Amplite 过氧化物和过氧化酶近红外荧光底物货号11009-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年1月14日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 过氧化物和过氧化酶近红外荧光底物

货号	11009	存储条件	在零下15度以下保存, 避免受潮, 避免光照
规格	1 mg	价格	1272
Ex (nm)	648	Em (nm)	668
分子量	~400	溶剂	DMSO
产品详细介绍

简要概述

Amplite 过氧化物和过氧化酶近红外荧光底物是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化氢的荧光探针，我们的Amplite IR是一种荧光性过氧化酶底物，与过氧化酶和H₂O₂反应时，产生近红外荧光。它可以用来检测H₂O₂和过氧化酶。Amplite IR产生的物质在647nm处具有最大吸收峰，同时在647nm处有最大发射峰。这种近红外吸收和荧光将检测的本底降至最小，这些本底经常由自我吸收和/或生物样品自身的荧光，但是在600nm附近自身光吸收基本没有。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 过氧化物和过氧化酶近红外荧光底物。

点击查看光谱

适用仪器

荧光酶标仪
激发：	640nm
发射：	680nm
cutoff：	650nm
推荐孔板：	黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.制备100μMAmplite IR 0.8 U / ml的过氧化物酶在磷酸盐缓冲液，并在孔中加入50微升

2.添加H ₂ O ₂标准品或测试样品（50μL）

3.在室温下孵育0-30分钟

4.监测Ex / Em = 640 / 680nm处的荧光强度

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1Amplite IR原液：
加入适量无水DMSO，制成10至25 mM Amplite IR原液。

2.工作溶液

Amplite IR工作溶液（2X）：
为了在50 mM磷酸盐缓冲液或您选择的缓冲液中达到每孔50至100μM的最终浓度，在管中制备100至200μM浓度的溶液。每孔需要50μL。注意：在硫醇如DTT和b-巯基乙醇存在下，Amplite IR不稳定。高于10μM（最终浓度）的硫醇可显着降低测定动态范围。NADH和谷胱甘肽（从GSH中还原）可能会干扰测定。注意：我们建议您每次进行实验时都使用新鲜原液。

操作步骤

1.在上清液中进行H₂O₂测定

1.1将50μL的2X Amplite IR工作溶液（来自步骤1.2）添加到H ₂ O ₂标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使总H₂O₂测定体积为100μL/孔。注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL2XAmplite IR工作溶液。

1.2在室温下孵育反应0至30分钟，避光。

1.3使用荧光板读数器监测Ex / Em = 640 / 680nm处的荧光增加。注意：Amplite IR过氧化物酶底物易于自氧化，因此一旦加入H₂O₂反应混合物就读取荧光，以提高信噪比。

1.4空白孔中的荧光（仅使用测定缓冲液）用作对照，并从具有H₂O_2的那些孔的值中减去。

2.运行H₂O₂测定法的细胞：

2.1Amplite IR可用于测量细胞中H₂O₂的释放。以下是建议的方案，可根据您的具体研究需要进行修改.Dipite IR工作溶液应按步骤1.2制备，但磷酸盐缓冲液应替换为细胞培养系统中使用的培养基。建议的培养基包括（a）Krebs Ringers磷酸盐缓冲液（KRPB）; （b）中。汉克斯平衡盐溶液（HBSS）; 或（c）无血清培养基。

2.2在96孔板（50-100μL/孔）中制备细胞，并根据需要激活细胞。注意：包括阴性对照（单独培养基和非活化细胞）用于测量背景荧光。

2.3加入50微升H₂O₂反应混合物至细胞的每个孔中，注意：对于384孔板中，添加25μL细胞和25微升H₂O₂反应混合物倒入每个孔。

2.4在室温下孵育反应0至30分钟，避光。

2.5使用荧光板读数器监测Ex / Em = 640 / 680nm处的荧光增加。注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在670nm波长下读数。与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。注意：荧光背景随时间增加，因此减去每个数据点的空白孔的荧光强度值是很重要的。

参考文献

Assessment of Tofacitinib and Ruxolitinib and their Anti Inflammatory Effects on Myeloperoxidase
Authors: Amber Milton
Journal: (2017)

Patterned Photonic Nitrocellulose for Pseudo-Paper ELISA
Authors: Junjie Chi, Bingbing Gao, Mi Sun, Fengling Zhang, Enben Su, Hong Liu, Zhongze Gu
Journal: Analytical Chemistry (2017)

Spinal Cord Inflammation: Molecular Imaging after Thoracic Aortic Ischemia Reperfusion Injury
Authors: Hassan Albadawi, John W Chen, Rahmi Oklu, Yue Wu, Gregory Wojtkiewicz, Benjamin Pulli, John D Milner, Richard P Cambria, Michael T Watkins
Journal: Radiology (2016): 152222

Myeloperoxidase Nuclear Imaging for Epileptogenesis
Authors: Yinian Zhang, Daniel P Seeburg, Benjamin Pulli, Gregory R Wojtkiewicz, Lionel Bure, Wendy Atkinson, Stefan Schob, Yoshiko Iwamoto, Muhammad Ali, Wei Zhang
Journal: Radiology (2015): 822–830

Myeloperoxidase–Hepatocyte–Stellate Cell Cross Talk Promotes Hepatocyte Injury and Fibrosis in Experimental Nonalcoholic Steatohepatitis
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Yoshiko Iwamoto, Matthias WG Zeller, Stefan Schob, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: Antioxidants & redox signaling (2015): 1255–1269

Ordered cleavage of myeloperoxidase ester bonds releases active site heme leading to inactivation of myeloperoxidase by benzoic acid hydrazide analogs
Authors: Jiansheng Huang, Forrest Smith, Peter Panizzi
Journal: Archives of biochemistry and biophysics (2014): 74–85

Raising the shields: PCR in the presence of metallic surfaces protected by tailor-made coatings
Authors: Frank D Scherag, Thomas Brandstetter, Jürgen Rühe
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2014): 576–582

Measuring myeloperoxidase activity in biological samples
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Reza Forghani, Stefan Schob, Kevin LC Hsieh, Gregory Wojtkiewicz, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: PLoS One (2013): e67976

Micro-volume wall-less immunoassays using patterned planar plates
Authors: Katherine R Kozak, Jianyong Wang, Melvin Lye, Rashi Takkar, Namyong Kim, Hyunjae Lee, Noo Li Jeon, Kedan Lin, Crystal Zhang, Wai Lee T Wong
Journal: Lab on a Chip (2013): 1342–1350

Distinguishing inflammation from tumor and peritumoral edema by myeloperoxidase magnetic resonance imaging
Authors: Anne Kleijn, John W Chen, Jason S Buhrman, Gregory R Wojtkiewicz, Yoshiko Iwamoto, Martine L Lamfers, Anat O Stemmer-Rachamimov, Samuel D Rabkin, Ralph Weissleder, Robert L Martuza
Journal: Clinical Cancer Research (2011): 4484–4493

说明书

Amplite 过氧化物和过氧化酶近红外荧光底物.pdf

Amplite 过氧化物和过氧化酶蓝色荧光底物货号11005-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年1月9日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 过氧化物和过氧化酶蓝色荧光底物

货号	11005	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	25 mg	价格	1944
Ex (nm)	324	Em (nm)	409
分子量	~300	溶剂	DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：11005

产品名称：Amplite 过氧化物和过氧化酶蓝色荧光底物

规格：25mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：~300

溶剂：DMSO

激发波长（nm）：324

发射波长（nm）：409

产品介绍

Amplite 过氧化物和过氧化酶蓝色荧光底物,金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 过氧化物和过氧化酶蓝色荧光底物。

适用仪器

荧光酶标仪
激发：	324nm
发射：	409nm
cutoff：	350nm
推荐孔板：	黑色底板

参考文献

Assessment of Tofacitinib and Ruxolitinib and their Anti Inflammatory Effects on Myeloperoxidase
Authors: Amber Milton
Journal: (2017)

Patterned Photonic Nitrocellulose for Pseudo-Paper ELISA
Authors: Junjie Chi, Bingbing Gao, Mi Sun, Fengling Zhang, Enben Su, Hong Liu, Zhongze Gu
Journal: Analytical Chemistry (2017)

说明书

Amplite 过氧化物和过氧化酶蓝色荧光底物.pdf

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒近红外荧光货号11553-AAT Bioquest荧光染料

发表于2023年10月15日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒近红外荧光

货号	11553	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	500 Tests	价格	3924
Ex (nm)	648	Em (nm)	668
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒，过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小，因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比，过氧化酶也更便宜；其主要缺点是在保护剂（例如叠氮化钠）存在的条件下溶解性低；而在低浓度下，过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA（酶联免疫吸附实验）、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite荧光法过氧化酶检测试剂盒 *近红外荧光* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析检测方案。本试剂盒使用Amplite IR，HRP近红外荧光底物。Amplite IR是过氧化酶的显色底物，它比H2O2和过氧化酶，及其它的过氧化酶的显色底物（例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue）具有更高的灵敏度。Amplite IR可产生在647 nm具有最大吸收光，在670 nM处具有最大激发光的底物，这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小，在600nm处几乎没有光吸收。本试剂盒可以用于ELISAs，酶促反应动力学分析，氧化酶抑制剂高通量筛选等。本试剂盒经过最优化处理，并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒。

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适用仪器

光吸收酶标仪
吸收：	647 ± 5 nm
推荐孔板：	透明底板

荧光酶标仪
激发：	640nm
发射：	680nm
cutoff：	665nm
推荐孔板：	黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备过氧化物酶工作溶液（50μL）
2.添加HRP标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 640/680 nm处的荧光强度（截止= 665 nm）

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite IR过氧化物酶底物储备液（100X）：
将250μLDMSO（组分E）加入到Amplite IR过氧化物酶底物（组分A）的小瓶中以制备100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液。

1.2 HRP标准溶液（20 U / mL）：
将1mL测定缓冲液（组分C）加入到辣根过氧化物酶（组分D）的小瓶中以制备20U / mL HRP标准溶液。

1.3 H₂O₂储备溶液（20 mM）：
将22.7μL的3％H₂O₂（0.88M，组分B）加入977μL的测定缓冲液（组分C）中以制备20mM H₂O₂储备溶液。注意：稀释的H₂O₂溶液不稳定。应丢弃未使用的部分。

2.标准溶液

HRP标准
将15μL20U / mL HRP标准溶液加入985μL测定缓冲液（组分C）中，得到300 mU / mL HRP标准溶液（SD7）。取300 mU / mL HRP标准溶液（SD7），进行1：3连续稀释，得到连续稀释的HRP标准品（SD6 – SD1）和分析缓冲液（组分C）。

3.工作溶液

将50μL的100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20mM H₂O₂储备溶液加入到4.9mL的测定缓冲液（组分C）中以制备过氧化物酶工作溶液,避光。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品（SD1-SD7,0.41至300mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
SD1	SD1	…	…
SD2	SD2	…	…
SD3	SD3
SD4	SD4
SD5	SD5
SD6	SD6
SD7	SD7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
SD1-SD7	50ul	连续稀释液（0.41至300 mU / mL）
BL	50ul	分析缓冲液（组分C）
TS	50ul	测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品（SD），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL过氧化物酶工作溶液，使总过氧化物酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μL过氧化物酶工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 600-650nm，发射= 650-690nm（最佳Ex / Em = 640 / 680nm，截止= 665nm）监测荧光增加。注意：也可将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在647±5nm波长下读数。与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

参考文献

Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
Authors: Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 216

Horseradish peroxidase-driven fluorescent labeling of nanotubes with quantum dots
Authors: Didenko VV, Baskin DS.
Journal: Biotechniques (2006): 295

Recent advances in catalytic peroxidase histochemistry
Authors: Krieg R, Halbhuber KJ.
Journal: Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) (2003): 547

Vesicular transport route of horseradish C1a peroxidase is regulated by N- and C-terminal propeptides in tobacco cells
Authors: Matsui T, Nakayama H, Yoshida K, Shinmyo A.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2003): 517

Development of a novel enzyme/prodrug combination for gene therapy of cancer: horseradish peroxidase/indole-3-acetic acid
Authors: Greco O, Folkes LK, Wardman P, Tozer GM, Dachs GU.
Journal: Cancer Gene Ther (2000): 1414

Preparation, morphological characterization, and activity of thin films of horseradish peroxidase
Authors: Vianello F, Zennaro L, Di Paolo ML, Rigo A, Malacarne C, Scarpa M.
Journal: Biotechnol Bioeng (2000): 488

Synthesis and purification of horseradish peroxidase-labeled oligonucleotides for tyramide-based fluorescence in situ hybridization
Authors: van Gijlswijk RP, van de Corput MP, Bezrookove V, Wiegant J, Tanke HJ, Raap AK.
Journal: Histochem Cell Biol (2000): 175

Evidence for free radical formation during the oxidation of 2′-7′-dichlorofluorescin to the fluorescent dye 2′-7′-dichlorofluorescein by horseradish peroxidase: possible implications for oxidative stress measurements
Authors: Rota C, Chignell CF, Mason RP.
Journal: Free Radic Biol Med (1999): 873

In situ identification of cyanobacteria with horseradish peroxidase-labeled, rRNA-targeted oligonucleotide probes
Authors: Schonhuber W, Zarda B, Eix S, Rippka R, Herdman M, Ludwig W, Amann R.
Journal: Appl Environ Microbiol (1999): 1259

Relative number of cells projecting from contralateral and ipsilateral nucleus isthmi to loci in the optic tectum is dependent on visuotopic location: horseradish peroxidase study in the leopard frog
Authors: Dudkin EA, Gruberg ER.
Journal: J Comp Neurol (1999): 212

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说明书

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒近红外荧光 .pdf

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒货号11307-AAT Bioquest荧光染料

发表于2023年4月1日由英国沃特曼whatman

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒

货号	11307	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	200 Tests	价格	2604
Ex (nm)	571	Em (nm)	584
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤氧化酶（XO）是一种催化次黄嘌呤氧化成黄嘌呤的酶，可以进一步催化黄嘌呤氧化成尿酸。它在嘌呤的分解代谢中起重要作用。黄嘌呤氧化酶通常存在于肝脏和空肠中。在严重肝损伤期间，黄嘌呤氧化酶被释放到血液中，因此XO的血液测定是确定肝脏损伤是否已经发生的一种方法。Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒为黄嘌呤氧化酶活性的测量提供了一种快速，超灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。在该测定中，黄嘌呤氧化酶催化嘌呤碱基，次黄嘌呤或黄嘌呤氧化成尿酸和超氧化物，其自发降解为过氧化氢（H₂O₂）。该试剂盒使用我们的Amplite Red基板，使用吸光度酶标仪可以在~570 nm处轻松读取颜色信号。使用Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒，我们在100μL反应体积中检测到低至0.3 mU / mL的黄嘌呤氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。

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适用仪器

光吸收酶标仪
吸收:	540/610nm
推荐孔板：	透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加XO标准品和/或测试样品（50μL）
2.准备并添加XO Assay工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在OD比为570 / 610nm时读取吸光度增加

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意：避免反复冻融循环。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液（pH 7.4）。

1.2 HRP库存解决方案（500X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入HRP小瓶（组分C）中。注意：未使用的HRP储备溶液（500X）应分成一次性使用的等分试样并储存在-20 oC。

1.3 黄嘌呤氧化酶（XO）原液：
将200μL测定缓冲液（组分B）加入黄嘌呤氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。注意：未使用的XO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

2.标准溶液

黄嘌呤氧化酶标准
将10μL1U/ mL XO储备液加入990μL分析缓冲液（组分B）中，制成10 mU / mL XO标准溶液。进行1：3连续稀释，得到约10,3,1,0.3,0.1， 0.03,0.01和0mU / mL连续稀释的XO标准品。

3.工作溶液

表1.一个透明底96孔微孔板的XO分析工作溶液（2X）

成分	规格
Amplite 红色储备液（250x）	20ul
HRP（500X）	10ul
黄嘌呤（100X）	50ul
分析缓冲液	5ml
总容积	5.08ml

样品分析

表2.在透明底96孔微孔板中的黄嘌呤氧化酶标准品和测试样品的布局。 XOS =黄嘌呤氧化酶标准品（XOS1-XOS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
XOS1	XOS1	…	…
XOS2	XOS2	…	…
XOS3	XOS3
XOS4	XOS4
XOS5	XOS5
XOS6	XOS6
XOS7	XOS7

表3.每个孔的试剂组成

XO标准	空白	测试样本
连续稀释：50μL	测定缓冲液（化合物B）：50μL	50 µL

注意：黄嘌呤氧化酶标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。

1.如表2和3中所述，将XO标准品和含有XO的测试样品加入白色透明底部微孔板中。

2.将50μLXOAssay工作溶液加入XO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（表2），使总XO测定体积为100μL/孔。注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用吸光度读数器监测信号强度，OD比为570 / 610nm。

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

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标签归档：氧化酶

Amplite 过氧化物和过氧化酶近红外荧光底物货号11009-AAT Bioquest荧光染料

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