Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒 货号12532-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒    货号12532 货号 12532 存储条件 Multiple
规格 100 plates 价格 52308
Ex (nm) 429 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒,β-半乳糖苷酶,β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因,而这其中,萤火虫荧光素酶是功能最多的报告基因。最近,其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升,例如来源于海洋桡脚类的动物高斯基质衍而来的生物发光酶,即高斯荧光素酶。由于高斯荧光素酶受体分子非常小,因此不需要ATP的辅助。高斯荧光素酶是一种分子量为20kDa的蛋白质,在氧分子存在条件下,催化腔肠素氧化形成荧光。Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒使用独特的荧光基质对细胞培养基中荧光素酶活性进行定量检测。我们所提供的荧光产品与高斯荧光素酶反应时,会产生强烈荧光。本试剂盒提供所有必需组分,并且适用于HTS(高通量筛选)研究。本试剂盒灵敏度高,可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒。 

金畔问号:荧光素酶到底该如何检测?

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品(50 µL)
2.加入50 µL高斯荧光素酶工作溶液
3.在室温下孵育10-15分钟
4.检测荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下,避免重复冻融循环。
1.1高斯荧光素酶原液(100X):
将50 µL(对于Cat#12530),0.5 mL(对于Cat#12531)或2.5 mL(对于Cat#12532)反应缓冲液(组分B)转移到1小瓶荧光素酶底物(组分A)中,并充分混合。

 

2.工作溶液

使用1:100稀释因子和检测缓冲液(组分C)稀释100X高斯萤光素荧光素酶的检测储备液,以制备高斯萤光素荧光素酶工作溶液。 注意:高斯荧光素酶工作溶液对光非常敏感,它很不稳定,应放在冰上,并在2小时内使用。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

1.用测试化合物处理细胞(或样品),在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物(96孔板)或5 µL 5X测试化合物(384孔板)。对于空白孔(没有细胞的培养基),添加相应量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37°C,5%CO2培养箱中孵育一段时间(通常为4小时至过夜)。

3.进行高斯荧光素酶检测:将连续稀释的高斯荧光素酶或培养上清液的96孔板(50 µL /孔) 或384孔板(12.5 µL /孔)移液到微量滴定板中,然后与高斯荧光素酶工作溶液混合。

4.在避光的条件下,在室温下孵育平板10至15分钟。

5.用酶标仪读取荧光强度。

 

参考文献

A multifunctional, synthetic Gaussia princeps luciferase reporter for live imaging of Candida albicans infections
Authors: Enjalbert B, Rachini A, Vediyappan G, Pietrella D, Spaccapelo R, Vecchiarelli A, Brown AJ, d’Enfert C.
Journal: Infect Immun (2009): 4847

Cell-free production of Gaussia princeps luciferase–antibody fragment bioconjugates for ex vivo detection of tumor cells
Authors: Patel KG, Ng PP, Kuo CC, Levy S, Levy R, Swartz JR.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2009): 971

Gaussia luciferase reporter assay for monitoring biological processes in culture and in vivo
Authors: Tannous BA.
Journal: Nat Protoc (2009): 582

Gaussia luciferase variant for high-throughput functional screening applications
Authors: Maguire CA, Deliolanis NC, Pike L, Niers JM, Tjon-Kon-Fat LA, Sena-Esteves M, Tannous BA.
Journal: Anal Chem (2009): 7102

Secreted Gaussia luciferase as a biomarker for monitoring tumor progression and treatment response of systemic metastases
Authors: Chung E, Yamashita H, Au P, Tannous BA, Fukumura D, Jain RK.
Journal: PLoS One (2009): e8316

Sensitive in vivo imaging of T cells using a membrane-bound Gaussia princeps luciferase
Authors: Santos EB, Yeh R, Lee J, Nikhamin Y, Punzalan B, La Perle K, Larson SM, Sadelain M, Brentjens RJ.
Journal: Nat Med (2009): 338

Split Gaussia luciferase-based bioluminescence template for tracing protein dynamics in living cells
Authors: Kim SB, Sato M, Tao H.
Journal: Anal Chem (2009): 67

A codon-optimized luciferase from Gaussia princeps facilitates the in vivo monitoring of gene expression in the model alga Chlamydomonas reinhardtii
Authors: Shao N, Bock R.
Journal: Curr Genet (2008): 381

Cell-free metabolic engineering promotes high-level production of bioactive Gaussia princeps luciferase
Authors: Goerke AR, Loening AM, Gambhir SS, Swartz JR.
Journal: Metab Eng (2008): 187

Gaussia-luciferase as a sensitive reporter gene for monitoring promoter activity in the nucleus of the green alga Chlamydomonas reinhardtii
Authors: Ruecker O, Zillner K, Groebner-Ferreira R, Heitzer M.
Journal: Mol Genet Genomics (2008): 153

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒 Cat#12535

说明书
Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒.pdf

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒 货号12519-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒    货号12519 货号 12519 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 plates 价格 5244
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒。β-半乳糖苷酶,β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因。最好的多功能常见报告基因是来自于北美的萤火虫Photinus pyralis的荧光素酶。此酶蛋白的活性不需要进行蛋白质翻译后修饰获得。它在活细胞中高浓度积累不会造成细胞毒性,可以在原核和真核细胞中使用。在ATP、镁离子和氧存在的条件下,萤火虫荧光素酶催化荧光素氧化形成生物荧光。Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒利用与荧光强度相关的公式来定量检测活细胞和细胞抽提物中的荧光素酶。在荧光素酶的催化下,我们的试剂/试剂盒会产生具有强烈荧光的荧光产物。本试剂盒提供所有的必需组分,并且经过优化处理,我们还提供可以用于HTS(高通量筛选)实验方案。本试剂盒具有非常好的灵敏度,可以用于对灵敏度有要求的分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒。 

金畔问号:荧光素酶到底该如何检测?

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞(样品)(96孔板是100 µL /孔,384孔板是25 µL /孔)
2.添加等量的萤光素酶工作溶液
3.在室温下孵育10-20分钟
4.检测560 nm处的荧光强度

 

溶液制备 

1.工作溶液配制

将全部反应缓冲液(组分B)转移到荧光素酶(组分A)的瓶中,并充分混合以制成荧光素酶工作溶液。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

1.进行荧光素酶检测:

1.1通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物(96孔板)或5 µL 5X测试化合物(384孔板)来用检测化合物处理细胞(或样品)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),添加相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在5%CO2培养箱中于37°C孵育一段时间(通常为4小时至过夜)。

1.3每孔荧光素酶工作溶液添加100 µL(96孔板)或25 µL(384孔板)。

1.4避光在室温下孵育平板10-20分钟。

1.5用酶标仪检测荧光强度。

 

2.建立标准的萤光素酶校准曲线:注意:如果需要计算样品中萤光素酶的绝对量,则应与上述测定法一起生成萤光素酶标准曲线。

2.1使用不含萤光素酶的样品(作为对照)来检测背景发光,在含0.1%BSA的PBS缓冲液中进行一系列萤光素酶稀释液。 注意:通常萤光素酶的浓度从1 pg / mL到1 ng / mL是合适的。

2.2将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的稀释的荧光素酶溶液添加到一个空板中。

2.3加入100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的荧光素酶工作溶液。

2.4在避光的条件下,将反应混合物在室温下孵育10-20分钟。

2.5用标准酶标仪记录荧光强度。

2.6生成荧光素酶标准曲线。

 

参考文献

LncRNA TUBA4B functions as a competitive endogenous RNA to inhibit gastric cancer progression by elevating PTEN via sponging miR-214 and miR-216a/b
Authors: Jianbo Guo, Yan Li, He Duan, Lu Yuan
Journal: Cancer Cell International (2019): 156

Identification of compounds that modulate retinol signaling using a cell-based qHTS assay
Authors: Yanling Chen, Srilatha Sakamuru, Ruili Huang, David H Reese, Menghang Xia
Journal: Toxicology in Vitro (2016): 287–296

Microwave ablation-assisted liver gene transfection in rats
Authors: Ruoyu Jiang, Lingkai Meng, Longhao Sun, Xianghui He, Xiaoyu Liang, Jie Zhang, Zhixiang Zhang
Journal: International Journal of Hyperthermia (2016): 666–672

Activation of relaxin family receptor 1 from different mammalian species by relaxin peptide and small-molecule agonist ML290
Authors: Zaohua Huang, Courtney Myhr, Ross AD Bathgate, Brian A Ho, Amaya Bueno, Xin Hu, Jingbo Xiao, Noel Southall, Elena Barnaeva, Irina U Agoulnik
Journal: Frontiers in endocrinology (2015)

Neuroprotective effect of schizandrin A on oxygen and glucose deprivation/reperfusion-induced cell injury in primary culture of rat cortical neurons
Authors: Cai-Ping Wang, Gui-Cai Li, Yun-Wei Shi, Xiao-Chuan Zhang, Jian-Long Li, Zhi-Wei Wang, Fei Ding, Xin-Miao Liang
Journal: Journal of physiology and biochemistry (2014): 735–747

Discovery of ML367, inhibitor of ATAD5 stabilization
Authors: Jason M Rohde, Ganesha Rai, Yong Jun Choi, Srilatha Sakamuru, Jennifer T Fox, Ruili Huang, Menghang Xia, Kyungjae Myung, Matthew B Boxer, David J Maloney
Journal: (2013)

说明书
Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒.pdf

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒 货号12518-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒    货号12518 货号 12518 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 plate 价格 1944
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒。β-半乳糖苷酶,β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因。最好的多功能常见报告基因是来自于北美的萤火虫Photinus pyralis的荧光素酶。此酶蛋白的活性不需要进行蛋白质翻译后修饰获得。它在活细胞中高浓度积累不会造成细胞毒性,可以在原核和真核细胞中使用。在ATP、镁离子和氧存在的条件下,萤火虫荧光素酶催化荧光素氧化形成生物荧光。Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒利用与荧光强度相关的公式来定量检测活细胞和细胞抽提物中的荧光素酶。在荧光素酶的催化下,我们的试剂/试剂盒会产生具有强烈荧光的荧光产物。本试剂盒提供所有的必需组分,并且经过优化处理,我们还提供可以用于HTS(高通量筛选)实验方案。本试剂盒具有非常好的灵敏度,可以用于对灵敏度有要求的分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒。 

金畔问号:荧光素酶到底该如何检测?

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞(样品)(96孔板是100 µL /孔,384孔板是25 µL /孔)
2.添加等量的萤光素酶工作溶液
3.在室温下孵育10-20分钟
4.检测560 nm处的荧光强度

 

溶液制备 

1.工作溶液配制

将全部反应缓冲液(组分B)转移到荧光素酶(组分A)的瓶中,并充分混合以制成荧光素酶工作溶液。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

1.进行荧光素酶检测:

1.1通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物(96孔板)或5 µL 5X测试化合物(384孔板)来用检测化合物处理细胞(或样品)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),添加相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在5%CO2培养箱中于37°C孵育一段时间(通常为4小时至过夜)。

1.3每孔荧光素酶工作溶液添加100 µL(96孔板)或25 µL(384孔板)。

1.4避光在室温下孵育平板10-20分钟。

1.5用酶标仪检测荧光强度。

 

2.建立标准的萤光素酶校准曲线:注意:如果需要计算样品中萤光素酶的绝对量,则应与上述测定法一起生成萤光素酶标准曲线。

2.1使用不含萤光素酶的样品(作为对照)来检测背景发光,在含0.1%BSA的PBS缓冲液中进行一系列萤光素酶稀释液。 注意:通常萤光素酶的浓度从1 pg / mL到1 ng / mL是合适的。

2.2将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的稀释的荧光素酶溶液添加到一个空板中。

2.3加入100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的荧光素酶工作溶液。

2.4在避光的条件下,将反应混合物在室温下孵育10-20分钟。

2.5用标准酶标仪记录荧光强度。

2.6生成荧光素酶标准曲线。

 

参考文献

LncRNA TUBA4B functions as a competitive endogenous RNA to inhibit gastric cancer progression by elevating PTEN via sponging miR-214 and miR-216a/b
Authors: Jianbo Guo, Yan Li, He Duan, Lu Yuan
Journal: Cancer Cell International (2019): 156

Identification of compounds that modulate retinol signaling using a cell-based qHTS assay
Authors: Yanling Chen, Srilatha Sakamuru, Ruili Huang, David H Reese, Menghang Xia
Journal: Toxicology in Vitro (2016): 287–296

Microwave ablation-assisted liver gene transfection in rats
Authors: Ruoyu Jiang, Lingkai Meng, Longhao Sun, Xianghui He, Xiaoyu Liang, Jie Zhang, Zhixiang Zhang
Journal: International Journal of Hyperthermia (2016): 666–672

Activation of relaxin family receptor 1 from different mammalian species by relaxin peptide and small-molecule agonist ML290
Authors: Zaohua Huang, Courtney Myhr, Ross AD Bathgate, Brian A Ho, Amaya Bueno, Xin Hu, Jingbo Xiao, Noel Southall, Elena Barnaeva, Irina U Agoulnik
Journal: Frontiers in endocrinology (2015)

Neuroprotective effect of schizandrin A on oxygen and glucose deprivation/reperfusion-induced cell injury in primary culture of rat cortical neurons
Authors: Cai-Ping Wang, Gui-Cai Li, Yun-Wei Shi, Xiao-Chuan Zhang, Jian-Long Li, Zhi-Wei Wang, Fei Ding, Xin-Miao Liang
Journal: Journal of physiology and biochemistry (2014): 735–747

Discovery of ML367, inhibitor of ATAD5 stabilization
Authors: Jason M Rohde, Ganesha Rai, Yong Jun Choi, Srilatha Sakamuru, Jennifer T Fox, Ruili Huang, Menghang Xia, Kyungjae Myung, Matthew B Boxer, David J Maloney
Journal: (2013)

说明书
Amplite 荧光素酶报告基因检测试剂盒.pdf

Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒 货号12536-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒

货号 12536 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 plates 价格 12588
Ex (nm) 429 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒,β-半乳糖苷酶,β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因,而这其中,萤火虫荧光素酶是功能最多的报告基因。最近,其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升,例如海肾荧光素酶。由于海肾荧光素酶受体分子非常小,因此不需要ATP的辅助。Amplite 海肾荧光素酶报告基团检测试剂盒提供了一个快速灵敏的检测海肾荧光素酶活性的方案。该方案使用了独特的荧光基质形成以实现基于细胞的胞内海肾荧光素酶活性检测。独特的荧光基质与海肾荧光素酶反应时,产生强烈的荧光。本试剂盒提供所有必需组分,并且适用于HTS(高通量筛选)研究。本试剂盒灵敏度高,可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基,也可用于原始或合成的hRluc基因表达检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒。 

金畔问号:荧光素酶到底该如何检测?

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞板
2.根据需要处理细胞
3.从细胞板中去除培养基
4.加入海肾荧光素酶工作溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
5.在室温下孵育5-10分钟
6.检测荧光强度

 

溶液制备  

1.工作溶液

将1体积100X荧光素酶底物(组分A)添加到100体积的测定缓冲液(组分B)中,制成海肾荧光素酶工作溶液。 注意:海肾荧光素酶工作溶液对光非常敏感,应避免光照。 另外,它不稳定,应放在冰上并在2小时内使用。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

1.用测试化合物处理细胞(或样品),在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物(96孔板)或5 µL 5X测试化合物(384孔板)。
 
2.将细胞板在5%CO2培养箱中于37°C孵育一段时间(通常为4小时至过夜)。

3.每孔海肾荧光素酶工作溶液中加入100 µL(96孔板)或25 µL(384孔板)。

4.在室温下避光将平板孵育5-10分钟。 

5.用酶标仪检测荧光强度。

 

参考文献

Reassembly of a bioluminescent protein Renilla luciferase directed through DNA hybridization
Authors: Cissell KA, Rahimi Y, Shrestha S, Deo SK.
Journal: Bioconjug Chem (2009): 15

RNA detection using peptide-inserted Renilla luciferase
Authors: Andou T, Endoh T, Mie M, Kobatake E.
Journal: Anal Bioanal Chem (2009): 661

The cAMP-dependent protein kinase inhibitor H-89 attenuates the bioluminescence signal produced by Renilla Luciferase
Authors: Herbst KJ, Allen MD, Zhang J.
Journal: PLoS One (2009): e5642

Bioluminescent indicators for Ca2+ based on split Renilla luciferase complementation in living cells
Authors: Kaihara A, Umezawa Y, Furukawa T.
Journal: Anal Sci (2008): 1405

Coelenterazine-binding protein of Renilla muelleri: cDNA cloning, overexpression, and characterization as a substrate of luciferase
Authors: Titushin MS, Markova SV, Frank LA, Malikova NP, Stepanyuk GA, Lee J, Vysotski ES.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2008): 189

Mutational optimization of the coelenterazine-dependent luciferase from Renilla
Authors: Woo J, von Arnim AG.
Journal: Plant Methods (2008): 23

Structure-function studies on the active site of the coelenterazine-dependent luciferase from Renilla
Authors: Woo J, Howell MH, von Arnim AG.
Journal: Protein Sci (2008): 725

Crystal structures of the luciferase and green fluorescent protein from Renilla reniformis
Authors: Loening AM, Fenn TD, Gambhir SS.
Journal: J Mol Biol (2007): 1017

Hormone treatment enhances WT1 activation of Renilla luciferase constructs in LNCaP cells
Authors: Hanson J, Reese J, Gorman J, Cash J, Fraizer G.
Journal: Front Biosci (2007): 1387

Quantification of dynamic protein complexes using Renilla luciferase fragment complementation applied to protein kinase A activities in vivo
Authors: Stefan E, Aquin S, Berger N, Landry CR, Nyfeler B, Bouvier M, Michnick SW.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2007): 16916

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒 Cat#12530

说明书
Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒.pdf

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒 货号12531-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒    货号12531 货号 12531 存储条件 Multiple
规格 10 Plates 价格 9948
Ex (nm) 429 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒,β-半乳糖苷酶,β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因,而这其中,萤火虫荧光素酶是功能最多的报告基因。最近,其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升,例如来源于海洋桡脚类的动物高斯基质衍而来的生物发光酶,即高斯荧光素酶。由于高斯荧光素酶受体分子非常小,因此不需要ATP的辅助。高斯荧光素酶是一种分子量为20kDa的蛋白质,在氧分子存在条件下,催化腔肠素氧化形成荧光。Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒使用独特的荧光基质对细胞培养基中荧光素酶活性进行定量检测。我们所提供的荧光产品与高斯荧光素酶反应时,会产生强烈荧光。本试剂盒提供所有必需组分,并且适用于HTS(高通量筛选)研究。本试剂盒灵敏度高,可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒。 

金畔问号:荧光素酶到底该如何检测?

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品(50 µL)
2.加入50 µL高斯荧光素酶工作溶液
3.在室温下孵育10-15分钟
4.检测荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下,避免重复冻融循环。
1.1高斯荧光素酶原液(100X):
将50 µL(对于Cat#12530),0.5 mL(对于Cat#12531)或2.5 mL(对于Cat#12532)反应缓冲液(组分B)转移到1小瓶荧光素酶底物(组分A)中,并充分混合。

 

2.工作溶液

使用1:100稀释因子和检测缓冲液(组分C)稀释100X高斯萤光素荧光素酶的检测储备液,以制备高斯萤光素荧光素酶工作溶液。 注意:高斯荧光素酶工作溶液对光非常敏感,它很不稳定,应放在冰上,并在2小时内使用。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

1.用测试化合物处理细胞(或样品),在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物(96孔板)或5 µL 5X测试化合物(384孔板)。对于空白孔(没有细胞的培养基),添加相应量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37°C,5%CO2培养箱中孵育一段时间(通常为4小时至过夜)。

3.进行高斯荧光素酶检测:将连续稀释的高斯荧光素酶或培养上清液的96孔板(50 µL /孔) 或384孔板(12.5 µL /孔)移液到微量滴定板中,然后与高斯荧光素酶工作溶液混合。

4.在避光的条件下,在室温下孵育平板10至15分钟。

5.用酶标仪读取荧光强度。

 

参考文献

A multifunctional, synthetic Gaussia princeps luciferase reporter for live imaging of Candida albicans infections
Authors: Enjalbert B, Rachini A, Vediyappan G, Pietrella D, Spaccapelo R, Vecchiarelli A, Brown AJ, d’Enfert C.
Journal: Infect Immun (2009): 4847

Cell-free production of Gaussia princeps luciferase–antibody fragment bioconjugates for ex vivo detection of tumor cells
Authors: Patel KG, Ng PP, Kuo CC, Levy S, Levy R, Swartz JR.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2009): 971

Gaussia luciferase reporter assay for monitoring biological processes in culture and in vivo
Authors: Tannous BA.
Journal: Nat Protoc (2009): 582

Gaussia luciferase variant for high-throughput functional screening applications
Authors: Maguire CA, Deliolanis NC, Pike L, Niers JM, Tjon-Kon-Fat LA, Sena-Esteves M, Tannous BA.
Journal: Anal Chem (2009): 7102

Secreted Gaussia luciferase as a biomarker for monitoring tumor progression and treatment response of systemic metastases
Authors: Chung E, Yamashita H, Au P, Tannous BA, Fukumura D, Jain RK.
Journal: PLoS One (2009): e8316

Sensitive in vivo imaging of T cells using a membrane-bound Gaussia princeps luciferase
Authors: Santos EB, Yeh R, Lee J, Nikhamin Y, Punzalan B, La Perle K, Larson SM, Sadelain M, Brentjens RJ.
Journal: Nat Med (2009): 338

Split Gaussia luciferase-based bioluminescence template for tracing protein dynamics in living cells
Authors: Kim SB, Sato M, Tao H.
Journal: Anal Chem (2009): 67

A codon-optimized luciferase from Gaussia princeps facilitates the in vivo monitoring of gene expression in the model alga Chlamydomonas reinhardtii
Authors: Shao N, Bock R.
Journal: Curr Genet (2008): 381

Cell-free metabolic engineering promotes high-level production of bioactive Gaussia princeps luciferase
Authors: Goerke AR, Loening AM, Gambhir SS, Swartz JR.
Journal: Metab Eng (2008): 187

Gaussia-luciferase as a sensitive reporter gene for monitoring promoter activity in the nucleus of the green alga Chlamydomonas reinhardtii
Authors: Ruecker O, Zillner K, Groebner-Ferreira R, Heitzer M.
Journal: Mol Genet Genomics (2008): 153

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒 Cat#12535

说明书
Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒.pdf