Cy5 酪胺 货号11066-AAT Bioquest荧光染料

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Cy5 酪胺

Cy5 酪胺

Cy5 酪胺    货号11066 货号 11066 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 890.00 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cy5酪酰胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现最大IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Cy5酪胺含有明亮的Cy5,可以使用标准的Cy5滤波片组轻松检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cy5酪酰胺。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片
发射: Cy5滤波片
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy5滤波片组

产品说明书

样品染色示例

概述

1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液,在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟

操作步骤

        在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。

1.制备储存溶液

Tyramide原液(1000X)加入适量的DMSO,制成1-5mM的酪酰胺储备液。
注意:未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存

2.制备工作溶液

Tyramide工作溶液(1X):
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4时可用于获得最佳性能。
注意:Tyramide工作溶液应立即使用。

3.细胞固定和透化

3.1在室温下用PBS中的3.7%甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1%Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意:组织固定,脱蜡和再水化,根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。

4.过氧化物酶标记

4.1任选:通过在过氧化物酶猝灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,在室温下用PBS冲洗两次。 
4.2可选:如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白,建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液,加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次,每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次,每次5分钟。

5.酪酰胺标记

5.1为每个样品准备并应用100μL酪酰胺工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。
注意:如果您观察到非特异性信号,可以缩短酪酰胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪酰胺。
5.2用PBS冲洗三次。

6.荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂,如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪酰胺标签的信号。

表1.推荐用于核复染的产品

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 Nuclear Blue DCS1 350/461
17550 Nuclear Green DCS1 503/526
17551 Nuclear Orange DCS1 528/576
17552 Nuclear Red DCS1 642/660

说明书
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Cy7 酪胺 货号11064-AAT Bioquest荧光染料

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Cy7 酪胺

Cy7 酪胺

Cy7 酪胺    货号11064 货号 11064 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2388
Ex (nm) 756 Em (nm) 779
分子量 903.21 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11064

产品名称:Cy7 酪胺

规格:1mg

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:903.21

外观:固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):756

发射波长(nm):779

 

产品介绍

酪胺信号放大 (TSA) 已被证明是一种特别通用且功能强大的酶信号放大技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA 基于 HRP 的能力,在低浓度过氧化氢存在下,将标记的含酪胺的底物转化为氧化的、高反应性自由基,该自由基可以与 HRP 处或附近的酪氨酸残基共价结合。在免疫组织化学应用中,TSA 方法的灵敏度增强可以增加一抗稀释度以减少非特异性背景信号,并且可以克服低水平目标表达引起的弱免疫标记。 Cy7 tyramide 包含Cy7 荧光团,可以使用标准 Cy7 滤波片组轻松检测。

点击查看光谱

说明书
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生物素酪胺 CAS 41994-02-9 货号45350-AAT Bioquest荧光染料

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生物素酪胺 CAS 41994-02-9

生物素酪胺 CAS 41994-02-9

生物素酪胺 CAS 41994-02-9    货号45350 货号 45350 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1200
Ex (nm) Em (nm)
分子量 363.48 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:45350

产品名称:生物素酪胺

CAS:41994-02-9

规格:5mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:363.48

溶剂:DMSO

 

产品介绍

对于许多免疫组织化学(IHC)的应用,传统的酶扩增程序足以实现充分的抗原检测。然而,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。酪胺信号放大技术(TSA)已被证明是一种特别通用和强大的酶放大技术,提高了检测灵敏度。TSA是基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将标记的酪胺底物转化为氧化的、高活性的自由基的能力,该自由基可在HRP处或其附近共价结合酪氨酸残基。这一过程被称为催化报告沉积(CARD),通过每个过氧化物酶标签上的多个酪胺底物的转换所产生的信号放大转化为对低丰度目标的超灵敏检测和使用少量抗体和杂交探针。在免疫组化应用中,TSA法的敏感性增强使原代抗体稀释度增加,以减少非特异性背景信号,并能克服由于固定程序不理想或靶蛋白表达水平低而导致的弱免疫标记。生物素酪胺被认为能在所有TSA试剂中实现最大限度的IHC检测。生物素酪胺已用于免疫组织化学、ELISA、Western blot和原位杂交应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的生物素酪胺。

 

参考文献

High specificity and tight spatial restriction of self-biotinylation by DNA and RNA G-Quadruplexes complexed in vitro and in vivo with Heme.
Authors: Lat, Prince Kumar and Liu, Kun and Kumar, Dev N and Wong, Kenneth K L and Verheyen, Esther M and Sen, Dipankar
Journal: Nucleic acids research (2020)

APEX Peroxidase-Catalyzed Proximity Labeling and Multiplexed Quantitative Proteomics.
Authors: Kalocsay, Marian
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2019): 41-55

Biotinylation and isolation of an RNA G-quadruplex based on its peroxidase-mimicking activity.
Authors: Li, Wei and Zeng, Weiwu and Chen, Yi and Wang, Fang and Wu, Fan and Weng, Xiaocheng and Zhou, Xiang
Journal: The Analyst (2019): 4472-4476

Proximity labeling of cis-ligands of CD22/Siglec-2 reveals stepwise α2,6 sialic acid-dependent and -independent interactions.
Authors: Alborzian Deh Sheikh, Amin and Akatsu, Chizuru and Imamura, Akihiro and Abdu-Allah, Hajjaj H M and Takematsu, Hiromu and Ando, Hiromune and Ishida, Hideharu and Tsubata, Takeshi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2018): 854-859

Identification of Siglec Ligands Using a Proximity Labeling Method.
Authors: Chang, Lanyi and Chen, Yi-Ju and Fan, Chan-Yo and Tang, Chin-Ju and Chen, Yi-Hsiu and Low, Penk-Yeir and Ventura, Albert and Lin, Chun-Cheng and Chen, Yu-Ju and Angata, Takashi
Journal: Journal of proteome research (2017): 3929-3941

Tyramide Signal Amplification Permits Immunohistochemical Analyses of Androgen Receptors in the Rat Prefrontal Cortex.
Authors: Low, Katelyn L and Ma, Chunqi and Soma, Kiran K
Journal: The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society (2017): 295-308

Immunohistochemical Methods for Measuring Tissue Lymphangiogenesis.
Authors: Royston, Daniel J and Clasper, Steven and Jackson, David G
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2016): 35-48

Development of a highly sensitive immunohistochemical method to detect neurochemical molecules in formalin-fixed and paraffin-embedded tissues from autopsied human brains.
Authors: Goto, Satoshi and Morigaki, Ryoma and Okita, Shinya and Nagahiro, Shinji and Kaji, Ryuji
Journal: Frontiers in neuroanatomy (2015): 22

Development of a sensitive ELISA for quantification of three- and four-repeat tau isoforms in tauopathies.
Authors: Luk, Connie and Giovannoni, Gavin and Williams, David R and Lees, Andrew J and de Silva, Rohan
Journal: Journal of neuroscience methods (2009): 34-42

Levels of pregnancy-associated plasma protein A in patients with coronary artery disease.
Authors: Liu, Zhi-Yuan and Zhang, Jin-Ying and Sun, Tong-Wen and Zhang, Yan-Jun and Zhang, Li and Wang, Le-Xin
Journal: Clinical and investigative medicine. Medecine clinique et experimentale (2008): E85-9

说明书
生物素酪胺 CAS 41994-02-9.pdf

Azido-Cy5酪胺 货号11061-AAT Bioquest荧光染料

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Azido-Cy5酪胺

Azido-Cy5酪胺

Azido-Cy5酪胺    货号11061 货号 11061 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 1030.14 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11061

产品名称:Azido-Cy5酪胺

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1030.14

溶剂:DMSO

激发波长(nm):644

发射波长(nm):665

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片组
发射: Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品介绍

Azido-Cy5酪胺是美国AAT Bioquest生产的用于荧光标记的试剂,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现最大的IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物的转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一抗稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Azido-Cy5酪胺含有明亮的Cy5,可以使用标准Cy5过滤器套件轻松检测到。此外,它还包含一个叠加组,可用作点击化学构建块。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Azido-Cy5酪胺。 

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参考文献

Antibody-Driven Proximity Labeling in Fixed Tissues
Authors: Daniel Z Bar, Francis S Collins
Journal: (2019): 73–81

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AF 514 酪胺 货号11071-AAT Bioquest荧光染料

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AF 514 酪胺

AF 514 酪胺

AF 514 酪胺    货号11071 货号 11071 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Slides 价格 2388
Ex (nm) 518 Em (nm) 543
分子量 938.17 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11071

产品名称:AF 514 酪胺

规格:200 Slides

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:938.17

外观:固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):518

发射波长(nm):543

 

产品介绍

酪胺信号放大 (TSA) 已被证明是一种特别通用且功能强大的酶信号放大技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA 基于 HRP 的能力,在低浓度过氧化氢存在下,将标记的含酪胺的底物转化为氧化的、高反应性自由基,该自由基可以与 HRP 处或附近的酪氨酸残基共价结合。在免疫组织化学应用中,TSA 方法的灵敏度增强可以增加一抗稀释度以减少非特异性背景信号,并且可以克服低水平目标表达引起的弱免疫标记。AF 514 酪胺含有 Alexa Fluor® 514 荧光团,可使用标准罗丹明 6G 滤光片组轻松检测(Alexa Fluor® 是 ThermoFisher 的商标)。 AF 514 tyramide 具有强烈的黄绿色荧光。

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相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
AF 594 NHS酯 等同于Alexa Fluor 594 Cat#1830
AF 594 酪胺 Cat#11075

说明书
AF 514 酪胺.pdf