Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光

	货号	22656	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	501	Em (nm)	510
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光是一套荧光成像工具，用于标记亚细胞细胞器，如膜，溶酶体，线粒体，细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =445/503nm处以大斯托克斯位移的绿色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料，可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂，一种疏水性化合物，很容易渗透完整的活细胞，并被困在溶酶体内。进入溶酶体后，其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景，使其可用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞活力，细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

点击查看光谱

产品说明书

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 445 / 503nm处进行分析

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液：

1.1解冻 Lysolite Green（组分A）至室温。

1.2通过将20μLLysolite Green（组分A）稀释到10mL活细胞染色缓冲液（组分B）中制备染料工作溶液。

注1：对于一个96孔板，20μLLysolite Green（组分A）就足够了。 将未使用的Lysolite Green（组分A）等分并储存在<-20℃。 避光，避免反复冻融循环。

注2：荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞：

2.1对于粘附细胞：在96孔黑色壁/透明底板（100μL/孔/ 96孔板）中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时，加入等体积（如100μL/孔/ 96孔板）的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有FITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞：以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀，然后加入等体积的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有FITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2：悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理过的盖玻片上，并作为贴壁细胞染色（见步骤2.1）。

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像* Costar黑色96孔板中的绿色荧光*

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

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	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 橙色荧光 是一套荧光成像工具，用于标记亚细胞细胞器，如膜，溶酶体，线粒体，细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =542/556nm处以大斯托克斯位移的橙色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料，可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂，一种疏水性化合物，很容易渗透完整的活细胞，并被困在溶酶体内。进入溶酶体后，其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景，使其可用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞活力，细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 橙色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 542 / 556nm处进行分析

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液：

1.1解冻 Lysolite Orange（组分A）至室温。

1.2通过将20μLLysolite Orange（组分A）稀释到10mL活细胞染色缓冲液（组分B）中制备染料工作溶液。

注1：对于一个96孔板，20μLLysolite Orange（组分A）就足够了。 将未使用的Lysolite Orange（组分A）等分并储存在<-20℃。 避光，避免反复冻融循环。

注2：荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞：

2.1对于粘附细胞：在96孔黑色壁/透明底板（100μL/孔/ 96孔板）中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时，加入等体积（如100μL/孔/ 96孔板）的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞：以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀，然后加入等体积的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2：悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理过的盖玻片上，并作为贴壁细胞染色（见步骤2.1）。

	A: LysoBrite™ Orange (from AAT Bioquest)	B: LysoTracker™ Red (from Invitrogen)
0 second
120 seconds

图1.在Costar黑色96孔板中用A：Cell Navigator TM溶酶体染色试剂盒或B：LysoTracker®RedDND-99（来自Invitrogen）染色的Hela细胞的图像。 通过使用Olympus荧光显微镜在0和120秒曝光时间比较TRTIC信号。

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
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Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
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Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
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Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

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Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

	货号	22659	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	597	Em (nm)	619
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是一套荧光成像工具，用于标记亚细胞细胞器，如膜，溶酶体，线粒体，细胞核等。该试剂盒使用专有的溶解性染料，可以通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中，该指示剂的溶质是一种疏水性化合物，很容易渗透完整的活细胞，并被保留在溶酶体内，进入溶酶体后，其荧光显着增强，这一关键特征显着降低了其染色背景。适用于多种不同类型的研究中包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力，细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有的必需组分和最佳细胞标记方法，适用于增殖和非增殖细胞，可用于悬浮细胞和贴壁细胞。LysoBrite染料的性能明显优于同等的LysoTracker染料（来自Invitrogen）。LysoBrite染料可以在活细胞中停留一周以上，对细胞的毒性极小，而LysoTracker染料只能使用几个小时，LysoBrite染料可以存活几代细胞。此外，LysoBrite染料比LysoTracker染料具有更高的光稳定性，金畔生物是为您提供最优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

适用仪器

产品说明书

试验方案

1. 准备细胞
2. 添加LysoBriteDeep Red染料工作溶液
3. 在37°C孵育30分钟至60分钟
4. 添加染色缓冲液
5. 室温孵育30分钟
6. 在荧光显微镜下Ex/Em =590/620nm（Texas Red滤光片组）处进行分析

注意：1）实验前，取出试剂盒进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液：

1.1  取出试剂盒中A、B、C组分，室温避光静置5-10min。

1.2  移取10μL LysoBrite Deep Red（组分A），用5mL细胞染色缓冲液（组分B）进行稀释，制备染料工作液。

注意：1) 10μL的500X LysoBrite Deep Red（组分A）足够完成一个96孔板，根据要求分装并储存未使用的500X LysoBrite Deep Red（组分A），避免反复冻融。

2)荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据实际应用而改变，可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色：

• 对于贴壁细胞：

在96孔黑色墙壁/透明底板（50μL/孔/ 96孔板）或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞，当细胞达到所需的汇合时，在96孔板或培养皿内加入1/2的LysoBrite Deep Red工作液，在37℃、5％CO₂条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟，将(50 µL /孔/96孔板）的染色缓冲液B（组分C）加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中，在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞，使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意：1）LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有，它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪，可跳过添加染色缓冲液B的步骤，只需将染料工作液替换为生长培养基，然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色，建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

• 对于悬浮细胞：

在1000rpm条件下离心培养液5分钟，得到细胞沉淀并弃去上清液，在预热（37℃）生长培养基例如（100 µL /管）中轻轻重悬细胞沉淀，然后添加1/2体积（50 µL /管）LysoBrite Deep Red工作溶液。在37℃、5％CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟，将(50 µL /孔/96孔板）的染色缓冲液B（组分C）加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞，使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:  1）LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有。它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪，可跳过添加染色缓冲液B的步骤，只需将染料工作液替换为生长培养基，然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色，建议适当增加染料浓度或孵育时间。 

        2）悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理过的盖玻片上，并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

图一：在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒LysoBrite Deep Red染色Hela细胞的荧光成像结果。

图二：HeLa细胞分别用A和B，置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果，在0秒和120秒的曝光时间下，使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。 A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

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Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

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	货号	22652	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	636	Em (nm)	651
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光是一套荧光成像工具，用于标记亚细胞细胞器，如膜，溶酶体，线粒体，细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =630/650nm处以大斯托克斯位移的近红外荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料，可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂，一种疏水性化合物，很容易渗透完整的活细胞，并被困在溶酶体内。进入溶酶体后，其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景，使其可用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞活力，细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

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准备细胞

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在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 630 / 650nm（Cy5滤光片组）处进行分析

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液：

1.1解冻LysoBrite NIR（组分A）至室温。

1.2通过将20μLLysoBrite NIR（组分A）稀释到10mL活细胞染色缓冲液（组分B）中制备染料工作溶液。

注1：对于一个96孔板，20μLLysoBrite NIR（组分A）就足够了。 将未使用的LysoBrite NIR（组分A）等分并储存在<-20℃。 避光，避免反复冻融循环。

注2：荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞：

2.1对于粘附细胞：在96孔黑色壁/透明底板（100μL/孔/ 96孔板）中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时，加入等体积（如100μL/孔/ 96孔板）的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Cy5滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞：以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀，然后加入等体积的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Cy5滤光器的荧光显微镜观察细胞。

注1：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2：悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理过的盖玻片上，并作为贴壁细胞染色（见步骤2.1）。

图1.使用具有Cy5过滤器组的Olympus荧光显微镜在Costar黑色96孔板中用Cell Navigator TM溶酶体染色试剂盒染色的Hela细胞的图像。

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
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Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
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Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
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