LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针 货号22647-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针    货号22647 货号 22647 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 573 Em (nm) 592
分子量 399.25 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22647

产品名称:LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针

规格:500 Tests

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:399.25

溶剂:DMSO

激发波长(nm):573

发射波长(nm):592

 

产品介绍

LysoBrite Red DND-99在化学结构上与用于标记和跟踪活细胞中酸性细胞器的LysoTracker®Red DND-99相同(LysoTracker®是ThermoFisher的商标)。 它对酸性细胞器具有良好的选择性,并且在醛固定后可以合理地保留在细胞内。 LysoBrite 探针由弱碱连接的荧光团组成,弱碱仅在中性pH下部分质子化,从而使它们能够自由渗透细胞膜以标记活细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的LysoBrite 溶酶体DND-99荧光探针。 

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相关产品

Name

 
Excitation (nm)

 
Emission (nm)

 
LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针 573 592
LysoBrite 溶酶体蓝色荧光探针 434 480
LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针 597 619
LysoBrite 溶酶体绿色荧光探针 501 510
LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针 636 651
LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针 543 565
LysoBrite 溶酶体红色荧光探针 576 596

 

参考文献

Quantitation of Lysosomal Trapping of Basic Lipophilic Compounds Using In Vitro Assays and In Silico Predictions Based on the Determination of the Full pH Profile of the Endo-/Lysosomal System in Rat Hepatocytes
Authors: Schmitt, M. V., Lienau, P., Fricker, G., Reichel, A.
Journal: Drug Metab Dispos (2019): 49-57

Detection and discrimination of Shigella sonnei and Shigella flexneri based on vacuolar responses in Saccharomyces cerevisiae
Authors: Nguyen, N. T., Park, R. M., Kim, Y. H., Min, J.
Journal: J Biotechnol (2018): 1-7

An autophagic process is activated in HepG2 cells to mediate BDE-100-induced toxicity
Authors: Pereira, L. C., Duarte, F. V., Varela, A. T., Rolo, A. P., Palmeira, C. M., Dorta, D. J.
Journal: Toxicology (2017): 59-65

Transport and release of colloidal 3-mercaptopropionic acid-coated CdSe-CdS/ZnS core-multishell quantum dots in human umbilical vein endothelial cells
Authors: Fontana, J. M., Yin, H., Chen, Y., Florez, R., Brismar, H., Fu, Y.
Journal: Int J Nanomedicine (2017): 8615-8629

ATP-containing vesicles in stria vascular marginal cell cytoplasms in neonatal rat cochlea are lysosomes
Authors: Liu, J., Liu, W., Yang, J.
Journal: Sci Rep (2016): 20903

Aggregatibacter actinomycetemcomitans leukotoxin induces cytosol acidification in LFA-1 expressing immune cells
Authors: Balashova, N., Dhingra, A., Boesze-Battaglia, K., Lally, E. T.
Journal: Mol Oral Microbiol (2016): 106-14

Bafilomycin A1 Attenuates Osteoclast Acidification and Formation, Accompanied by Increased Levels of SQSTM1/p62 Protein
Authors: Zhu, S., Rea, S. L., Cheng, T., Feng, H. T., Walsh, J. P., Ratajczak, T., Tickner, J., Pavlos, N., Xu, H. Z., Xu, J.
Journal: J Cell Biochem (2016): 1464-70

Fluorogenic Substrates for Visualizing Acidic Organelle Enzyme Activities
Authors: Harlan, F. K., Lusk, J. S., Mohr, B. M., Guzikowski, A. P., Batchelor, R. H., Jiang, Y., Naleway, J. J.
Journal: PLoS One (2016): e0156312

Gypenoside XVII Enhances Lysosome Biogenesis and Autophagy Flux and Accelerates Autophagic Clearance of Amyloid-beta through TFEB Activation
Authors: Meng, X., Luo, Y., Liang, T., Wang, M., Zhao, J., Sun, G., Sun, X.
Journal: J Alzheimers Dis (2016): 1135-50

Intravital Imaging Reveals Angiotensin II-Induced Transcytosis of Albumin by Podocytes
Authors: Schiessl, I. M., Hammer, A., Kattler, V., Gess, B., Theilig, F., Witzgall, R., Castrop, H.
Journal: J Am Soc Nephrol (2016): 731-44

说明书
LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针.pdf

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 货号22658-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光     货号22658 货号 22658 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 576 Em (nm) 596
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =575/597nm处以大斯托克斯位移的红色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。该指示剂中的溶质,是一种疏水性化合物,很容易渗透到完整的活细胞,并被保留在溶酶体内一段时间。进入溶酶体后,其荧光显著增强。这一关键特征显著降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
激发:

TRITC滤波片

发射:

TRITC滤波片

推荐孔板:

黑色透明

产品说明书

试验方案

  1. 准备细胞
  2. 添加染料工作溶液
  3. 在37°C孵育30分钟至2小时
  4. 在荧光显微镜下Ex / Em = 575 / 597nm处进行分析

注意:1)实验前,取出转染试剂进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1  取出试剂盒中A、B组分,室温避光静置5-10min。

1.2  移取20μLLysoBrite Red(组分A),用10mL活细胞染色缓冲液(组分B)进行稀释,制备染料工作液。

注意:1) 20μL的500XLysoBrite Red (组分A)足够完成一个96孔板,根据要求分装并储存未使用的500XLysoBrite Red(组分A),避免反复冻融。

        2)荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据实际应用而改变,可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色:

2.1对于贴壁细胞:

在96黑色/透明微孔板(100μL/孔/ 96孔板)或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞,当细胞达到所需的汇合时,在96孔板或培养皿内加入等量的LysoBrite Red工作液,在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟,用预温(37°C) Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HBSS)或自配的缓冲液清洗细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔,再使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞,使之带红色荧光(Ex/Em = 575/600 nm)。

注意:1)如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

2.2对于悬浮细胞:

向细胞中加入等量的LysoBrite Red工作液。在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟,用预温(37°C) Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HBSS)或自配的缓冲液清洗细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔,再使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞,使之带红色荧光(Ex/Em = 575/600 nm)。

注意:  1)如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

         2)悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光     货号22658

图一:在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色Hela细胞的荧光成像结果。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光     货号22658

图二:HeLa细胞分别用A和B,置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果,在0秒和120秒的曝光时间下,使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22658)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

参考文献 

Visualising the dynamics of live pancreatic microtumours self-organised through cell-in-cell invasion
Authors: Yukiko Miyatake, Kaori Kuribayashi-Shigetomi, Yusuke Ohta, Shunji Ikeshita, Agus Subagyo, Kazuhisa Sueoka, Akira Kakugo, Maho Amano, Toshiyuki Takahashi, Takaharu Okajima
Journal: Scientific reports (2018): 14054

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 Cat#22659
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22656
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22655

说明书
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 .pdf

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光 货号22652-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光    货号22652 货号 22652 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 636 Em (nm) 651
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =630/650nm处以大斯托克斯位移的近红外荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 630nm
发射: 650nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy5滤波片

产品说明书

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 630 / 650nm(Cy5滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻LysoBrite NIR(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysoBrite NIR(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysoBrite NIR(组分A)就足够了。 将未使用的LysoBrite NIR(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Cy5滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Cy5滤光器的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光    货号22652

图1.使用具有Cy5过滤器组的Olympus荧光显微镜在Costar黑色96孔板中用Cell Navigator TM溶酶体染色试剂盒染色的Hela细胞的图像。

 

参考文献

 

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

说明书
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光.pdf

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 货号22659-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光    货号22659 货号 22659 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 597 Em (nm) 619
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可以通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中,该指示剂的溶质是一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被保留在溶酶体内,进入溶酶体后,其荧光显着增强,这一关键特征显着降低了其染色背景。适用于多种不同类型的研究中包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有的必需组分和最佳细胞标记方法,适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。LysoBrite染料的性能明显优于同等的LysoTracker染料(来自Invitrogen)。LysoBrite染料可以在活细胞中停留一周以上,对细胞的毒性极小,而LysoTracker染料只能使用几个小时,LysoBrite染料可以存活几代细胞。此外,LysoBrite染料比LysoTracker染料具有更高的光稳定性,金畔生物是为您提供最优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发:

Texas Red滤波片

发射: Texas Red滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

试验方案

  1. 准备细胞
  2. 添加LysoBriteDeep Red染料工作溶液
  3. 在37°C孵育30分钟至60分钟
  4. 添加染色缓冲液
  5. 室温孵育30分钟
  6. 在荧光显微镜下Ex/Em =590/620nm(Texas Red滤光片组)处进行分析

注意:1)实验前,取出试剂盒进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1  取出试剂盒中A、B、C组分,室温避光静置5-10min。

1.2  移取10μL LysoBrite Deep Red(组分A),用5mL细胞染色缓冲液(组分B)进行稀释,制备染料工作液。

注意:1) 10μL的500X LysoBrite Deep Red(组分A)足够完成一个96孔板,根据要求分装并储存未使用的500X LysoBrite Deep Red(组分A),避免反复冻融。

2)荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据实际应用而改变,可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色:

  • 对于贴壁细胞:

在96孔黑色墙壁/透明底板(50μL/孔/ 96孔板)或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞,当细胞达到所需的汇合时,在96孔板或培养皿内加入1/2的LysoBrite Deep Red工作液,在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟,将(50 µL /孔/96孔板)的染色缓冲液B(组分C)加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞,使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:1)LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有,它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪,可跳过添加染色缓冲液B的步骤,只需将染料工作液替换为生长培养基,然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

  • 对于悬浮细胞:

在1000rpm条件下离心培养液5分钟,得到细胞沉淀并弃去上清液,在预热(37℃)生长培养基例如(100 µL /管)中轻轻重悬细胞沉淀,然后添加1/2体积(50 µL /管)LysoBrite Deep Red工作溶液。在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟,将(50 µL /孔/96孔板)的染色缓冲液B(组分C)加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞,使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:  1)LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有。它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪,可跳过添加染色缓冲液B的步骤,只需将染料工作液替换为生长培养基,然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。 

        2)悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光    货号22659

图一:在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒LysoBrite Deep Red染色Hela细胞的荧光成像结果。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光    货号22659

图二:HeLa细胞分别用A和B,置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果,在0秒和120秒的曝光时间下,使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。

A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

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说明书
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光.pdf

CytoFix 溶酶体红色探针 货号23210-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

CytoFix 溶酶体红色探针

CytoFix 溶酶体红色探针

CytoFix 溶酶体红色探针    货号23210 货号 23210 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 3924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 863.75 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

溶酶体是含有酸性水解酶的细胞器,它通过自噬来分解废物和细胞碎片。 AAT Bioquest提供CytoFix 溶酶体红色探针,可选择性地对溶酶体染色。 即使固定后,CytoFix 溶酶体红色探针也可以很好地保留在溶酶体中。 该探针会渗透完整的活细胞,并保留在溶酶体内。 这种染料在溶酶体中产生的荧光至少可以保留1周,使其成为极好的溶酶体示踪染料。 该探针的主要特征是其高染色效率,固定后可长时间保留并减少了人工操作时间。 CytoFix 溶酶体红色探针可与GFP表达的细胞或其他细胞器染色剂一起使用,进行多色分析。 它既可用于悬浮细胞,也可用于贴壁细胞,并易于适应各种荧光平台。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的CytoFix 溶酶体红色探针。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3/TRITC滤波片
发射: Cy3/TRITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 除去生长培养基
  3. 将细胞与CytoFix LysoRed工作溶液在37°C下孵育20-30分钟
  4. 去除CytoFix LysoRed工作溶液
  5. 使用Cy3 / TRITC滤光片组在荧光显微镜下分析

 

溶液配制 

工作溶液配制

CytoFix LysoRed工作溶液:将20 µL储备溶液添加到10 mLHanks缓冲液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或自备缓冲液中,并充分混合。

注意:20 µL储备液足以进行一次96孔板分析。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

注意 未使用的CytoFix LysoRed储备溶液可以分装,并在≤-20°C下以较小的等分试样存储。 避光并避免重复的冻融循环。

 

实验步骤

 

1.在生长培养基中准备细胞。

2.去除细胞培养基并洗涤两次(可选)

3.在细胞培养板中加入100 µL /孔(96孔板)或50 µL /孔(384孔板)的CytoFix LysoRed工作溶液

(注意细胞膜探针的最佳浓度因具体应用而异。)

4.避光保存,在37°C下孵育细胞20-30分钟。

5.除去每个孔中的工作溶液。 用HHBS或您自备缓冲液洗涤细胞一次(可选)。

6.可选:在室温下用4%甲醛将细胞固定20分钟。 洗涤细胞两次以除去任何固定液。

7.使用带有Cy3 / TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

 

 图示

 

CytoFix 溶酶体红色探针    货号23210

图1.在黑色96孔板上用CytoFix LysoRed染色的HeLa细胞的荧光图像。 在室温下用4%甲醛溶液定影(左)和(右)定影20分钟后获取图像。 使用带有Cy3 / TRITC滤光片的荧光显微镜对细胞成像。

 

说明书
CytoFix 溶酶体红色探针.pdf