LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针 货号22644-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针

LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针

LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针    货号22644 货号 22644 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 543 Em (nm) 565
分子量 670.89 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针,用于标记活细胞的溶酶体。专有的溶解性染料可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。 溶质指示剂是疏水性化合物,易于渗透完整的活细胞,并在进入细胞后被捕获在溶酶体中。 进入溶酶体后,LysoBrite 试剂的荧光明显增强。 可以使用荧光成像,高含量成像,酶标仪荧光测定法或流式细胞术检测荧光。 LysoBrite 橙色,红色,深红色和NIR试剂具有极高的光稳定性和优异的细胞保留性,可用于各种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。 它们适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。溶酶体是细胞器,其含有酸水解酶以分解废物和细胞碎片。 溶酶体消化多余的或破旧的细胞器,食物颗粒和吞噬的病毒或细菌。 溶酶体周围的膜允许消化酶在pH4.5下工作。 与微碱性胞质溶胶(pH 7.2)相比,溶酶体的内部是酸性的(pH 4.5-4.8)。 溶酶体通过质子泵和氯离子通道从细胞质中泵送质子穿过膜来维持这种pH差异。LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

使用LysoBrite 染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟

洗涤细胞

在荧光显微镜下分析

注:该方案仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。

 

操作方法

1.制备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 LysoBrite 染料至室温。

1.2通过将20μL的500 X LysoBrite 染料稀释到10 mL Hanks和20 mm Hepes缓冲液或缓冲液(HBSS)中,制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μL的LysoBrite 染料就足够了。 在<-15℃下等分并储存未使用的LysoBrite 染料储备溶液。 保护它免受光照,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1贴壁细胞:a.在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。 b.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟。 c.用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 d.使用配有所需滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:a.将等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)加入细胞中。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟。 b.用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 c.使用配备有所需过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为粘附细胞染色(见步骤2.1)。

 

参考文献

Anti-tumour activity of low molecular weight heparin doxorubicin nanoparticles for histone H1 high-expressive prostate cancer PC-3M cells
Authors: Shuang Zhang, Zhan-Tao Li, Man Liu, Jing-Ru Wang, Mei-Qi Xu, Zhuo-Yue Li, Xiao-Chuan Duan, Yan-Li Hao, Xiu-Chai Zheng, Hui Li
Journal: Journal of Controlled Release (2018)

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

说明书
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LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针 货号22646-AAT Bioquest荧光染料

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LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针

LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针

LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针    货号22646 货号 22646 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 597 Em (nm) 619
分子量 746.99 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针,用于标记活细胞的溶酶体。专有的溶解性染料可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。 溶质指示剂是疏水性化合物,易于渗透完整的活细胞,并在进入细胞后被捕获在溶酶体中。 进入溶酶体后,LysoBrite 试剂的荧光明显增强。 可以使用荧光成像,高含量成像,酶标仪荧光测定法或流式细胞术检测荧光。 LysoBrite 橙色,红色,深红色和NIR试剂具有极高的光稳定性和优异的细胞保留性,可用于各种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。 它们适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。溶酶体是细胞器,其含有酸水解酶以分解废物和细胞碎片。 溶酶体消化多余的或破旧的细胞器,食物颗粒和吞噬的病毒或细菌。 溶酶体周围的膜允许消化酶在pH4.5下工作。 与微碱性胞质溶胶(pH 7.2)相比,溶酶体的内部是酸性的(pH 4.5-4.8)。 溶酶体通过质子泵和氯离子通道从细胞质中泵送质子穿过膜来维持这种pH差异。LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

使用LysoBrite 染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟

洗涤细胞

在荧光显微镜下分析

注:该方案仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。

 

操作方法

1.制备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 LysoBrite 染料至室温。

1.2通过将20μL的500 X LysoBrite 染料稀释到10 mL Hanks和20 mm Hepes缓冲液或缓冲液(HBSS)中,制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μL的LysoBrite 染料就足够了。 在<-15℃下等分并储存未使用的LysoBrite 染料储备溶液。 保护它免受光照,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1贴壁细胞:a.在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。 b.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟。 c.用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 d.使用配有所需滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:a.将等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)加入细胞中。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟。 b.用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 c.使用配备有所需过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为粘附细胞染色(见步骤2.1)。

 

参考文献

Anti-tumour activity of low molecular weight heparin doxorubicin nanoparticles for histone H1 high-expressive prostate cancer PC-3M cells
Authors: Shuang Zhang, Zhan-Tao Li, Man Liu, Jing-Ru Wang, Mei-Qi Xu, Zhuo-Yue Li, Xiao-Chuan Duan, Yan-Li Hao, Xiu-Chai Zheng, Hui Li
Journal: Journal of Controlled Release (2018)

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针 Cat#22641
LysoBrite 溶酶体红色荧光探针 Cat#22645
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说明书
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Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 货号22658-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光     货号22658 货号 22658 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 576 Em (nm) 596
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =575/597nm处以大斯托克斯位移的红色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。该指示剂中的溶质,是一种疏水性化合物,很容易渗透到完整的活细胞,并被保留在溶酶体内一段时间。进入溶酶体后,其荧光显著增强。这一关键特征显著降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
激发:

TRITC滤波片

发射:

TRITC滤波片

推荐孔板:

黑色透明

产品说明书

试验方案

  1. 准备细胞
  2. 添加染料工作溶液
  3. 在37°C孵育30分钟至2小时
  4. 在荧光显微镜下Ex / Em = 575 / 597nm处进行分析

注意:1)实验前,取出转染试剂进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1  取出试剂盒中A、B组分,室温避光静置5-10min。

1.2  移取20μLLysoBrite Red(组分A),用10mL活细胞染色缓冲液(组分B)进行稀释,制备染料工作液。

注意:1) 20μL的500XLysoBrite Red (组分A)足够完成一个96孔板,根据要求分装并储存未使用的500XLysoBrite Red(组分A),避免反复冻融。

        2)荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据实际应用而改变,可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色:

2.1对于贴壁细胞:

在96黑色/透明微孔板(100μL/孔/ 96孔板)或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞,当细胞达到所需的汇合时,在96孔板或培养皿内加入等量的LysoBrite Red工作液,在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟,用预温(37°C) Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HBSS)或自配的缓冲液清洗细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔,再使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞,使之带红色荧光(Ex/Em = 575/600 nm)。

注意:1)如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

2.2对于悬浮细胞:

向细胞中加入等量的LysoBrite Red工作液。在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟,用预温(37°C) Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HBSS)或自配的缓冲液清洗细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔,再使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞,使之带红色荧光(Ex/Em = 575/600 nm)。

注意:  1)如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

         2)悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光     货号22658

图一:在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色Hela细胞的荧光成像结果。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光     货号22658

图二:HeLa细胞分别用A和B,置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果,在0秒和120秒的曝光时间下,使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22658)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

参考文献 

Visualising the dynamics of live pancreatic microtumours self-organised through cell-in-cell invasion
Authors: Yukiko Miyatake, Kaori Kuribayashi-Shigetomi, Yusuke Ohta, Shunji Ikeshita, Agus Subagyo, Kazuhisa Sueoka, Akira Kakugo, Maho Amano, Toshiyuki Takahashi, Takaharu Okajima
Journal: Scientific reports (2018): 14054

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
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Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
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Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
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Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
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The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

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产品名称 货号
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 Cat#22659
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22656
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22655

说明书
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 .pdf

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针 货号22647-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针

LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针    货号22647 货号 22647 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 573 Em (nm) 592
分子量 399.25 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22647

产品名称:LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针

规格:500 Tests

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:399.25

溶剂:DMSO

激发波长(nm):573

发射波长(nm):592

 

产品介绍

LysoBrite Red DND-99在化学结构上与用于标记和跟踪活细胞中酸性细胞器的LysoTracker®Red DND-99相同(LysoTracker®是ThermoFisher的商标)。 它对酸性细胞器具有良好的选择性,并且在醛固定后可以合理地保留在细胞内。 LysoBrite 探针由弱碱连接的荧光团组成,弱碱仅在中性pH下部分质子化,从而使它们能够自由渗透细胞膜以标记活细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的LysoBrite 溶酶体DND-99荧光探针。 

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相关产品

Name

 
Excitation (nm)

 
Emission (nm)

 
LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针 573 592
LysoBrite 溶酶体蓝色荧光探针 434 480
LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针 597 619
LysoBrite 溶酶体绿色荧光探针 501 510
LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针 636 651
LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针 543 565
LysoBrite 溶酶体红色荧光探针 576 596

 

参考文献

Quantitation of Lysosomal Trapping of Basic Lipophilic Compounds Using In Vitro Assays and In Silico Predictions Based on the Determination of the Full pH Profile of the Endo-/Lysosomal System in Rat Hepatocytes
Authors: Schmitt, M. V., Lienau, P., Fricker, G., Reichel, A.
Journal: Drug Metab Dispos (2019): 49-57

Detection and discrimination of Shigella sonnei and Shigella flexneri based on vacuolar responses in Saccharomyces cerevisiae
Authors: Nguyen, N. T., Park, R. M., Kim, Y. H., Min, J.
Journal: J Biotechnol (2018): 1-7

An autophagic process is activated in HepG2 cells to mediate BDE-100-induced toxicity
Authors: Pereira, L. C., Duarte, F. V., Varela, A. T., Rolo, A. P., Palmeira, C. M., Dorta, D. J.
Journal: Toxicology (2017): 59-65

Transport and release of colloidal 3-mercaptopropionic acid-coated CdSe-CdS/ZnS core-multishell quantum dots in human umbilical vein endothelial cells
Authors: Fontana, J. M., Yin, H., Chen, Y., Florez, R., Brismar, H., Fu, Y.
Journal: Int J Nanomedicine (2017): 8615-8629

ATP-containing vesicles in stria vascular marginal cell cytoplasms in neonatal rat cochlea are lysosomes
Authors: Liu, J., Liu, W., Yang, J.
Journal: Sci Rep (2016): 20903

Aggregatibacter actinomycetemcomitans leukotoxin induces cytosol acidification in LFA-1 expressing immune cells
Authors: Balashova, N., Dhingra, A., Boesze-Battaglia, K., Lally, E. T.
Journal: Mol Oral Microbiol (2016): 106-14

Bafilomycin A1 Attenuates Osteoclast Acidification and Formation, Accompanied by Increased Levels of SQSTM1/p62 Protein
Authors: Zhu, S., Rea, S. L., Cheng, T., Feng, H. T., Walsh, J. P., Ratajczak, T., Tickner, J., Pavlos, N., Xu, H. Z., Xu, J.
Journal: J Cell Biochem (2016): 1464-70

Fluorogenic Substrates for Visualizing Acidic Organelle Enzyme Activities
Authors: Harlan, F. K., Lusk, J. S., Mohr, B. M., Guzikowski, A. P., Batchelor, R. H., Jiang, Y., Naleway, J. J.
Journal: PLoS One (2016): e0156312

Gypenoside XVII Enhances Lysosome Biogenesis and Autophagy Flux and Accelerates Autophagic Clearance of Amyloid-beta through TFEB Activation
Authors: Meng, X., Luo, Y., Liang, T., Wang, M., Zhao, J., Sun, G., Sun, X.
Journal: J Alzheimers Dis (2016): 1135-50

Intravital Imaging Reveals Angiotensin II-Induced Transcytosis of Albumin by Podocytes
Authors: Schiessl, I. M., Hammer, A., Kattler, V., Gess, B., Theilig, F., Witzgall, R., Castrop, H.
Journal: J Am Soc Nephrol (2016): 731-44

说明书
LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针.pdf

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发 货号22651-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发    货号22651 货号 22651 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm) 505
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em = 405 / 520nm处以大斯托克斯位移的绿色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 405nm
发射: 480nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: 紫色滤波片

产品说明书

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 405 / 480nm(紫外滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 Lysolite VLG26(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysolite VLG26(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysolite VLG26(组分A)就足够了。 将未使用的Lysolite VLG26(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Violet滤光片组(Ex / Em = 405 / 480nm)的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Violet滤光片组(Ex / Em = 405 / 480nm)的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发    货号22651

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像使用Costar黑色96孔板进行405 nm激发的绿色荧光

 

参考文献

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说明书
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