期。同另外的TRF化合物相比我们的 trFluor Eu荧光探针具有较高的稳定性和很高的量子产率,而且可以和生物分子相连接。这一 trFluor Eu  山羊-老鼠 IgG (H+L) 轭合物在连接生物素酰化的第一抗体时,通常用作第二步简接免疫荧光试剂。在以生物素莲亲和素为基础的生物学流式测试或者分析方面他是一个非常有用的工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的trFluor Tb羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)。 

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参考文献

Development of a time-resolved fluorescence resonance energy transfer assay for cyclin-dependent kinase 4 and identification of its ATP-noncompetitive inhibitors
Authors: Lo MC, Ngo R, Dai K, Li C, Liang L, Lee J, Emkey R, Eksterowicz J, Ventura M, Young SW, Xiao SH.
Journal: Anal Biochem (2012): 368

Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer as a Versatile Tool in the Development of Homogeneous Cellular Kinase Assays
Authors: Saville L, Spais C, Mason JL, Albom MS, Murthy S, Meyer SL, Ator MA, Angeles TS, Husten J.
Journal: Assay Drug Dev Technol. (2012)

A homogeneous single-label time-resolved fluorescence cAMP assay
Authors: Martikkala E, Rozwandowicz-Jansen A, Hanninen P, Petaja-Repo U, Harma H.
Journal: J Biomol Screen (2011): 356

Homogeneous time-resolved fluorescence-based assay to screen for ligands targeting the growth hormone secretagogue receptor type 1a
Authors: Leyris JP, Roux T, Trinquet E, Verdie P, Fehrentz JA, Oueslati N, Douzon S, Bourrier E, Lamarque L, Gagne D, Galleyrand JC, M’Kadmi C, Martinez J, Mary S, Baneres JL, Marie J.
Journal: Anal Biochem (2011): 253

Oligomerization of the serotonin(1A) receptor in live cells: a time-resolved fluorescence anisotropy approach
Authors: Paila YD, Kombrabail M, Krishnamoorthy G, Chattopadhyay A.
Journal: J Phys Chem B (2011): 11439

Time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) to analyze the disruption of EGFR/HER2 dimers: a new method to evaluate the efficiency of targeted therapy using monoclonal antibodies
Authors: Gaborit N, Larbouret C, Vallaghe J, Peyrusson F, Bascoul-Mollevi C, Crapez E, Azria D, Chardes T, Poul MA, Mathis G, Bazin H, Pelegrin A.
Journal: J Biol Chem (2011): 11337

A time-resolved fluorescence-resonance energy transfer assay for identifying inhibitors of hepatitis C virus core dimerization
Authors: Kota S, Scampavia L, Spicer T, Beeler AB, Takahashi V, Snyder JK, Porco JA, Hodder P, Strosberg AD.
Journal: Assay Drug Dev Technol (2010): 96

Ligand regulation of the quaternary organization of cell surface M3 muscarinic acetylcholine receptors analyzed by fluorescence resonance energy transfer (FRET) imaging and homogeneous time-resolved FRET
Authors: Alvarez-Curto E, Ward RJ, Pediani JD, Milligan G.
Journal: J Biol Chem (2010): 23318

Steady-state and time-resolved fluorescence quenching with transition metal ions as short-distance probes for protein conformation
Authors: Posokhov YO, Kyrychenko A, Ladokhin AS.
Journal: Anal Biochem (2010): 284

Time-resolved FRET fluorescence spectroscopy of visible fluorescent protein pairs
Authors: Visser AJ, Laptenok SP, Visser NV, van Hoek A, Birch DJ, Brochon JC, Borst JW.
Journal: Eur Biophys J (2010): 241

 

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说明书
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trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产) 货号1443-AAT Bioquest荧光染料

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trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产)

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产)

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯(停产)    货号1443 货号 1443 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 0
Ex (nm) 333 Em (nm) 544
分子量 1226.05 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

trFluor Tb琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,存在于细胞,血清或其他生物流体中的许多生物化合物是天然荧光的,因此使用常规的快速荧光团导致测定灵敏度的严重限制,这是由于待测定的生物分子的自发荧光引起的高背景。使用长寿命荧光团结合时间分辨检测(激发和发射检测之间的延迟)可以最大限度地减少瞬间荧光干扰。我们的trFluor Eu探针可为需要高灵敏度的分析启用时间分辨荧光检测(TRF)。与更传统的荧光团如Alexa Fluor或花青染料相比,这些trFluor Eu探针具有较大的斯托克斯位移和极长的发射半衰期。与其他TRF化合物相比,我们的trFluor Eu探针具有相对较高的稳定性,高排放产量和与生物分子相关的能力。此外,我们的trFluor Eu探针在与抗体等生物聚合物结合时对荧光猝灭不敏感。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的trFluor Tb琥珀酰亚胺酯。 

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产品说明书

样本标记步骤

注意:该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与trFluor Eu SE的缀合物开发的。请根据您的具体实验进行调整。

 

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100L反应缓冲液(例如,1M碳酸钠溶液或1M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900L目标蛋白质溶液(例如抗体,蛋白质浓度> 2mg / ml,如果可能)混合,得到1 mL蛋白标记储备液。

注意1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。 如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注意2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。 如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注意3:用牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的不纯抗体或抗体不能很好地标记。 叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。 可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得最佳标记结果。

注意4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率显着降低。 为获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到小瓶trFluor?Eu SE中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合之前准备染料储备溶液(溶液B),需及时使用。染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。避免冻融循环。

 

3.确定最佳染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。 蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比率的蛋白质结合物会降低灵敏度。 我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。 通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

 

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。 蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。 假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行结合反应(见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1; 分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比例(DOS)(见下文)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定最佳的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1在有效摇动下,将适量的染料储备溶液(溶液B)加入到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中。

注意:溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。 如果跳过步骤3,我们建议使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接来自步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3一旦样品在顶部树脂表面下方运行,加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4将更多PBS(pH 7.2-7.4)加入所需样品中以完成柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注意1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注意2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥(见说明书)。

 

参考文献

Development of a time-resolved fluorescence resonance energy transfer assay for cyclin-dependent kinase 4 and identification of its ATP-noncompetitive inhibitors
Authors: Lo MC, Ngo R, Dai K, Li C, Liang L, Lee J, Emkey R, Eksterowicz J, Ventura M, Young SW, Xiao SH.
Journal: Anal Biochem (2012): 368

Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer as a Versatile Tool in the Development of Homogeneous Cellular Kinase Assays
Authors: Saville L, Spais C, Mason JL, Albom MS, Murthy S, Meyer SL, Ator MA, Angeles TS, Husten J.
Journal: Assay Drug Dev Technol. (2012)

A homogeneous single-label time-resolved fluorescence cAMP assay
Authors: Martikkala E, Rozwandowicz-Jansen A, Hanninen P, Petaja-Repo U, Harma H.
Journal: J Biomol Screen (2011): 356

Homogeneous time-resolved fluorescence-based assay to screen for ligands targeting the growth hormone secretagogue receptor type 1a
Authors: Leyris JP, Roux T, Trinquet E, Verdie P, Fehrentz JA, Oueslati N, Douzon S, Bourrier E, Lamarque L, Gagne D, Galleyrand JC, M’Kadmi C, Martinez J, Mary S, Baneres JL, Marie J.
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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L) 货号16669-AAT Bioquest荧光染料

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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)    货号16669 货号 16669 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ug 价格 3924
Ex (nm) 333 Em (nm) 544
分子量 ~150000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:16669

产品名称:trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

规格:100 ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

溶剂:水

激发波长(nm):330

发射波长(nm):544

 

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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗,存在于细胞,血清或其他生物流体中的许多生物化合物都是天然荧光的,因此,由于要测定的生物分子的自发荧光引起的高背景,使用常规的快速荧光团会严重限制测定灵敏度。长寿命荧光团与时间分辨检测(激发和发射检测之间的延迟)结合使用,可最大程度地减少即时荧光干扰。我们的trFluor Tb探针可用于需要高灵敏度的分析的时间分辨荧光(TRF)。与更传统的荧光团(例如Alexa Fluor或花青染料)相比,trFluor Tb探针具有较大的斯托克斯位移和极长的发射半衰期。与其他TRF化合物相比,我们的trFluor Tb探针具有相对较高的稳定性,高发射率和与生物分子连接的能力。当与一抗结合使用时,这种trFluor Tb山羊抗兔IgG(H + L)缀合物通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)。 

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Authors: Lo MC, Ngo R, Dai K, Li C, Liang L, Lee J, Emkey R, Eksterowicz J, Ventura M, Young SW, Xiao SH.
Journal: Anal Biochem (2012): 368

Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer as a Versatile Tool in the Development of Homogeneous Cellular Kinase Assays
Authors: Saville L, Spais C, Mason JL, Albom MS, Murthy S, Meyer SL, Ator MA, Angeles TS, Husten J.
Journal: Assay Drug Dev Technol. (2012)

A homogeneous single-label time-resolved fluorescence cAMP assay
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Authors: Leyris JP, Roux T, Trinquet E, Verdie P, Fehrentz JA, Oueslati N, Douzon S, Bourrier E, Lamarque L, Gagne D, Galleyrand JC, M’Kadmi C, Martinez J, Mary S, Baneres JL, Marie J.
Journal: Anal Biochem (2011): 253

Oligomerization of the serotonin(1A) receptor in live cells: a time-resolved fluorescence anisotropy approach
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Journal: J Phys Chem B (2011): 11439

Time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) to analyze the disruption of EGFR/HER2 dimers: a new method to evaluate the efficiency of targeted therapy using monoclonal antibodies
Authors: Gaborit N, Larbouret C, Vallaghe J, Peyrusson F, Bascoul-Mollevi C, Crapez E, Azria D, Chardes T, Poul MA, Mathis G, Bazin H, Pelegrin A.
Journal: J Biol Chem (2011): 11337

A time-resolved fluorescence-resonance energy transfer assay for identifying inhibitors of hepatitis C virus core dimerization
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Ligand regulation of the quaternary organization of cell surface M3 muscarinic acetylcholine receptors analyzed by fluorescence resonance energy transfer (FRET) imaging and homogeneous time-resolved FRET
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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)    货号16821 货号 16821 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
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简要概述

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货号:16821

产品名称:trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

溶剂:水

激发波长(nm):333

发射波长(nm):544

 

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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗,存在于细胞,血清或其他生物流体中的许多生物化合物都是天然荧光的,因此,由于要测定的生物分子的自发荧光引起的高背景,使用常规的快速荧光团会严重限制测定灵敏度。长寿命荧光团与时间分辨检测(激发和发射检测之间的延迟)结合使用,可最大程度地减少即时荧光干扰。我们的trFluor Tb探针可用于需要高灵敏度的分析的时间分辨荧光(TRF)。与更传统的荧光团(例如Alexa Fluor或花青染料)相比,trFluor Tb探针具有较大的斯托克斯位移和极长的发射半衰期。与其他TRF化合物相比,我们的trFluor Tb探针具有相对较高的稳定性,高发射率和与生物分子连接的能力。当与一抗结合使用时,这种trFluor Tb山羊抗兔IgG(H + L)缀合物通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)。 

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Authors: Lo MC, Ngo R, Dai K, Li C, Liang L, Lee J, Emkey R, Eksterowicz J, Ventura M, Young SW, Xiao SH.
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Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer as a Versatile Tool in the Development of Homogeneous Cellular Kinase Assays
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A homogeneous single-label time-resolved fluorescence cAMP assay
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Journal: J Biomol Screen (2011): 356

Homogeneous time-resolved fluorescence-based assay to screen for ligands targeting the growth hormone secretagogue receptor type 1a
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Journal: J Phys Chem B (2011): 11439

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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)*交叉亲和 降低干扰* 货号16848-AAT Bioquest荧光染料

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trFluor Tb羊抗兔免疫球蛋白(H+L)*交叉亲和 降低干扰*

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激发波长(nm):330

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Journal: J Biomol Screen (2011): 356

Homogeneous time-resolved fluorescence-based assay to screen for ligands targeting the growth hormone secretagogue receptor type 1a
Authors: Leyris JP, Roux T, Trinquet E, Verdie P, Fehrentz JA, Oueslati N, Douzon S, Bourrier E, Lamarque L, Gagne D, Galleyrand JC, M’Kadmi C, Martinez J, Mary S, Baneres JL, Marie J.
Journal: Anal Biochem (2011): 253

Oligomerization of the serotonin(1A) receptor in live cells: a time-resolved fluorescence anisotropy approach
Authors: Paila YD, Kombrabail M, Krishnamoorthy G, Chattopadhyay A.
Journal: J Phys Chem B (2011): 11439

Time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) to analyze the disruption of EGFR/HER2 dimers: a new method to evaluate the efficiency of targeted therapy using monoclonal antibodies
Authors: Gaborit N, Larbouret C, Vallaghe J, Peyrusson F, Bascoul-Mollevi C, Crapez E, Azria D, Chardes T, Poul MA, Mathis G, Bazin H, Pelegrin A.
Journal: J Biol Chem (2011): 11337

A time-resolved fluorescence-resonance energy transfer assay for identifying inhibitors of hepatitis C virus core dimerization
Authors: Kota S, Scampavia L, Spicer T, Beeler AB, Takahashi V, Snyder JK, Porco JA, Hodder P, Strosberg AD.
Journal: Assay Drug Dev Technol (2010): 96

Ligand regulation of the quaternary organization of cell surface M3 muscarinic acetylcholine receptors analyzed by fluorescence resonance energy transfer (FRET) imaging and homogeneous time-resolved FRET
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Journal: J Biol Chem (2010): 23318

Steady-state and time-resolved fluorescence quenching with transition metal ions as short-distance probes for protein conformation
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Journal: Anal Biochem (2010): 284

Time-resolved FRET fluorescence spectroscopy of visible fluorescent protein pairs
Authors: Visser AJ, Laptenok SP, Visser NV, van Hoek A, Birch DJ, Brochon JC, Borst JW.
Journal: Eur Biophys J (2010): 241

 

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