线粒体膜电位荧光探针JC-1 CAS 3520-43-2

	货号	22201	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	50 mg	价格	9948
	Ex (nm)	515	Em (nm)	530
	分子量	652.23	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

线粒体膜电位荧光探针JC-1是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体膜电位检测的试剂，JC-1广泛用于通过流式细胞术确定线粒体膜电位。它能够选择性地进入线粒体，并且随着线粒体膜电位增加（超过约80-100mV的值）可逆地将其颜色从绿色变为橙色。这种性质是由于线粒体膜极化后JC-1聚集体的可逆形成导致发射光从530nm（即JC-1单体形式的发射）转变为590nm（即J-聚集形式的发射）。当在490nm处激发时，随着线粒体膜变得更加极化，JC-1的颜色从绿色橙色可逆地变为绿色橙色。使用通常安装在所有流式细胞仪中的过滤器可以检测两种颜色。可以在荧光通道1（FL1）中分析绿色发射，在通道2（FL2）中分析绿色橙色发射。使用JC-1的主要优点是它可以提供定性信息，考虑到从绿色到橙色荧光发射的转变，以及定量信息，考虑到纯荧光强度，可以在FL1和FL2通道中检测到。除了广泛用于流式细胞仪外，JC-1还用于荧光成像。我们已经开发出一种在荧光微孔板平台中使用它的方案。尽管JC-1在许多实验室中被广泛使用，但其水溶性差使得它在某些应用中难以使用。我们的JC-10具有比JC-1更好的水溶性，并且JC-10在一些细胞系中具有甚至优于JC-1的性能。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的线粒体膜电位荧光探针。

产品说明书

JC-1样品分析方案

概述

用测试化合物制备细胞

添加JC-1工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）在室温或37℃孵育1小时

移除JC-1工作溶液

读取 Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光强度

注意：以下是我们推荐的活细胞方案。 该方案仅提供指南，实际情况应根据您的具体需求进行修改。

1.准备JC-1工作解决方案：

1.1在高质量无水DMSO中制备2至10 mM JC-1的储备液。 应及时使用原液; 应将任何剩余的溶液等分并在<-20℃冷冻。

注意：避免反复冻融循环，避免光照。

1.2制备1X JC-1工作溶液：在实验当天，将JC-1固体溶解在DMSO中或将等分试样的JC-1储备溶液解冻至室温。 在Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（pH 7）和0.02％Pluronic®F-127中制备10至30μM1XJC-1工作溶液。 通过votexing很好地混合它们。

注意：JC-1不溶于水，因此它会在溶液中聚集。 建议在将JC-1工作溶液加载到池中之前对其进行过滤。

2.用荧光酶标仪进行JC-1检测：

2.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间（例如，Jurkat细胞可以用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

2.2将100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板的JC-1工作溶液（来自步骤1.2）加入到细胞板中。

2.3将JC-1装载板在37℃，5％CO2培养箱中培养15-60分钟。

注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

2.4从平板上取下JC-1工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。 将100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔HHBS板加回到细胞板中。

2.5监测Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光变化以进行比率分析。

3.用荧光显微镜或流式细胞仪进行JC-1测定：

3.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间（例如，Jurkat细胞可以用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.2离心细胞，每管取1-5×105个细胞。

3.3在500μLJC-1工作溶液中重悬细胞（来自步骤1.2）。

3.4在室温或37°C下孵育10至30分钟，避光。

3.5用您选择的HHBS或缓冲液洗涤细胞。 将细胞重悬于500μLHHBS中以获得每管1-5×10 5个细胞。

3.6用荧光显微镜（使用FITC和TRITC滤光片）或流式细胞仪（使用FL1和FL2通道）观察Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光变化。

参考文献

Cell death mechanisms of the anti-cancer drug etoposide on human cardiomyocytes isolated from pluripotent stem cells
Authors: Harshal Nemade, Umesh Chaudhari, Aviseka Acharya, Jürgen Hescheler, Jan Georg Hengstler, Symeon Papadopoulos, Agapios Sachinidis
Journal: Archives of Toxicology (2018): 1–18

Mesenchymal stem cells ameliorate hyperglycemia-induced endothelial injury through modulation of mitophagy
Authors: Wuzheng Zhu, Yujia Yuan, Guangneng Liao, Lan Li, Jingping Liu, Younan Chen, Jie Zhang, Jingqiu Cheng, Yanrong Lu
Journal: Cell Death & Disease (2018): 837

overexpression of protocadherin 7 inhibits neuronal survival by downregulating Birc5 in vitro
Authors: Huajuan Xiao, Ziling Sun, Jun Wan, Shengtao Hou, Yi Xiong
Journal: Experimental cell research (2018): 71–80

Therapeutic potential of GSK-J4, a histone demethylase KDM6B/JMJD3 inhibitor, for acute myeloid leukemia
Authors: Yunan Li, Mingying Zhang, Mengyao Sheng, Peng Zhang, Zizhen Chen, Wen Xing, Jie Bai, Tao Cheng, Feng-Chun Yang, Yuan Zhou
Journal: Journal of Cancer Research and Clinical Oncology (2018): 1–13

Hyaluronan polymeric micelles for topical drug delivery
Authors: Daniela Smejkalová, Tomáš Muthny, Kristina Nešporová, Martina Hermannová, Eva Achbergerová, Gloria Huerta-Angeles, Marek Svoboda, Martin Cepa, Veronika Machalová, Dominika Luptáková
Journal: Carbohydrate Polymers (2017): 86–96

New ruthenium compounds bearing semicarbazone 2-formylopyridine moiety: Playing with auxiliary ligands for tuning the mechanism of biological activity
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Journal: Journal of Inorganic Biochemistry (2017)

Inhibition of mTOR’s Catalytic Site by PKI-587 Is a Promising Therapeutic Option for Gastroenteropancreatic Neuroendocrine Tumor Disease
Authors: Helma Freitag, Friederike Christen, Florentine Lewens, Irina Grass, Franziska Briest, Sara Iwaszkiewicz, Britta Siegmund, Patricia Grabowski
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Mesenchymal Stem Cells-Conditioned Media Ameliorates Diabetic Endothelial dysfunction by Improving Mitochondrial Bioenergetics via the Sirt1/AMPK/PGC-1α Pathway
Authors: Yujia Yuan, Meimei Shi, Lan Li, Jingping Liu, Bo Chen, Younan Chen, Xingxing An, Shuyun Liu, Ruixi Luo, Dan Long
Journal: Clinical Science (2016): CS20160235

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Authors: Yaqing Chen, Jianchang Qian, Qun He, Hui Zhao, Lourdes Toral-Barza, Celine Shi, Xuesai Zhang, Jiang Wu, Ker Yu
Journal: Oncotarget (2016): 25224–25240

Multiple Active Compounds from Viscum album L. Synergistically Converge to Promote Apoptosis in Ewing Sarcoma
Authors: Monika Twardziok, Susann Kleinsimon, Jana Rolff, Sebastian Jäger, Angelika Eggert, Georg Seifert, Catharina I Delebinski
Journal: PloS one (2016): e0159749

MitoLite 线粒体近红外荧光探针

	货号	22690	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	1272
	Ex (nm)	658	Em (nm)	691
	分子量	N/A	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

MitoLite 线粒体近红外荧光探针是美国AAT Bioquest生产的用于染色线粒体的荧光探针，线粒体是在大多数真核细胞中发现的膜封闭细胞器。线粒体产生大多数细胞中的ATP供应。线粒体除了提供细胞能量外，还参与一系列其他过程，例如信号传导，细胞分化，细胞死亡以及细胞周期和细胞生长的控制。线粒体与多种人类疾病有关，包括线粒体疾病和心脏功能障碍，并可能在衰老过程中起作用。Mitolite NIR FX690设计用于通过近红外荧光标记活细胞中的线粒体。它可能通过线粒体膜电位梯度选择性地积累在线粒体中。对于低背景和高信噪比至关重要的活细胞和组织成像，它是理想的选择。这种荧光的线粒体指示剂带有细胞保留基团，因此可以在线粒体中保留很长时间。此关键功能大大提高了染色效率。它可用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞生存力，细胞凋亡和细胞毒性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的MitoLite 线粒体近红外荧光探针。

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产品说明书

样品实验方案

1.准备线粒体染色溶液：

1.1将MitoLite 染料加热至室温。

1.2通过将20 µL的500 X Mitolite 染料稀释到10 mL的Hanks和20 mm Hepes缓冲液或您选择的缓冲液（HBSS）中来制备染料工作液。

注1：20 µL Mitolite 染料足以用于一块96孔板。 分装并在<-15℃下存储未使用的MitoLite 染料原液。 避免光照，并避免重复的冻融循环。

注2：荧光线粒体指示剂的最佳浓度因具体应用而异。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

2.准备和染色细胞：

2.1对于贴壁细胞：a）在96孔黑色壁/透明底板（100 µL /孔/ 96孔板）中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上生长细胞。 当细胞达到所需的汇合度时，添加等体积的染料工作溶液（来自步骤1.2）。 b）将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。 C）更换染料加载溶液，或用预热的（37°C）汉克斯和20 mM Hepes缓冲液（HBSS）或您选择的缓冲液（例如，含有1：1浓度的生长培养基的缓冲液）洗涤细胞（尤其对于cat＃22679） ）。用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 d）。使用装有所需滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

注意：建议增加标记浓度或孵育时间，以使染料在细胞未充分染色的情况下积累。

2.2对于悬浮细胞：以1000 rpm离心细胞5分钟，以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的（37°C）生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀，并加入等体积的染料工作溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。更换染料加载溶液或用Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HH缓冲液）或您选择的缓冲液（例如具有1：1浓度的生长培养基的缓冲液）洗涤细胞（特别是对于cat＃22679）。用HBSS或生长培养基填充细胞孔。使用装有所需滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

注1：建议增加标记浓度或孵育时间，以使染料在细胞似乎未充分染色的情况下积累。

注2：悬浮细胞可以附着在已经用BDCell-Tak®（BD Biosciences）处理过并被染色为贴壁细胞的盖玻片上（参见步骤2.1）。

参考文献

Co-delivery of VP-16 and Bcl-2-targeted antisense on PEG-grafted oMWCNTs for synergistic in vitro anti-cancer effects in non-small and small cell lung cancer
Authors: Zbynek Heger, Hana Polanska, Sona Krizkova, Jan Balvan, Martina Raudenska, Simona Dostalova, Amitava Moulick, Michal Masarik, Vojtech Adam
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2017): 131–140

Inhibition of heme oxygenase-1 enhances the chemosensitivity of laryngeal squamous cell cancer Hep-2 cells to cisplatin
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Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒 绿色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测线粒体的试剂盒，线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低至中等水平的超氧化物的产生对于许多基本细胞过程的适当调节是至关重要的，包括基因表达，信号转导和肌肉适应耐力运动训练。不受控制的线粒体超氧化物产生可引发细胞氧化损伤，其导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。细胞内线粒体超氧化物的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响非常重要。Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂MitoROS 520来量化活细胞中的超氧化物水平.MitoROS 520具有细胞渗透性，能够快速，有选择地检测线粒体中的超氧化物。它在与超氧化物反应时产生绿色荧光，并且在Ex / Em = 490 / 520nm处可以容易地读取所得荧光。Cell Meter 荧光线粒体超氧化物活性测定试剂盒提供灵敏的一步荧光测定法，用于检测活细胞中的线粒体超氧化物，孵育1小时。该试剂盒可用于流式细胞仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒。 

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样本实验方案

概述

适用于荧光显微镜：

1.在生长培养基中制备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物

3.添加MitoROS™520工作解决方案

4.将细胞在37°C染色60分钟

5.监测Ex / Em = 490 / 530nm处的荧光增加

适用于流式细胞仪：

1.在生长培养基中制备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物

3.在37°C下染色细胞60分钟

4.用流式细胞仪监测荧光强度

操作步骤

对于荧光显微镜/ 96孔微孔板：

1.用10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384孔板）在培养基或所需缓冲液（例如PBS或HHBS）中处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

2.为了诱导超氧化物，将细胞在37℃下孵育一段所需的时间，避光。

注意：我们用5μM抗霉素A（AMA）在37°C处理RAW 264.7巨噬细胞2小时以诱导超氧化物。 

3.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的MitoROS™520工作溶液加入到细胞板中。

4.将细胞在37°C孵育1小时，并使用荧光显微镜和FITC过滤器拍摄图像。

对于流式细胞仪：

1.根据需要处理细胞。

2.为了诱导超氧化物，将细胞在37℃下孵育一段所需的时间，避光。

注意我们用50μM抗霉素A（AMA）在37℃处理Jurkat细胞2小时以诱导超氧化物。

3.将1μL/ 0.5 mL MitoROS™520原液（500X）细胞加入细胞中。

4.将细胞在5％CO 2,37℃培养箱中孵育1小时，并使用FITC通道中的流式细胞仪监测荧光强度（Ex / Em = 488 / 530nm）。

参考文献

Comparison of the detrimental features of microglia and infiltrated macrophages in traumatic brain injury: A study using a hypnotic bromovalerylurea
Authors: Naoki Abe, Mohammed E Choudhury, Minori Watanabe, Shun Kawasaki, Tasuku Nishihara, Hajime Yano, Shirabe Matsumoto, Takehiro Kunieda, Yoshiaki Kumon, Toshihiro Yorozuya
Journal: Glia (2018)

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Cell Navigator 线粒体标记试剂盒是一套荧光成像工具，用于标记细胞器细胞器，如膜，溶酶体，线粒体和细胞核等。活细胞线粒体的选择性标记为研究细胞事件提供了一种强有力的方法。这个特定的试剂盒旨在标记蓝色荧光的活细胞线粒体。该试剂盒使用专有染料，可根据线粒体膜电位梯度选择性累积在线粒体中。线粒体指示剂是一种疏水性化合物，可以很容易地渗透完整的活细胞，并在进入细胞后被困在线粒体中。该荧光线粒体指示剂长时间保留在线粒体中，因为该指示剂携带细胞保留组。这一关键特征显着提高了染色效率。它可以很容易地适用于各种荧光平台，如微孔板分析，免疫细胞化学和流式细胞术。它适用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞活力，细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒为所有重要组分提供了优化的细胞标记方案。它适用于增殖和非增殖细胞，可用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 线粒体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

样品分析

1.准备线粒体染色溶液：

1.1将所有组件温度调至室温

1.2通过将20μLMitolite Deep Red（组分A）稀释到10mL活细胞染色缓冲液（组分B）中制备染料工作溶液

注1：对于一个96孔板，20μL的500X Mitolite Deep Red（组分A）就足够了。在≤-20ºC下等分并储存未使用的500X Mitolite Deep Red。避光，避免反复冻融循环

注2：荧光线粒体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件

2.准备和染色细胞：

2.1对于粘附细胞：在96孔黑色墙壁/透明底板上或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时，加入等体积（例如对于96孔板为100μL，对于384孔板为25μL）的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37ºC，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。用Hanks和20mM Hepes缓冲液（HH缓冲液）或您选择的缓冲液（例如浓度为1：1的生长培养基缓冲液）替换染料上样溶液。

注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞：以1000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热（37℃）生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀，并加入等体积的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37ºC，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。用Hanks和20mM Hepes缓冲液（HH缓冲液）或您选择的缓冲液（例如浓度为1：1的生长培养基缓冲液）替换染料上样溶液。

注1：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2：悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理过的盖玻片上，并作为粘附细胞染色（见步骤2.1）。

参考文献

Co-delivery of VP-16 and Bcl-2-targeted antisense on PEG-grafted oMWCNTs for synergistic in vitro anti-cancer effects in non-small and small cell lung cancer
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Inhibition of heme oxygenase-1 enhances the chemosensitivity of laryngeal squamous cell cancer Hep-2 cells to cisplatin
Authors: Xin Lv, Dong-mei Song, Ying-hao Niu, Bao-shan Wang
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