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Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 货号22786-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光

货号 22786 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 494 Em (nm) 514
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活性检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 使用一种专属型染料，一旦进入活细胞中，其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物，可以轻易地进入完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解弱荧光性底物，产生具有强烈荧光的亲水性产物，并且可以在保持在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系，因此酯酶水解荧光底物形成的产物的荧光强度与活细胞数量相关。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比四唑盐或者基于Alarmar Blue的检测更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。它在许多研究中非常有用，包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行500次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。 

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适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射： 525nm
cutoff： 515nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物制备细胞
添加相同体积的CytoCalcein Green，AM工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
在室温或37°C孵育1小时
检测荧光强度

 

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein Green，AM原液：
将20μLDMSO（组分B）加入到CytoCalcein green，AM（组分A）的小瓶中，并充分混合以制备CytoCalcein green，AM储备溶液。 注意：20μL的CytoCalcein green，AM原液足以用于一个平板。 避光。 存放时，密封管。

 

2.工作溶液配制

将全部内容物（20μL）的CytoCalcein green，AM储备溶液加入10mL测定缓冲液（组分C）中，并充分混合以制备CytoCalcein green，AM工作溶液。 这种CytoCalcein green，AM工作溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：如果CHO细胞等细胞含有促进荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中，最终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 将未使用的丙磺舒储备溶液等分并储存在≤-20℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

 

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔（96孔板）和25μL/孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

2.添加100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein green，AM工作溶液。

3.将板在室温或37°C孵育1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了最佳结果，孵育时间少于4小时）。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意：装载后请勿清洗电池。注意：对于非粘附细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。

4.用Ex / Em = 490 / 525nm的荧光板读数器监测荧光强度。

 

数据分析

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。 

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 货号22786

图1.用Cell Meter Cell Viability Assay Kit测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至5,000个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与100μL/孔的CytoCalcein Blue，AM染料 – 工作溶液在室温下孵育1小时。 用NOVOstar仪器（来自BMG Labtech）在Ex / Em = 490 / 525nm处测量荧光强度。 如所示，荧光强度与细胞数成线性关系（R2 = 1）。

 

参考文献

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 红色荧光 Cat#22783
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22785
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测* Cat#22787

说明书
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Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒 货号22781-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒

货号 22781 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1000 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青，接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时，被还原成粉红色荧光染料（试卤灵）；通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测，用本试剂盒比用其他检测法（例如，MTT）具有更高的灵敏度；因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析，并且能进行长时间保温（例如24~48小时）。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度（<100 CHO细胞），非放射性和无需洗脱，这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选，与许多化合物不同的是，它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂20ul，本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测；384微孔板中，每孔加试剂10ul，本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。 

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适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 590nm
cutoff： 570nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液（组分A）
3.将细胞在37℃，5％CO2培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度（底部读取模式）（截止= 570 nm）

 

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中，并在37℃，5％CO2培养箱中孵育所需的一段时间（例如24,48或96小时）。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板，建议的总体积为100μL，对于384孔板，建议的总体积为50μL。

 

2.对照组设置
2.1阳性对照：含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。
2.2阴性对照：含有细胞但不含有测试化合物。
2.3载体对照：含有细胞和用于递送测试化合物的载体。
2.4非细胞对照：含有不含细胞的生长培养基。 注意：血清中的LDH会导致背景荧光。
2.5测试化合物对照：含有用于递送测试化合物的载体[Hank’s平衡盐溶液（HBSS）或磷酸盐缓冲盐水（PBS）]和测试化合物。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意：对于96孔板，将所有对照的总体积与100μL匹配，对于具有生长培养基的384孔板，将所有对照的总体积与50μL相匹配。
 
3.将测定溶液（组分A）预热至37°C，并在开始实验前彻底混合。

4.向每个孔中加入20μL/孔（96孔板）或10μL/孔（384孔板）的测定溶液（组分A）。 轻轻摇动平板30秒，混合试剂。

5.将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育1-24小时，避光。 注意：适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 由于刃天青可以转化为无色二氢呋喃，因此不推荐极长的孵育时间。

6.在Ex / Em = 540 / 590nm（截止= 570nm）下用荧光酶标仪（底部读取模式）监测荧光强度。

 
数据分析
        从含有细胞的那些孔的值中减去来自非细胞对照孔的背景荧光读数。注意：空白孔的背景荧光可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。每个孔中的荧光读数表示该孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比：
％细胞活力= 100×（Fsample-Fo）/（Fctrl-Fo）
Fsample是在测试化合物存在下的荧光读数。
Fctrl是不存在测试化合物（载体对照）时的荧光读数。
Fo是平均背景（非细胞对照）荧光强度。

        从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒 货号22781
图1.用Cell Meter 荧光细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至10,000细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液（组分A）在37℃下孵育3小时。 用NOVOstar仪器（BMG Labtech）在Ex / Em = 540 / 590nm（截止值= 570nm）下测量荧光强度。 荧光强度与所示的细胞数呈线性关系（R2 = 0.998）。

 

参考文献

A fluorometric study of relative ocular lens cytosensitivity to multipurpose contact lens solutions using the resazurin assay method
Authors: Oriowo MO.
Journal: Toxicol In Vitro (2006): 1548

A resazurin-based biosensor for organic pollutants
Authors: Tizzard AC, Bergsma JH, Lloyd-Jones G.
Journal: Biosens Bioelectron (2006): 759

Application of the resazurin microtitre assay for detection of multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Algiers
Authors: Nateche F, Martin A, Baraka S, Palomino JC, Khaled S, Portaels F.
Journal: J Med Microbiol (2006): 857

Determination of the diagnostic value of the resazurin reduction assay for evaluating boar semen by receiver operating characteristic analysis
Authors: Zrimsek P, Kosec M, Kunc J, Mrkun J.
Journal: Asian J Androl (2006): 343

Development and application of a resazurin-based biomass activity test for activated sludge plant management
Authors: McNicholl BP, McGrath JW, Quinn JP.
Journal: Water Res. (2006)

Development of resazurin microtiter assay for drug sensibility testing of Trypanosoma cruzi epimastigotes
Authors: Rolon M, Vega C, Escario JA, Gomez-Barrio A.
Journal: Parasitol Res (2006): 103

Evaluation of the resazurin microtiter assay for rapid detection of ofloxacin resistance in M. tuberculosis
Authors: Umubyeyi AN, Martin A, Zissis G, Struelens M, Karita E, Portaels F.
Journal: Int J Tuberc Lung Dis (2006): 808

Rapid susceptibility test for Mycobacterium tuberculosis to isoniazid and rifampin with resazurin method in screw-cap tubes
Authors: Coban AY, Cekic Cihan C, Bilgin K, Uzun M, Akgunes A, Cetinkaya E, Durupinar B.
Journal: J Chemother (2006): 140

Comparative evaluation of the nitrate reduction assay, the MTT test, and the resazurin microtitre assay for drug susceptibility testing of clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis
Authors: Montoro E, Lemus D, Echemendia M, Martin A, Portaels F, Palomino JC.
Journal: J Antimicrob Chemother (2005): 500

Detection of mitochondrial respiratory dysfunction in circulating lymphocytes using resazurin
Authors: Abu-Amero KK, Bosley TM.
Journal: Arch Pathol Lab Med (2005): 1295

 

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产品名称 货号
Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒 Cat#22780

说明书
Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒.pdf

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料 货号22540-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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Cell Meter VX450固定化细胞活性染料

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料 货号22540 货号 22540 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2472
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：22540

产品名称：Cell Meter VX450固定化细胞活性染料

规格：200 Tests

储存条件：保存在冰箱-15℃干燥

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

激发波长(nm)：406

发射波长(nm)：445

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 405nm激光
发射： 525/40nm滤波片
通道： AmCyan通道
荧光显微镜  
激发： 紫色滤波片组
发射： 紫色滤波片组
推荐孔板： 黑色透明

 

产品介绍

从活细胞中区分和排除死细胞可以更清晰地分离和鉴定细胞群。Cell Meter VX450固定化细胞活性染料是一类细胞不可渗透的荧光活性染料，它们经过优化以匹配常见流式细胞仪的主要激发激光，例如350、405、488、633和647 nm。这些染料不渗入活细胞，但渗入膜受损的细胞。它们与含胺和硫醇的蛋白质以及其他细胞成分发生不可逆的反应。由于具有受损膜的死细胞或固定细胞更容易与Cell Meter VX450固定化细胞活性染料发生反应，因此比具有完整膜的活细胞的染色更亮，因此这些染料可用于评估哺乳动物细胞的活与死状态。使用这些染料时，需要考虑一些因素，例如，每种染料的滴定，以确保活细胞几乎没有染色。Cell Meter VX450固定化细胞活性染料经过优化，可以在405 nm的紫色激光激发下以450 nm的波长发射。与其他商业上类似的活性染料相比，这种固定化细胞活性染料更加耐用、稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter VX450固定化细胞活性染料。 

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图示

 

 

Cell Meter VX450固定化细胞活性染料 货号22540

图1.通过Cell Meter 固定化活性染料检测Jurkat细胞活性。处理Jurkat细胞并用Cell Meter VX450（Cat＃22540）染色，然后固定在3.7％甲醛中并通过流式细胞仪进行分析。通过AmCyan通道可以很容易地将死细胞群体（蓝色峰）与活细胞群体（红色峰）区分开，在固定之前和之后都获得了几乎相同的结果。

 

 

参考文献

CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro.
Authors: Terrén, Iñigo and Orrantia, Ane and Vitallé, Joana and Zenarruzabeitia, Olatz and Borrego, Francisco
Journal: Methods in enzymology (2020): 239-255

PGC-1α Regulates Cell Proliferation and Invasion via AKT/GSK-3β/β-catenin Pathway in Human Colorectal Cancer SW620 and SW480 Cells.
Authors: Yun, Seong-Hoon and Park, Joo-In
Journal: Anticancer research (2020): 653-664

The miR-3940-5p inhibits cell proliferation of gingival mesenchymal stem cells.
Authors: Han, Xiao and Yang, Haoqing and Cao, Yangyang and Ge, Lihua and Han, Nannan and Zhang, Chen and Fan, Zhipeng and Yao, Rui
Journal: Oral diseases (2019): 1363-1373

Evaluation of Cell Proliferation and Apoptosis in Immunotoxicity Testing.
Authors: Nagarkatti, Mitzi and Rieder, Sadiye Amcaoglu and Nagarkatti, Prakash S
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2018): 209-230

Toll-Like Receptor 4 (TLR4)/Cyclooxygenase-2 (COX-2) Regulates Prostate Cancer Cell Proliferation, Migration, and Invasion by NF-κB Activation.
Authors: Wang, Wei and Wang, Jiye
Journal: Medical science monitor : international medical journal of experimental and clinical research (2018): 5588-5597

Gag-Specific CD4 T Cell Proliferation, Plasmacytoid Dendritic Cells, and Ethnicity in Perinatally HIV-1-Infected Youths: The ANRS-EP38-IMMIP Study.
Authors: Scott-Algara, Daniel and Warszawski, Josiane and Chenadec, Jérôme Le and Didier, Céline and Montange, Thomas and Viard, Jean-Paul and Dollfus, Catherine and Avettand-Fenoel, Véronique and Rouzioux, Christine and Blanche, Stéphane and Buseyne, Florence
Journal: AIDS research and human retroviruses (2017): 21-28

Quantitative analysis of cell proliferation by a dye dilution assay: Application to cell lines and cocultures.
Authors: Chung, Soobin and Kim, Seol-Hee and Seo, Yuri and Kim, Sook-Kyung and Lee, Ji Youn
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2017): 704-712

[Myeloid-derived suppressor cells promoted autologous B cell proliferation in rheumatoid arthritis].
Authors: Chen, W and Hu, F L and Liu, H J and Xu, L L and Li, Y N and Li, Z G
Journal: Beijing da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Peking University. Health sciences (2017): 819-823

A comparative study of colorimetric cell proliferation assays in immune cells.
Authors: Koyanagi, Madoka and Kawakabe, So and Arimura, Yutaka
Journal: Cytotechnology (2016): 1489-98

Hypoxia inhibits mesenchymal stem cell proliferation through HIF1α-dependent regulation of P27.
Authors: Kumar, Sanjay and Vaidya, Meenal
Journal: Molecular and cellular biochemistry (2016): 29-38

说明书
Cell Meter VX450固定化细胞活性染料.pdf

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 货号22785-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 货号22785 货号 22785 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 360 Em (nm) 445
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活性检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活性检测试剂盒 *蓝色荧光* 使用一种专属型染料，一旦进入活细胞中，其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物，可以轻易地进入完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解弱荧光性底物，产生具有强烈荧光的亲水性产物，并且可以在保持在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系，因此酯酶水解荧光底物形成的产物的荧光强度与活细胞数量相关。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比四唑盐或者基于Alarmar Blue的检测更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。它在许多研究中非常有用，包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行500次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。 

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 360nm
发射： 450nm
cutoff： 420nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物制备细胞
添加相同体积的CytoCalcein Blue，AM工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
在室温或37°C孵育1小时
在Ex / Em = 360/450 nm（截止= 420 nm）监测荧光强度（底部读取）

 

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein Blue，AM原液：
将20μLDMSO（组分B）加入到CytoCalcein Blue，AM（组分A）的小瓶中，并充分混合以制备CytoCalcein Blue，AM储备溶液。 注意：20μL的CytoCalcein Blue，AM原液足以用于一个平板。 避光。 存放时，密封管。

 

2.工作溶液配制

将全部内容物（20μL）的CytoCalcein Blue，AM储备溶液加入10mL测定缓冲液（组分C）中，并充分混合以制备CytoCalcein Blue，AM工作溶液。 这种CytoCalcein Blue，AM工作溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：如果CHO细胞等细胞含有促进荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中，最终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 将未使用的丙磺舒储备溶液等分并储存在≤-20℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

 

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔（96孔板）和25μL/孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

2.添加100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein Blue，AM工作溶液。

3.将板在室温或37°C孵育1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了最佳结果，孵育时间少于4小时）。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意：装载后请勿清洗电池。注意：对于非粘附细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。

4.用Ex / Em = 360 / 450nm（截止= 420nm）的荧光板读数器（底部读取）监测荧光强度。

 

数据分析

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。 

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 货号22785

图1.用Cell Meter Cell Viability Assay Kit测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至5,000个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与100μL/孔的CytoCalcein Blue，AM染料 – 工作溶液在室温下孵育1小时。 用NOVOstar仪器（来自BMG Labtech）在Ex / Em = 360 / 450nm处测量荧光强度。 如所示，荧光强度与细胞数成线性关系（R2 = 1）。

 

参考文献

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303

 

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说明书
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Cell Meter 活细胞Caspase 10结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20119-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 活细胞Caspase 10结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 10结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 10结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20119 货号 20119 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 3924
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 活细胞胱天蛋白酶活性测定试剂盒基于胱天蛋白酶的荧光FMK抑制剂。 这些抑制剂是细胞可渗透的和无细胞毒性的。 一旦进入细胞，胱天蛋白酶抑制剂就与活性胱天蛋白酶共价结合。 该Cell Meter 活细胞caspase 10活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 10活化来检测细胞凋亡。 它用于定量凋亡细胞中激活的caspase 10活性，或用于筛选caspase 10抑制剂。 FAM-VAD-FMK，绿色标记试剂，可通过荧光显微镜，流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的胱天蛋白酶10。 该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 见表1
发射： 见表1
荧光显微镜  
激发： 见表1
发射： 见表1
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 见表1
发射： 见表1
通道： 黑色透明
读取模式： 底读模式

表1:参数信息

  FAM-AEVD-FMK 碘化丙啶 hoechst 染料
流式细胞仪 FL1 通道 FL2 通道 FL1 通道
荧光显微镜 FITC 通道 TRITC 通道 DAPI 通道
荧光酶标仪 490/525nm 535/635nm 350/461nm

产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用密度为5×105到2×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

将FAM-YVAD-FMK以1：150的比例加入到细胞溶液中

在室温下孵育1小时

将细胞沉淀，用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 490 / 525nm处分析细胞

注：使用前将所有部件在室温下解冻。

 

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案，将细胞培养至最适于细胞凋亡诱导的密度，但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时，对于每种标记条件，以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子：

1）用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2）用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3）用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4）用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.通过向FAM-YVAD-FMK（组分A）的小瓶中加入50μLDMSO制备150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液。

3.将150×FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液（来自步骤1）以1：150的比例添加到细胞溶液中，并将细胞在37℃，5％CO 2培养箱中孵育1小时。

注1：对于FAM-YVAD-FMK标记，细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2：对于粘附细胞，用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用FAM-YVAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3：适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.将细胞以约200g旋转5分钟，并用1mL洗涤缓冲液（组分B）洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1：FAM-YVAD-FMK是荧光的，因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2：对于分离的细胞，应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样，用于步骤6。

5.如果需要，用DNA染色标记细胞（如用于死细胞的碘化丙锭，或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst）。

6.通过荧光显微镜，流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm处检测荧光强度（对于碘化丙锭，Ex / Em = 535/635 nm;对于Hoechst染料，Ex / Em = 350 / 461纳米）。

6.1对于流式细胞仪，使用FL1通道监测荧光强度（FL2通道用于碘化丙锭染色）。

6.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。将100μL细胞悬浮液置于96孔黑壁/微量滴定板透明底部的每个孔中。

注意：如果需要平衡细胞浓度，调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失，则此调整步骤是可选的。

6.3使用FITC通道在荧光显微镜下观察细胞（用于碘化丙啶染色的TRITC通道，用于Hoechst染色的DAPI通道）。

6.4使用荧光酶标仪，使用Ex / Em = 490 / 525nm（在515nm处截止）底部读取模式监测荧光强度。

 

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

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说明书
Cell Meter 活细胞Caspase 10结合检测试剂盒 绿色荧光 .pdf