Cell Meter VX450固定化细胞活性染料 货号22540-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter VX450固定化细胞活性染料

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料    货号22540 货号 22540 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2472
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22540

产品名称:Cell Meter VX450固定化细胞活性染料

规格:200 Tests

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

激发波长(nm):406

发射波长(nm):445

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm激光
发射: 525/40nm滤波片
通道: AmCyan通道
荧光显微镜  
激发: 紫色滤波片组
发射: 紫色滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品介绍

从活细胞中区分和排除死细胞可以更清晰地分离和鉴定细胞群。Cell Meter VX450固定化细胞活性染料是一类细胞不可渗透的荧光活性染料,它们经过优化以匹配常见流式细胞仪的主要激发激光,例如350、405、488、633和647 nm。这些染料不渗入活细胞,但渗入膜受损的细胞。它们与含胺和硫醇的蛋白质以及其他细胞成分发生不可逆的反应。由于具有受损膜的死细胞或固定细胞更容易与Cell Meter VX450固定化细胞活性染料发生反应,因此比具有完整膜的活细胞的染色更亮,因此这些染料可用于评估哺乳动物细胞的活与死状态。使用这些染料时,需要考虑一些因素,例如,每种染料的滴定,以确保活细胞几乎没有染色。Cell Meter VX450固定化细胞活性染料经过优化,可以在405 nm的紫色激光激发下以450 nm的波长发射。与其他商业上类似的活性染料相比,这种固定化细胞活性染料更加耐用、稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter VX450固定化细胞活性染料。 

点击查看光谱

 

图示

 

 

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料    货号22540

图1.通过Cell Meter 固定化活性染料检测Jurkat细胞活性。处理Jurkat细胞并用Cell Meter VX450(Cat#22540)染色,然后固定在3.7%甲醛中并通过流式细胞仪进行分析。通过AmCyan通道可以很容易地将死细胞群体(蓝色峰)与活细胞群体(红色峰)区分开,在固定之前和之后都获得了几乎相同的结果。

 

 

参考文献

CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro.
Authors: Terrén, Iñigo and Orrantia, Ane and Vitallé, Joana and Zenarruzabeitia, Olatz and Borrego, Francisco
Journal: Methods in enzymology (2020): 239-255

PGC-1α Regulates Cell Proliferation and Invasion via AKT/GSK-3β/β-catenin Pathway in Human Colorectal Cancer SW620 and SW480 Cells.
Authors: Yun, Seong-Hoon and Park, Joo-In
Journal: Anticancer research (2020): 653-664

The miR-3940-5p inhibits cell proliferation of gingival mesenchymal stem cells.
Authors: Han, Xiao and Yang, Haoqing and Cao, Yangyang and Ge, Lihua and Han, Nannan and Zhang, Chen and Fan, Zhipeng and Yao, Rui
Journal: Oral diseases (2019): 1363-1373

Evaluation of Cell Proliferation and Apoptosis in Immunotoxicity Testing.
Authors: Nagarkatti, Mitzi and Rieder, Sadiye Amcaoglu and Nagarkatti, Prakash S
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2018): 209-230

Toll-Like Receptor 4 (TLR4)/Cyclooxygenase-2 (COX-2) Regulates Prostate Cancer Cell Proliferation, Migration, and Invasion by NF-κB Activation.
Authors: Wang, Wei and Wang, Jiye
Journal: Medical science monitor : international medical journal of experimental and clinical research (2018): 5588-5597

Gag-Specific CD4 T Cell Proliferation, Plasmacytoid Dendritic Cells, and Ethnicity in Perinatally HIV-1-Infected Youths: The ANRS-EP38-IMMIP Study.
Authors: Scott-Algara, Daniel and Warszawski, Josiane and Chenadec, Jérôme Le and Didier, Céline and Montange, Thomas and Viard, Jean-Paul and Dollfus, Catherine and Avettand-Fenoel, Véronique and Rouzioux, Christine and Blanche, Stéphane and Buseyne, Florence
Journal: AIDS research and human retroviruses (2017): 21-28

Quantitative analysis of cell proliferation by a dye dilution assay: Application to cell lines and cocultures.
Authors: Chung, Soobin and Kim, Seol-Hee and Seo, Yuri and Kim, Sook-Kyung and Lee, Ji Youn
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2017): 704-712

[Myeloid-derived suppressor cells promoted autologous B cell proliferation in rheumatoid arthritis].
Authors: Chen, W and Hu, F L and Liu, H J and Xu, L L and Li, Y N and Li, Z G
Journal: Beijing da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Peking University. Health sciences (2017): 819-823

A comparative study of colorimetric cell proliferation assays in immune cells.
Authors: Koyanagi, Madoka and Kawakabe, So and Arimura, Yutaka
Journal: Cytotechnology (2016): 1489-98

Hypoxia inhibits mesenchymal stem cell proliferation through HIF1α-dependent regulation of P27.
Authors: Kumar, Sanjay and Vaidya, Meenal
Journal: Molecular and cellular biochemistry (2016): 29-38

说明书
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Cell Meter VX500固定化细胞活性染料 货号22542-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter VX500固定化细胞活性染料

Cell Meter VX500固定化细胞活性染料

Cell Meter VX500固定化细胞活性染料    货号22542 货号 22542 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2472
Ex (nm) 433 Em (nm) 498
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22542

产品名称:Cell Meter VX500固定化细胞活性染料

规格:200 Tests

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

激发波长(nm):433

发射波长(nm):498

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405 nm激光
发射: 525/50 nm滤波片
滤波片: Pacific Orange滤波片组

 

产品介绍

从活细胞中区分和排除死细胞可以更清晰地分离和鉴定细胞群。Cell Meter VX500固定化细胞活性染料是一类细胞不可渗透的荧光活性染料,它们经过优化以匹配常见流式细胞仪的主要激发激光,例如350、405、488、633和647 nm。这些染料不渗入活细胞,但渗入膜受损的细胞。它们与含胺和硫醇的蛋白质以及其他细胞成分发生不可逆的反应。由于具有受损膜的死细胞或固定细胞更容易与Cell Meter VX500固定化细胞活性染料发生反应,因此比具有完整膜的活细胞的染色更亮,因此这些染料可用于评估哺乳动物细胞的活与死状态。使用这些染料时,需要考虑一些因素,例如,每种染料的滴定,以确保活细胞几乎没有染色。Cell Meter VX500固定化细胞活性染料经过优化,可以在405 nm的紫色激光激发下以500 nm的波长发射。与其他商业上类似的活性染料相比,这种固定化细胞活性染料更加耐用、稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter VX500固定化细胞活性染料。 

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图示

 

 

Cell Meter VX500固定化细胞活性染料    货号22542

图1.通过Cell Meter 固定化活性染料检测Jurkat细胞活性。处理Jurkat细胞并用Cell Meter VX500(Cat#22542)染色,然后固定在3.7%甲醛中,并通过流式细胞仪进行分析。死细胞群体(蓝色峰)与带有太平洋橙色通道的活细胞群体(红色峰)很容易区分开,在固定之前和之后获得几乎相同的结果。

 

 

参考文献

CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro.
Authors: Terrén, Iñigo and Orrantia, Ane and Vitallé, Joana and Zenarruzabeitia, Olatz and Borrego, Francisco
Journal: Methods in enzymology (2020): 239-255

PGC-1α Regulates Cell Proliferation and Invasion via AKT/GSK-3β/β-catenin Pathway in Human Colorectal Cancer SW620 and SW480 Cells.
Authors: Yun, Seong-Hoon and Park, Joo-In
Journal: Anticancer research (2020): 653-664

The miR-3940-5p inhibits cell proliferation of gingival mesenchymal stem cells.
Authors: Han, Xiao and Yang, Haoqing and Cao, Yangyang and Ge, Lihua and Han, Nannan and Zhang, Chen and Fan, Zhipeng and Yao, Rui
Journal: Oral diseases (2019): 1363-1373

Evaluation of Cell Proliferation and Apoptosis in Immunotoxicity Testing.
Authors: Nagarkatti, Mitzi and Rieder, Sadiye Amcaoglu and Nagarkatti, Prakash S
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2018): 209-230

Toll-Like Receptor 4 (TLR4)/Cyclooxygenase-2 (COX-2) Regulates Prostate Cancer Cell Proliferation, Migration, and Invasion by NF-κB Activation.
Authors: Wang, Wei and Wang, Jiye
Journal: Medical science monitor : international medical journal of experimental and clinical research (2018): 5588-5597

Gag-Specific CD4 T Cell Proliferation, Plasmacytoid Dendritic Cells, and Ethnicity in Perinatally HIV-1-Infected Youths: The ANRS-EP38-IMMIP Study.
Authors: Scott-Algara, Daniel and Warszawski, Josiane and Chenadec, Jérôme Le and Didier, Céline and Montange, Thomas and Viard, Jean-Paul and Dollfus, Catherine and Avettand-Fenoel, Véronique and Rouzioux, Christine and Blanche, Stéphane and Buseyne, Florence
Journal: AIDS research and human retroviruses (2017): 21-28

Quantitative analysis of cell proliferation by a dye dilution assay: Application to cell lines and cocultures.
Authors: Chung, Soobin and Kim, Seol-Hee and Seo, Yuri and Kim, Sook-Kyung and Lee, Ji Youn
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2017): 704-712

[Myeloid-derived suppressor cells promoted autologous B cell proliferation in rheumatoid arthritis].
Authors: Chen, W and Hu, F L and Liu, H J and Xu, L L and Li, Y N and Li, Z G
Journal: Beijing da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Peking University. Health sciences (2017): 819-823

A comparative study of colorimetric cell proliferation assays in immune cells.
Authors: Koyanagi, Madoka and Kawakabe, So and Arimura, Yutaka
Journal: Cytotechnology (2016): 1489-98

Hypoxia inhibits mesenchymal stem cell proliferation through HIF1α-dependent regulation of P27.
Authors: Kumar, Sanjay and Vaidya, Meenal
Journal: Molecular and cellular biochemistry (2016): 29-38

说明书
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Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒 货号22781-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒

货号 22781 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1000 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青,接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时,被还原成粉红色荧光染料(试卤灵);通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测,用本试剂盒比用其他检测法(例如,MTT)具有更高的灵敏度;因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析,并且能进行长时间保温(例如24~48小时)。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度(<100 CHO细胞),非放射性和无需洗脱,这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选,与许多化合物不同的是,它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中,每孔用试剂20ul,本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测;384微孔板中,每孔加试剂10ul,本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液(组分A)
3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(底部读取模式)(截止= 570 nm)

 

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中,并在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(例如24,48或96小时)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板,建议的总体积为100μL,对于384孔板,建议的总体积为50μL。

 

2.对照组设置
2.1阳性对照:含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。
2.2阴性对照:含有细胞但不含有测试化合物。
2.3载体对照:含有细胞和用于递送测试化合物的载体。
2.4非细胞对照:含有不含细胞的生长培养基。 注意:血清中的LDH会导致背景荧光。
2.5测试化合物对照:含有用于递送测试化合物的载体[Hank’s平衡盐溶液(HBSS)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)]和测试化合物。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意:对于96孔板,将所有对照的总体积与100μL匹配,对于具有生长培养基的384孔板,将所有对照的总体积与50μL相匹配。
 
3.将测定溶液(组分A)预热至37°C,并在开始实验前彻底混合。

4.向每个孔中加入20μL/孔(96孔板)或10μL/孔(384孔板)的测定溶液(组分A)。 轻轻摇动平板30秒,混合试剂。

5.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-24小时,避光。 注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 由于刃天青可以转化为无色二氢呋喃,因此不推荐极长的孵育时间。

6.在Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)下用荧光酶标仪(底部读取模式)监测荧光强度。

 
数据分析
        从含有细胞的那些孔的值中减去来自非细胞对照孔的背景荧光读数。注意:空白孔的背景荧光可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。每个孔中的荧光读数表示该孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比:
%细胞活力= 100×(Fsample-Fo)/(Fctrl-Fo)
Fsample是在测试化合物存在下的荧光读数。
Fctrl是不存在测试化合物(载体对照)时的荧光读数。
Fo是平均背景(非细胞对照)荧光强度。

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒   货号22781
图1.用Cell Meter 荧光细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至10,000细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液(组分A)在37℃下孵育3小时。 用NOVOstar仪器(BMG Labtech)在Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)下测量荧光强度。 荧光强度与所示的细胞数呈线性关系(R2 = 0.998)。

 

参考文献

A fluorometric study of relative ocular lens cytosensitivity to multipurpose contact lens solutions using the resazurin assay method
Authors: Oriowo MO.
Journal: Toxicol In Vitro (2006): 1548

A resazurin-based biosensor for organic pollutants
Authors: Tizzard AC, Bergsma JH, Lloyd-Jones G.
Journal: Biosens Bioelectron (2006): 759

Application of the resazurin microtitre assay for detection of multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Algiers
Authors: Nateche F, Martin A, Baraka S, Palomino JC, Khaled S, Portaels F.
Journal: J Med Microbiol (2006): 857

Determination of the diagnostic value of the resazurin reduction assay for evaluating boar semen by receiver operating characteristic analysis
Authors: Zrimsek P, Kosec M, Kunc J, Mrkun J.
Journal: Asian J Androl (2006): 343

Development and application of a resazurin-based biomass activity test for activated sludge plant management
Authors: McNicholl BP, McGrath JW, Quinn JP.
Journal: Water Res. (2006)

Development of resazurin microtiter assay for drug sensibility testing of Trypanosoma cruzi epimastigotes
Authors: Rolon M, Vega C, Escario JA, Gomez-Barrio A.
Journal: Parasitol Res (2006): 103

Evaluation of the resazurin microtiter assay for rapid detection of ofloxacin resistance in M. tuberculosis
Authors: Umubyeyi AN, Martin A, Zissis G, Struelens M, Karita E, Portaels F.
Journal: Int J Tuberc Lung Dis (2006): 808

Rapid susceptibility test for Mycobacterium tuberculosis to isoniazid and rifampin with resazurin method in screw-cap tubes
Authors: Coban AY, Cekic Cihan C, Bilgin K, Uzun M, Akgunes A, Cetinkaya E, Durupinar B.
Journal: J Chemother (2006): 140

Comparative evaluation of the nitrate reduction assay, the MTT test, and the resazurin microtitre assay for drug susceptibility testing of clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis
Authors: Montoro E, Lemus D, Echemendia M, Martin A, Portaels F, Palomino JC.
Journal: J Antimicrob Chemother (2005): 500

Detection of mitochondrial respiratory dysfunction in circulating lymphocytes using resazurin
Authors: Abu-Amero KK, Bosley TM.
Journal: Arch Pathol Lab Med (2005): 1295

 

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产品名称 货号
Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒 Cat#22780

说明书
Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒.pdf

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒 货号22782-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒

货号 22782 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5000 Tests 价格 10548
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青,接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时,被还原成粉红色荧光染料(试卤灵);通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测,用本试剂盒比用其他检测法(例如,MTT)具有更高的灵敏度;因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析,并且能进行长时间保温(例如24~48小时)。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度(<100 CHO细胞),非放射性和无需洗脱,这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选,与许多化合物不同的是,它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中,每孔用试剂20ul,本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测;384微孔板中,每孔加试剂10ul,本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液(组分A)
3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(底部读取模式)(截止= 570 nm)

 

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中,并在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(例如24,48或96小时)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板,建议的总体积为100μL,对于384孔板,建议的总体积为50μL。

 

2.对照组设置
2.1阳性对照:含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。
2.2阴性对照:含有细胞但不含有测试化合物。
2.3载体对照:含有细胞和用于递送测试化合物的载体。
2.4非细胞对照:含有不含细胞的生长培养基。 注意:血清中的LDH会导致背景荧光。
2.5测试化合物对照:含有用于递送测试化合物的载体[Hank’s平衡盐溶液(HBSS)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)]和测试化合物。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意:对于96孔板,将所有对照的总体积与100μL匹配,对于具有生长培养基的384孔板,将所有对照的总体积与50μL相匹配。
 
3.将测定溶液(组分A)预热至37°C,并在开始实验前彻底混合。

4.向每个孔中加入20μL/孔(96孔板)或10μL/孔(384孔板)的测定溶液(组分A)。 轻轻摇动平板30秒,混合试剂。

5.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-24小时,避光。 注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 由于刃天青可以转化为无色二氢呋喃,因此不推荐极长的孵育时间。

6.在Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)下用荧光酶标仪(底部读取模式)监测荧光强度。

 
数据分析
        从含有细胞的那些孔的值中减去来自非细胞对照孔的背景荧光读数。注意:空白孔的背景荧光可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。每个孔中的荧光读数表示该孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比:
%细胞活力= 100×(Fsample-Fo)/(Fctrl-Fo)
Fsample是在测试化合物存在下的荧光读数。
Fctrl是不存在测试化合物(载体对照)时的荧光读数。
Fo是平均背景(非细胞对照)荧光强度。

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒   货号22782
图1.用Cell Meter 荧光细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至10,000细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液(组分A)在37℃下孵育3小时。 用NOVOstar仪器(BMG Labtech)在Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)下测量荧光强度。 荧光强度与所示的细胞数呈线性关系(R2 = 0.998)。

 

参考文献

A fluorometric study of relative ocular lens cytosensitivity to multipurpose contact lens solutions using the resazurin assay method
Authors: Oriowo MO.
Journal: Toxicol In Vitro (2006): 1548

A resazurin-based biosensor for organic pollutants
Authors: Tizzard AC, Bergsma JH, Lloyd-Jones G.
Journal: Biosens Bioelectron (2006): 759

Application of the resazurin microtitre assay for detection of multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Algiers
Authors: Nateche F, Martin A, Baraka S, Palomino JC, Khaled S, Portaels F.
Journal: J Med Microbiol (2006): 857

Determination of the diagnostic value of the resazurin reduction assay for evaluating boar semen by receiver operating characteristic analysis
Authors: Zrimsek P, Kosec M, Kunc J, Mrkun J.
Journal: Asian J Androl (2006): 343

Development and application of a resazurin-based biomass activity test for activated sludge plant management
Authors: McNicholl BP, McGrath JW, Quinn JP.
Journal: Water Res. (2006)

Development of resazurin microtiter assay for drug sensibility testing of Trypanosoma cruzi epimastigotes
Authors: Rolon M, Vega C, Escario JA, Gomez-Barrio A.
Journal: Parasitol Res (2006): 103

Evaluation of the resazurin microtiter assay for rapid detection of ofloxacin resistance in M. tuberculosis
Authors: Umubyeyi AN, Martin A, Zissis G, Struelens M, Karita E, Portaels F.
Journal: Int J Tuberc Lung Dis (2006): 808

Rapid susceptibility test for Mycobacterium tuberculosis to isoniazid and rifampin with resazurin method in screw-cap tubes
Authors: Coban AY, Cekic Cihan C, Bilgin K, Uzun M, Akgunes A, Cetinkaya E, Durupinar B.
Journal: J Chemother (2006): 140

Comparative evaluation of the nitrate reduction assay, the MTT test, and the resazurin microtitre assay for drug susceptibility testing of clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis
Authors: Montoro E, Lemus D, Echemendia M, Martin A, Portaels F, Palomino JC.
Journal: J Antimicrob Chemother (2005): 500

Detection of mitochondrial respiratory dysfunction in circulating lymphocytes using resazurin
Authors: Abu-Amero KK, Bosley TM.
Journal: Arch Pathol Lab Med (2005): 1295

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒 Cat#22780

说明书
Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒.pdf

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒 货号22782-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒

货号 22782 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5000 Tests 价格 10548
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青,接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时,被还原成粉红色荧光染料(试卤灵);通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测,用本试剂盒比用其他检测法(例如,MTT)具有更高的灵敏度;因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析,并且能进行长时间保温(例如24~48小时)。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度(<100 CHO细胞),非放射性和无需洗脱,这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选,与许多化合物不同的是,它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中,每孔用试剂20ul,本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测;384微孔板中,每孔加试剂10ul,本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液(组分A)
3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(底部读取模式)(截止= 570 nm)

 

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中,并在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(例如24,48或96小时)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板,建议的总体积为100μL,对于384孔板,建议的总体积为50μL。

 

2.对照组设置
2.1阳性对照:含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。
2.2阴性对照:含有细胞但不含有测试化合物。
2.3载体对照:含有细胞和用于递送测试化合物的载体。
2.4非细胞对照:含有不含细胞的生长培养基。 注意:血清中的LDH会导致背景荧光。
2.5测试化合物对照:含有用于递送测试化合物的载体[Hank’s平衡盐溶液(HBSS)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)]和测试化合物。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意:对于96孔板,将所有对照的总体积与100μL匹配,对于具有生长培养基的384孔板,将所有对照的总体积与50μL相匹配。
 
3.将测定溶液(组分A)预热至37°C,并在开始实验前彻底混合。

4.向每个孔中加入20μL/孔(96孔板)或10μL/孔(384孔板)的测定溶液(组分A)。 轻轻摇动平板30秒,混合试剂。

5.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-24小时,避光。 注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 由于刃天青可以转化为无色二氢呋喃,因此不推荐极长的孵育时间。

6.在Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)下用荧光酶标仪(底部读取模式)监测荧光强度。

 
数据分析
        从含有细胞的那些孔的值中减去来自非细胞对照孔的背景荧光读数。注意:空白孔的背景荧光可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。每个孔中的荧光读数表示该孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比:
%细胞活力= 100×(Fsample-Fo)/(Fctrl-Fo)
Fsample是在测试化合物存在下的荧光读数。
Fctrl是不存在测试化合物(载体对照)时的荧光读数。
Fo是平均背景(非细胞对照)荧光强度。

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒   货号22782
图1.用Cell Meter 荧光细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至10,000细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液(组分A)在37℃下孵育3小时。 用NOVOstar仪器(BMG Labtech)在Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)下测量荧光强度。 荧光强度与所示的细胞数呈线性关系(R2 = 0.998)。

 

参考文献

A fluorometric study of relative ocular lens cytosensitivity to multipurpose contact lens solutions using the resazurin assay method
Authors: Oriowo MO.
Journal: Toxicol In Vitro (2006): 1548

A resazurin-based biosensor for organic pollutants
Authors: Tizzard AC, Bergsma JH, Lloyd-Jones G.
Journal: Biosens Bioelectron (2006): 759

Application of the resazurin microtitre assay for detection of multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Algiers
Authors: Nateche F, Martin A, Baraka S, Palomino JC, Khaled S, Portaels F.
Journal: J Med Microbiol (2006): 857

Determination of the diagnostic value of the resazurin reduction assay for evaluating boar semen by receiver operating characteristic analysis
Authors: Zrimsek P, Kosec M, Kunc J, Mrkun J.
Journal: Asian J Androl (2006): 343

Development and application of a resazurin-based biomass activity test for activated sludge plant management
Authors: McNicholl BP, McGrath JW, Quinn JP.
Journal: Water Res. (2006)

Development of resazurin microtiter assay for drug sensibility testing of Trypanosoma cruzi epimastigotes
Authors: Rolon M, Vega C, Escario JA, Gomez-Barrio A.
Journal: Parasitol Res (2006): 103

Evaluation of the resazurin microtiter assay for rapid detection of ofloxacin resistance in M. tuberculosis
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