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Helixyte Green ssDNA 试剂 货号17620-AAT Bioquest荧光染料

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Helixyte Green ssDNA 试剂

Helixyte Green ssDNA 试剂

货号 17620 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1000 Tests 价格 2388
Ex (nm) 498 Em (nm) 519
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

合成寡核苷酸用于多种分子生物学技术，例如 DNA 测序、定点诱变、DNA 扩增和原位杂交。测量寡核苷酸和 ssDNA 浓度的最常用技术是测定 260 nm (A260) 处的吸光度。然而，吸光度法受到核酸制剂中常见的各种污染物的极大干扰，包括核苷酸、双链核酸和蛋白质。 Helixyte Green ssDNA 定量试剂是定量 ssDNA 和寡核苷酸的绝佳替代品，它的灵敏度和选择性大大提高。 Helixyte Green ssDNA 试剂是一种带正电荷的荧光探针，它与 ssDNA 的疏水基团结合，通过疏水力、氢键和静电相互作用的协同作用形成高度发光的复合物。 Helixyte Green ssDNA 试剂具有极低的固有荧光，与 ssDNA 结合后固有荧光明显增强。它使研究人员能够使用标准分光光度计和荧光素激发和发射波长对低至 100 pg/mL 的寡核苷酸或 ssDNA (~500 pg/mL) 进行定量。这种灵敏度比吸光度法高出几个数量级。可使用荧光酶标仪检测低至 1 ng/mL 的寡核苷酸或 ssDNA。 Helixyte Green ssDNA 试剂具有从 100 pg/mL 到 1 μg/mL 的较大线性检测范围。

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射： 525nm
Cutoff： 515nm
孔板： 黑色孔板

产品说明书

实验方案

概述

1.添加 100 µL 核酸标准品或测试样品
2.添加 100 µL Helixyte Green ALL溶液
3.在室温下孵育 5-10 分钟
4.检测Ex/Em=490/525 nm 处的荧光强度

注：以下方案是使用 Helixyte Green ssDNA 定量 ssDNA 的示例。打开前让所有成分升至室温。没有关于 Helixyte Green ssDNA 染色剂的致突变性或毒性的数据。由于该试剂与核酸结合，因此应将其视为潜在的诱变剂并小心处理。应特别小心处理 DMSO 原液，因为已知 DMSO 可促进有机分子进入组织。

 

溶液制备
ssDNA 标准溶液
将 10 uL 100 ug/mL ssDNA 标准溶液（未提供）添加到您选择的 190 uL 缓冲液中以获得 5 ug/mL 标准溶液，然后进行 1:3 稀释以获得连续稀释的 ssDNA 标准 (SS2-SS7) .请使用AAT Bioquest连续稀释计算器以方便数据处理。

 

Helixyte Green ssDNA 工作溶液
将 100 μL Helixyte Green ssDNA 试剂加入您选择的 10 mL 缓冲液中，制备 Helixyte™ Green ssDNA 工作溶液。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。
注意：建议在塑料容器而不是玻璃容器中制备工作溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为获得最佳效果，该溶液应在稀释后几小时内使用。
注意：10 mL 的工作溶液对于一个 96 孔板就足够了。
注意：10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 和 0.1 mM EDTA 可用于制备工作溶液和标准品。

 

操作步骤

表 1. ssDNA 标准品和测试样品在纯黑色 96 孔板中的布局。 SS= ssDNA 标准品（SS1 – SS7，1667 至 2.3 ng/mL）； BL=空白控制； TS=测试样品

BL BL TS TS
SS1 SS1 … …
SS2 SS2 … …
SS3 SS3    
SS4 SS4    
SS5 SS5    
SS6 SS6    
SS7 SS7    

 

表2.各孔试剂组成

孔 体积 试剂
SS1-SS7 100ul 连续稀释（1667 至 2.3 ng/mL）
BL 100ul 缓冲液
TS 100ul 样品


1.根据表 1和表 2 中提供的布局准备 ssDNA 标准 (NS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂，而不是 100 μL。
2.将 100 µL Helixyte Green ssDNA 工作溶液加入 ssDNA 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中，使测定体积为 200 µL/孔。 对于 384 孔板，将 25 µL 的 Helixyte Green ssDNA 工作溶液添加到每个孔中，以获得 50 µL/孔的总体积。
3.在室温下避光孵育反应 5 到 10 分钟。
4.使用 Ex/Em = 490/525 nm（Cutoff在 515 nm）处的荧光酶标仪检测荧光增加。

 

图示

Helixyte Green ssDNA 试剂 货号17620

图 1. 使用 Helixyte Green ssDNA 试剂在 96 孔黑色实心板中测量 ssDNA 剂量反应。

 

参考文献

A Synergistic Coreactant for Single-Cell Electrochemiluminescence Imaging: Guanine-Rich ssDNA-Loaded High-Index Faceted Gold Nanoflowers.
Authors: Chen, Ying and Gou, Xiaodan and Ma, Cheng and Jiang, Dechen and Zhu, Jun-Jie
Journal: Analytical chemistry (2021): 7682-7689

A Tryptophan ‘Gate’ in the CRISPR-Cas3 Nuclease Controls ssDNA Entry into the Nuclease Site, That When Removed Results in Nuclease Hyperactivity.
Authors: He, Liu and Matošević, Zoe Jelić and Mitić, Damjan and Markulin, Dora and Killelea, Tom and Matković, Marija and Bertoša, Branimir and Ivančić-Baće, Ivana and Bolt, Edward L
Journal: International journal of molecular sciences (2021)

A comparative study of protein-ssDNA interactions.
Authors: Lin, Maoxuan and Malik, Fareeha K and Guo, Jun-Tao
Journal: NAR genomics and bioinformatics (2021): lqab006

An Optimized Preparation Method for Long ssDNA Donors to Facilitate Quick Knock-In Mouse Generation.
Authors: Inoue, Yukiko U and Morimoto, Yuki and Yamada, Mayumi and Kaneko, Ryosuke and Shimaoka, Kazumi and Oki, Shinji and Hotta, Mayuko and Asami, Junko and Koike, Eriko and Hori, Kei and Hoshino, Mikio and Imayoshi, Itaru and Inoue, Takayoshi
Journal: Cells (2021)

Assessment of AMBER Force Fields for Simulations of ssDNA.
Authors: Oweida, Thomas J and Kim, Ho Shin and Donald, Johnny M and Singh, Abhishek and Yingling, Yaroslava G
Journal: Journal of chemical theory and computation (2021): 1208-1217

Biotechnological production of ssDNA with DNA-hydrolyzing deoxyribozymes.
Authors: Liu, Jin and Gu, Hongzhou
Journal: STAR protocols (2021): 100531

Detection of nucleotides in hydrated ssDNA via 2D h-BN nanopore with ionic-liquid/salt-water interface.
Authors: Lee, Jung Soo and Oviedo, Juan Pablo and Bandara, Yapa Mudiyanselage Nuwan Dhananjaya Yapa and Peng, Xin and Xia, Longsheng and Wang, Qingxiao and Garcia, Kevin and Wang, Jinguo and Kim, Min Jun and Kim, Moon Jae
Journal: Electrophoresis (2021): 991-1002

Dual-Channel Logic Gates Operating on the Chemopalette ssDNA-Ag NCs/GO Nanocomposites.
Authors: Feng, Da-Qian and Liu, Guoliang
Journal: Analytical chemistry (2021)

Efficient influence of ssDNA virus PCV2 replication by CRISPR/Cas9 targeting of the viral genome.
Authors: Shi, Jianli and Zheng, Shuxuan and Wu, Xiaoyan and Peng, Zhe and Li, Chen and Wang, Shuo and Xin, Changxun and Xu, Shaojian and Li, Jun
Journal: Molecular immunology (2021): 63-66

Generation of Fluorescent Versions of Saccharomyces cerevisiae RPA to Study the Conformational Dynamics of Its ssDNA-Binding Domains.
Authors: Kuppa, Sahiti and Pokhrel, Nilisha and Corless, Elliot and Origanti, Sofia and Antony, Edwin
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2021): 151-168

说明书
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Sulfide Green AM 货号21301-AAT Bioquest荧光染料

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Sulfide Green AM

Sulfide Green AM

货号 21301 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 2604
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 ~700 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：21301

产品名称：Sulfide Green AM

规格：10x50ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：~700

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：500

发射波长(nm)：522

 

产品介绍

Sulfide Green AM是用于检测活细胞中硫化氢的荧光探针。 对于活细胞中的硫化物阴离子或硫化氢成像，它具有细胞渗透性。Sulfide Green AM包含疏水性的乙酰氧基甲基酯基，使其具有细胞渗透性。 当Sulfide Green AM进入活细胞时，其AM部分被酯酶切割。 酯酶诱导的Sulfide Green AM水解产生带负电荷的荧光产物，该产物很好地保留在细胞中。 与硫化物或硫化氢反应时，硫化物Green产生与硫化物浓度成比例的强绿色荧光。 Sulfide Green AM激活后可检测细胞中低至nM的硫化物阴离子。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Sulfide Green AM。 

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图示

Sulfide Green AM 货号21301

图1.用SA7测量Na2S剂量反应。 将Na2S标准品在20mM Hepes缓冲液中连续稀释，将20mM Hepes缓冲液中的SF7加入每个孔中，以达到最终浓度10uM。 该测定在室温下孵育60分钟，然后测量Ex / Em ＝ 490 / 530nm，截止值＝ 515nm。

 

参考文献

Angiotensin II downregulates vascular endothelial cell hydrogen sulfide production by enhancing cystathionine gamma-lyase degradation through ROS-activated ubiquitination pathway
Authors: Bai, L., Qi, Y., Chen, S., Wang, J., Tang, C., Du, J., Jin, H., Huang, Y.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2019): 907-912

Construction of a novel cell-trappable fluorescent probe for hydrogen sulfide (H2S) and its bio-imaging application
Authors: Lin, X., Chen, Y., Wang, S., Liu, K., Kong, F.
Journal: Anal Bioanal Chem (2019): se name=”21301.enl” path=”C:UsersaatbiDropbox (AAT Bioquest)Website Working FilesProduct References21301.enl”>21301.enlEndNote3317Lin, X.Chen, Y.Wang, S.Liu, K.Kong, F.State Key Laboratory of Biobased Material and Green Papermaking, Key Laboratory o

Corrigendum to “Synergistic growth inhibition of mouse skin tumors by pomegranate fruit extract and diallyl sulfide: Evidence for inhibition of activated MAPKs/NF-kappaB and reduced cell proliferation” [Food Chem. Toxicol. 49 (2011) 1511-20]
Authors: George, J., Singh, M., Srivastava, A. K., Bhui, K., Shukla, Y.
Journal: Food Chem Toxicol (2019): 110784

Deficiency of the mitochondrial sulfide regulator ETHE1 disturbs cell growth, glutathione level and causes proteome alterations outside mitochondria
Authors: Sahebekhtiari, N., Fern and ez-Guerra, P., Nochi, Z., Carlsen, J., Bross, P., Palmfeldt, J.
Journal: Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis (2019): 126-135

Facile, rapid one-pot synthesis of multifunctional gold nanoclusters for cell imaging, hydrogen sulfide detection and pH sensing
Authors: Gao, P., Li, M., Zhang, Y., Dong, C., Zhang, G., Shi, L., Li, G., Yuan, M., Shuang, S.
Journal: Talanta (2019): 1-11

Haloalkaliphilic microorganisms assist sulfide removal in a microbial electrolysis cell
Authors: Ni, G., Harnawan, P., Seidel, L., Ter Heijne, A., Sleutels, T., Buisman, C. J. N., Dopson, M.
Journal: J Hazard Mater (2019): 197-204

Hydrogen Sulfide Attenuates High Glucose-Induced Human Retinal Pigment Epithelial Cell Inflammation by Inhibiting ROS Formation and NLRP3 Inflammasome Activation
Authors: Wang, P., Chen, F., Wang, W., Zhang, X. D.
Journal: Mediators Inflamm (2019): 8908960

Hydrogen sulfide donor GYY4137 suppresses proliferation of human colorectal cancer Caco-2 cells by inducing both cell cycle arrest and cell death
Authors: Sakuma, S., Minamino, S., Takase, M., Ishiyama, Y., Hosokura, H., Kohda, T., Ikeda, Y., Fujimoto, Y.
Journal: Heliyon (2019): e02244

Hydrogen sulfide enhances the effectiveness of mesenchymal stem cell therapy in rats with heart failure: In vitro preconditioning versus in vivo co-delivery
Authors: Abdelmonem, M., Shahin, N. N., Rashed, L. A., Amin, H. A. A., Shamaa, A. A., Shaheen, A. A.
Journal: Biomed Pharmacother (2019): 108584

Hydrogen sulfide-mediated regulation of cell death signaling ameliorates adverse cardiac remodeling and diabetic cardiomyopathy
Authors: Kar, S., Kambis, T. N., Mishra, P. K.
Journal: Am J Physiol Heart Circ Physiol (2019): H1237-H1252

说明书
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Cyber Green 核酸凝胶染料 [相当于 SYBR® Green] *10,000X DMSO 溶液* 货号17604-AAT Bioquest荧光染料

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Cyber Green 核酸凝胶染料 [相当于 SYBR® Green] *10,000X DMSO 溶液*

Cyber Green 核酸凝胶染料 [相当于 SYBR® Green] *10,000X DMSO 溶液*

Cyber Green 核酸凝胶染料 [相当于 SYBR® Green] *10,000X DMSO 溶液* 货号17604 货号 17604 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ul 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Green 染料是一种绿色荧光核酸染料，可用于qPCR，解链曲线分析，嗜热解旋酶依赖性扩增（tHDA）的实时监测，常规溶液DNA定量和各种凝胶电泳。 DNA结合的Cyber Green 染料的激发和发射光谱非常接近荧光素（FAM）或SYBR®Green，使染料与配备488 nm氩激光的仪器或任何波长区域的可见光激发兼容。 Cyber Green 染料在热和水解方面都非常稳定，在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的，但在与dsDNA结合后变得高度荧光。荧光强度至少比溴化乙锭高一个数量级。此外，DNA / Cyber Green 复合物的荧光量子产率比DNA /溴化乙锭的荧光量子产率高5倍以上。它可以在电泳（预染色）之前，以及在电泳（后染色）之后使用，并且通过毛细管电泳分离染色DNA。它也常用于分子生物学，不含酶（例如：Taq酶，逆转录酶，内切核酸酶，T4连接酶）抑制，并且不干扰Southern blot(Southern印迹杂交)。

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染料特点

高灵敏： 至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍

信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低

操作简单：无须脱色或冲洗

适用范围广：可适用于多种电泳分析

使用方便：不影响其它修饰酶作用

经济：价格便宜

产品说明书

染色方案

        我们发现通过后染色实现了最大的灵敏度，这也消除了染料干扰DNA迁移的可能性。虽然预制方案更方便，但一些DNA样本可能会出现迁移，强烈建议凝胶运行时间不超过2小时。建议使用以下方案。 可能需要进行一些比较以确定哪一个更符合您的需求。

 

1.后染色方案

1.1根据您的标准方案运行凝胶。

1.2通过将10,000X储备试剂稀释到PH 7.5  –  8缓冲液中制备1X Cyber Green™工作溶液（例如，TAE，TBE或TE优选pH8.0）。

注意：在水中制备的染色溶液不如在缓冲液中制备的染色溶液稳定，必须在24小时内使用，以确保最大的染色灵敏度。另外，在pH低于约7.5或高于8.0的缓冲液中制备的染色溶液不太稳定并且显示出降低的染色效力。

1.3将凝胶放入合适的聚丙烯容器中。轻轻加入足量的1X染色溶液浸没凝胶。

注意：不要使用玻璃容器，因为它会吸附染色溶液中的大部分染料。

1.4在室温下轻轻搅拌凝胶约30分钟，避光。

注意：染色溶液可以在黑暗中储存（最好是冷藏）一周，最多重复使用2-3次。

1.5使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

 

2.预染色方案

2.1使用标准方案制备琼脂糖凝胶溶液。

2.2在浇注凝胶前将10,000X Cyber Green™原液试剂以1：10,000稀释到凝胶溶液中并充分混合。

2.3根据您的标准方案运行凝胶。

2.4使用254 nm透射仪或使用长路径绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

 

3.电泳前的DNA染色

3.1在电泳前，用1：10,000稀释的染料（TE，TBE或TAE）孵育DNA至少15分钟。

3.2根据您的标准方案运行凝胶。

3.3使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

 

图示

Cyber Green 核酸凝胶染料 [相当于 SYBR® Green] *10,000X DMSO 溶液* 货号17604

图1.在0.9％琼脂糖/ TBE电泳凝胶中的160 ng 1 kb Plus DNA阶梯（ThermoFisher 10787018）用Cyber​​ Green 和SYBR®Green染色，并使用UVP Bioimaging System用254 nm UV透射仪成像。

 

参考文献

Plasmalemma permeability and necrotic cell death phenotypes after intracerebral hemorrhage in mice
Authors: Zhu X, Tao L, Tejima-M and eville E, Qiu J, Park J, Garber K, Ericsson M, Lo EH, Whalen MJ.
Journal: Stroke (2012): 524

Intra-organ Biodistribution of Gold Nanoparticles Using Intrinsic Two-photon Induced Photoluminescence
Authors: Park J, Estrada A, Schwartz JA, Diagaradjane P, Krishnan S, Dunn AK, Tunnell JW.
Journal: Lasers Surg Med (2010): 630

Screening by imaging: scaling up single-DNA-molecule analysis with a novel parabolic VA-TIRF reflector and noise-reduction techniques
Authors: van ‘t Hoff M, Reuter M, Dryden DT, Oheim M.
Journal: Phys Chem Chem Phys (2009): 7713

Novel anatomic structures in the brain and spinal cord of rabbit that may belong to the Bonghan system of potential acupuncture meridians
Authors: Lee BC, Kim S, Soh KS.
Journal: J Acupunct Meridian Stud (2008): 29

Triplet fraction buildup effect of the DNA-YOYO complex studied with fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Kinjo M.
Journal: Anal Biochem (2007): 87

DNA length evaluation using cyanine dye and fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Tsuruoka M.
Journal: Biomacromolecules (2005): 2703

Implementation of accurate and fast DNA cytometry by confocal microscopy in 3D
Authors: Ploeger LS, Huisman A, van der Gugten J, van der Giezen DM, Belien JA, Abbaker AY, Dullens HF, Grizzle W, Poulin NM, Meijer GA, van Diest PJ.
Journal: Cell Oncol (2005): 225

Green-light transilluminator for the detection without photodamage of proteins and DNA labeled with different fluorescent dyes
Authors: Alba FJ, Bermudez A, Daban JR.
Journal: Electrophoresis (2001): 399

Oxazole yellow homodimer YOYO-1-labeled DNA: a fluorescent complex that can be used to assess structural changes in DNA following formation and cellular delivery of cationic lipid DNA complexes
Authors: Wong M, Kong S, Dragowska WH, Bally MB.
Journal: Biochim Biophys Acta (2001): 61

Photophysical properties of fluorescent DNA-dyes bound to single- and double-stranded DNA in aqueous buffered solution
Authors: Cosa G, Focsaneanu KS, McLean JR, McNamee JP, Scaiano JC.
Journal: Photochem Photobiol (2001): 585

 

相关产品

产品名称 货号 规格
Cyber Green 核酸凝胶染料 10000X DMSO 17590 1ml
Cyber Orange 核酸凝胶染料 10000X DMSO 17595 1ml

说明书
Cyber Green 核酸凝胶染料 [相当于 SYBR® Green] *10,000X DMSO 溶液*.pdf

Peko Green双链核酸染料 货号TJ1701-AAT Bioquest荧光染料

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Peko Green双链核酸染料

Peko Green双链核酸染料

货号 TJ1701 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 1 ml 价格 1750
Ex (nm) 502 Em (nm) 523
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Peko Green 染料是一种新型的dDNA染料。其检测灵敏度高，可检测到pg级DNA。检测范围宽，可跨越4个数量级。特异性好，基本不受ssDNA和RNA的影响，并且可以耐受一定浓度的盐，尿素，已醇，氯仿，去垢剂，蛋白等干扰。对微量的双链DNA进行定量在各种生物学应用中都显得非常重要。例如cDNA文库的构建，亚克隆的DNA片段的纯化，定量DNA扩增产物，在药物中DNA分子残留的测定等。检测核酸浓度最常用的方法就是检测核酸在260nm (A260)处的光吸收，此方法主要的缺点是单链核酸和单核苷酸会产生干扰信号，核酸样品中的杂质也会影向结果。光吸收不能区分DNA和RNA，灵敏度也相对较低（用1cm的比色杯在A260值为0.1时相对应的双链DNA浓度为5μg/mL）。目前使用Peko Green 染料定量检测DNA已经广泛用于生物学检测。

产品说明书

实验方法

1.试剂准备

Peko Green是以1毫升的浓缩液形式保存在无水DMSO（二甲基亚砜）中。实验当天，配制2x Peko Green试剂的工作溶液,用1xTE液（10mM的Tris-HCl，1mM EDTA中，pH值为7.5）按1:200的比例稀释浓缩液。如果要准备好足够的工作液检测20个样品，可在20毫升1xTE加入100μL Peko Green dsDNA定量试剂。由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在一个塑料容器中配制。Peko Green试剂容易光降解，所以应将配好的溶液用箔包主或放置暗处避光保存。溶液最好在配制数小时内使用，以保证最佳结果。

 

2.DNA标准曲线

2.1 标准品工作液的配制：

Sigma小牛胸腺DNA干粉（货号：D4522-1MG）1mg (Tris, NaCL等浓度已成标准体系)，加入1mL双蒸水，配制成1mg/mL的标准工作液。

 

2.2 标准品工作液的稀释：

母液稀释：取10mL(1mg/mL) 标准品工作液加入到990 μLTE溶液中，稀释成10μg/mL。再取10μL（10mg/mL）标准品工作液加入到990 μLTE溶液中，稀释成100ng/mL。

倍比稀释：取800μL(100ng/mL) 标准品工作液加入到200 μLTE溶液中，稀释成80ng/mL（药典规定：荧光染色方法DNA含量在。25-80ng/mL范围线性较好，此方法DNA检出限为0.3ng/mL）。再取500mL（80ng/mL）标准品工作液加入到500 mLTE溶液中，浓度稀释到40ng/mL。然后按倍比稀释成20ng/mL，10ng/mL，5ng/mL，2.5ng/mL，1.25ng/mL，0.625ng/mL的标准品溶液，见表1。

 

表 1标准品工作液及样品排续在一个实心的黑色96孔板*

DS0 DS0 样品 样品
DS1 DS1 … …
DS2 DS2    
DS3 DS3    
DS4 DS4    
DS5 DS5    
DS6 DS6    
DS7 DS7    

*备注: DS= 标准品工作液从0到40ng/mL平行样品

 

3.双链DNA样品分析

3.1倍比稀释后的各梯度标准品溶液，样品，和染料工作液各取100μL混匀，避光室温放置5分钟见表1。

备注: 如果用 384孔板, 则倍比稀释后的各梯度标准品溶液，样品，和染料工作液各取25mL即可。

3.2用荧光酶标仪在激发/发射波长= 490/525 nm（截止波长为510 nm）检测荧光强度。

3.3样品DNA 含量可根据标准品曲线算出。

Cyber Green 10000X水溶液PCR定量 货号17592-AAT Bioquest荧光染料

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Cyber Green 10000X水溶液PCR定量

Cyber Green 10000X水溶液PCR定量

Cyber Green 10000X水溶液PCR定量 货号17592 货号 17592 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 ml 价格 12588
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Green 染料是美国AAT Bioquest生产的一种绿色荧光核酸染料，具有使染料可用于多种应用的功能，包括qPCR，熔解曲线分析，嗜热解旋酶依赖性扩增（tHDA）的实时监测，常规溶液DNA定量和结晶染料的激发和发射光谱与荧光素（FAM）或SYBR®GreenI的激发和发射光谱非常接近，使染料与配备488 nm氩激光器或任何可见光激发波长的仪器兼容。 Green 染料在热和水解方面都非常稳定，在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的，但在与dsDNA结合后变得高度荧光.Cyber Green 染料的独特性质使其在定量实时PCR（qPCR）应用中特别有用。与广泛使用的SYBR Green I相比，Cyber Green 对PCR的抑制作用较小，不太可能引起非特异性扩增。因此，Cyber Green 可以比SYBR Green我高得多的染料浓度使用，从而产生更强大的PCR信号。更重要的是，定量PCR允许的较高的CYber Green 浓度消除了“染料再分布”问题，这可能在PCR后DNA融解曲线分析期间与SYBR Green一起发生。

Cyber Green 20X水溶液专为qPCR使用而配制。可以使用现有的SYBR Green I或FAM光学设置在任何商业实时PCR循环仪上监测PCR反应。下面提供的qPCR协议用于使用常规非热启动Taq的PCR。使用热启动Taq可能需要在离子强度和pH方面对PCR缓冲液组成进行一些调整，以最好地利用Cyber Green 。例如，化学修饰的Taq，例如AmpliTaq Gold，可能更喜欢低低浓度的氯化钾或不含KCl的和较高的的Tris浓度（高达50mM的）。此外，经常加入水溶性溶剂如DMSO或甘油以稳定主混合物。可能需要根据所用的酶优化这些组分和pH值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cyber Green 核酸凝胶染料。 

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产品说明书

染色方案

建议将以下方案用于非热启动Taq酶。

1.设置PCR反应如下：

5μL不含Mg+2的10倍的聚合酶缓冲液

2.5μL50mMMgCl2

每种5mM的2mM dNTP

2.5μL20XCyber Green

1-5单位的Taq DNA聚合酶

每种引物0.1-1μM（最终浓度）

双蒸水至终体积为50μL。

 

2.在热循环荧光计上进行实时PCR，并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

注意：使用ABI序列检测系统时，请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。

 

参考文献

Plasmalemma permeability and necrotic cell death phenotypes after intracerebral hemorrhage in mice
Authors: Zhu X, Tao L, Tejima-Mandeville E, Qiu J, Park J, Garber K, Ericsson M, Lo EH, Whalen MJ.
Journal: Stroke (2012): 524

Intra-organ Biodistribution of Gold Nanoparticles Using Intrinsic Two-photon Induced Photoluminescence
Authors: Park J, Estrada A, Schwartz JA, Diagaradjane P, Krishnan S, Dunn AK, Tunnell JW.
Journal: Lasers Surg Med (2010): 630

Screening by imaging: scaling up single-DNA-molecule analysis with a novel parabolic VA-TIRF reflector and noise-reduction techniques
Authors: van ‘t Hoff M, Reuter M, Dryden DT, Oheim M.
Journal: Phys Chem Chem Phys (2009): 7713

Novel anatomic structures in the brain and spinal cord of rabbit that may belong to the Bonghan system of potential acupuncture meridians
Authors: Lee BC, Kim S, Soh KS.
Journal: J Acupunct Meridian Stud (2008): 29

Triplet fraction buildup effect of the DNA-YOYO complex studied with fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Kinjo M.
Journal: Anal Biochem (2007): 87

DNA length evaluation using cyanine dye and fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Tsuruoka M.
Journal: Biomacromolecules (2005): 2703

Implementation of accurate and fast DNA cytometry by confocal microscopy in 3D
Authors: Ploeger LS, Huisman A, van der Gugten J, van der Giezen DM, Belien JA, Abbaker AY, Dullens HF, Grizzle W, Poulin NM, Meijer GA, van Diest PJ.
Journal: Cell Oncol (2005): 225

Green-light transilluminator for the detection without photodamage of proteins and DNA labeled with different fluorescent dyes
Authors: Alba FJ, Bermudez A, Daban JR.
Journal: Electrophoresis (2001): 399

Oxazole yellow homodimer YOYO-1-labeled DNA: a fluorescent complex that can be used to assess structural changes in DNA following formation and cellular delivery of cationic lipid DNA complexes
Authors: Wong M, Kong S, Dragowska WH, Bally MB.
Journal: Biochim Biophys Acta (2001): 61

Photophysical properties of fluorescent DNA-dyes bound to single- and double-stranded DNA in aqueous buffered solution
Authors: Cosa G, Focsaneanu KS, McLean JR, McNamee JP, Scaiano JC.
Journal: Photochem Photobiol (2001): 585

说明书
Cyber Green 10000X水溶液PCR定量 .pdf