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活细胞染色 CytoTell 绿色 货号22253-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

活细胞染色 CytoTell 绿色

活细胞染色 CytoTell 绿色

活细胞染色 CytoTell 绿色 货号22253 货号 22253 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1272
Ex (nm) 510 Em (nm) 525
分子量 419.24 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

活细胞染色 CytoTell 绿色是美国AAT Bioquest生产的活细胞染色探针，流式细胞术结合荧光染色是分析异质细胞群体的有力工具。在所有现有的荧光染料中，CFSE是广泛用于活细胞分析的优选细胞增殖指示剂。然而，与使用CFSE监测细胞增殖相关的几个严重问题。 1），CFSE对细胞有很强的毒性。 CFSE与所有氨基无差别地反应，因此改变了许多关键的细胞内蛋白质功能（例如细胞膜GPCR）; 2），CFSE反应慢，不方便使用。第二代细胞的CFSE荧光强度比第一代减少10倍以上。你将不得不等待另一代人开始细胞增殖分析。 3），由于CFSE与培养基成分发生反应，您必须使用流式细胞仪去除细胞分析培养基。 CytoTell Green已开发用于消除这些CFSE限制。根据我们客户对CytoTell Green的反馈，CytoTell UltraGreen是我们最新的改进。它有明显的优势。 1），CytoTell UltraGreen很好地保留在细胞中; 2），CytoTell UltraGreen的反应速度更快，使用起来比CFSE更方便。第一代和第二代之间的荧光强度差距显着减小。随着细胞分裂，CytoTell UltraGreen在子细胞之间平均分布，可以测量为染料荧光强度的连续减半; 3）， CytoTell UltraGreen比CFSE更敏感。最多可以显现9代; 4）， CytoTell UltraGreen比CFSE更稳定。 CytoTell UltraGreen原液可以在室温下储存几天。 CytoTell UltraGreen也可以用于标记细胞的长期追踪。使用双参数图进行分析可以为每一代提供更好的分辨率，特别是在未分裂的细胞和第一代细胞之间。使用标准的含甲醛固定剂和基于皂苷的透化缓冲液，用CytoTell UltraGreen标记的细胞可以被固定和透化以用于细胞内靶标的分析。 CytoTell UltraGreen具有519 nm的峰值激发，并且可以被蓝色（488 nm）激光线激发，从而与FITC滤光片组兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的活细胞染色 CytoTell 绿色。 

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm滤波片
推荐孔板： FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物准备细胞

2.加入1X染料工作液

3.在室温或37 o C 下将染料与细胞一起孵育10至30分钟

4.去除染料工作液

5.使用流式细胞仪和适当的过滤器进行分析

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

CytoTell 染料储备液（500X）：
将500 µL DMSO加入到染料粉瓶中，通过涡旋使其充分混合，得到储备液（500X）。注意：储备溶液应及时使用；应将所有剩余的溶液等分并在<-20 o C下冷冻。避免重复冻融循环，并避光。

 

2.工作溶液配制

CytoTell 染料工作溶液（1X）：
在Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的pH 7缓冲液中以1至500稀释500X DMSO储备溶液（例如1到500的DMX储备溶液稀释到500 µL缓冲液）。涡旋混合均匀。注意：对于不同的细胞类型和/或实验条件，应根据经验确定染料工作溶液的最终浓度。建议以至少十倍以上的浓度进行测试。例如，CytoTell Red在某些细胞类型中使用的量可能要比建议的浓度少得多。

 

样品示例及操作

1.用测试化合物处理细胞所需的时间。

2.离心细胞以获得每管1-5×10 5个细胞。

3.在500 µL CytoTell 染料工作溶液中重悬细胞。可选：可以将500X DMSO储备溶液直接添加到细胞中而无需去除培养基（例如，将500 µL DMSO储备溶液添加到500 µL细胞中）

4.在室温或37°C下，将细胞与染料溶液孵育10至30分钟，避光。

5.从细胞中除去染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中，每管可得到1-5×10 5个细胞。

6.用流式细胞仪或荧光显微镜监测在Ex / Em（参见表1）下的荧光变化。

 

参考文献

Effector T Cell Resistance to Suppression and STAT3 Signaling during the Development of Human Type 1 Diabetes
Authors: Emmi-Leena Ihantola, Tyyne Viisanen, Ahmad M Gazali, Kirsti Näntö-Salonen, Auni Juutilainen, Leena Moilanen, Reeta Rintamäki, Jussi Pihlajamäki, Riitta Veijola, Jorma Toppari
Journal: The Journal of Immunology (2018): ji1701199

Nanocomposite injectable gels capable of self-replenishing regenerative extracellular microenvironments for in vivo tissue engineering
Authors: Koji Nagahama, Naho Oyama, Kimika Ono, Atsushi Hotta, Keiko Kawauchi, Takahito Nishikata
Journal: Biomaterials Science (2018)

Cooperation of innate immune cells during Hepatitis C virus infection
Authors: Volker Klöss
Journal: (2017)

CXCL12–CXCR4 Axis Is Required for Contact-Mediated Human B Lymphoid and Plasmacytoid Dendritic Cell Differentiation but Not T Lymphoid Generation
Authors: Hirohito Minami, Keiki Nagaharu, Yoshiki Nakamori, Kohshi Ohishi, Naoshi Shimojo, Yuki Kageyama, Takeshi Matsumoto, Yuka Sugimoto, Isao Tawara, Masahiro Masuya
Journal: The Journal of Immunology (2017): ji1700054

Interaction and Mutual Activation of Different Innate Immune Cells Is Necessary to Kill and Clear Hepatitis C Virus-Infected Cells
Authors: Volker Klöss, Oliver Grünvogel, Guido Wabnitz, Tatjana Eigenbrod, Stefanie Ehrhardt, Felix Lasitschka, Volker Lohmann, Alexander H Dalpke
Journal: Frontiers in Immunology (2017): 1238

Onionin A inhibits ovarian cancer progression by suppressing cancer cell proliferation and the protumour function of macrophages
Authors: Junko Tsuboki, Yukio Fujiwara, Hasita Horlad, Daisuke Shiraishi, Toshihiro Nohara, Shingo Tayama, Takeshi Motohara, Yoichi Saito, Tsuyoshi Ikeda, Kiyomi Takaishi
Journal: Scientific Reports (2016)

Multiplexing analysis of cell proliferation and cellular functions using a new multicolor panel of fluorescent cell proliferation dyes (P1290)
Authors: Jinfang Liao, Qin Zhao, Yibo Wu, Zhenjun Diwu
Journal: The Journal of Immunology (2013): 119–4

JSRM Code: 013020300010 Full Text PDF
Authors: A Bertolo, D Pavlicek, A Gemperli, M Baur, T Pötzel, J Stoyanov
Journal: Unknown

 

相关产品

产品名称 货号
活细胞染色 CytoTell 蓝色 Cat#22251
活细胞染色 CytoTell 绿色 Cat#22240
活细胞染色 CytoTell 红色 650 Cat#22255

说明书
活细胞染色 CytoTell 绿色.pdf

Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒*绿色荧光**无铜* 货号22305-AAT Bioquest荧光染料

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Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒*绿色荧光**无铜*

Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒*绿色荧光**无铜*

Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒*绿色荧光**无铜* 货号22305 货号 22305 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 6564
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞活力的试剂盒，检测细胞增殖是评估细胞活力、细胞周期和基因毒性的最可靠方法之一。检测细胞增殖的一种基本方法是在细胞生长的 S 期期间在胸苷存在的情况下测量 DNA 合成。 Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒使用 FOL-FdU，一种胸苷类似物。 FOL-FdU 在 DNA 合成过程中被整合到细胞 DNA 中。固定细胞后，通过我们的 Buccutite 标记技术用 MTA-iFluor 488 标记掺入的 FOL-FdU。细胞中形成的 iFluor 488 标记 DNA 在 FITC 通道中可以被荧光仪器检测到。 Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒提供了一种替代抗 BrdU 抗体的检测和 EdU 点击化学检测的方法。它是一种环境友好的无铜检测方法，用于在单细胞水平上检测活性 DNA 合成。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒。 

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适用仪器

荧光显微镜  
激发： 490nm
发射： 525nm
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）

2.对于96孔板，以100 µL /孔添加2X FOL-FdU工作溶液

3.在37ºC下孵育3小时

4.取出培养基，并在室温下用100µL冰冷的90％甲醇的PBS溶液固定细胞15分钟

5.除去固定液并用PBS洗涤3次

6.加入1X iFluor 488-MTA工作溶液（100 µL /孔）并在室温下染色30分钟。

7.除去每个孔中的工作溶液，并用1X洗涤缓冲液洗涤细胞3次。

8.加入100µL 1X洗涤缓冲液/孔，并用FITC滤光片组观察紫外荧光显微镜。

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1.1 FOL-FdU储备溶液（1000X）：
将500 µL DMSO（组分E）添加到FOL-FdU（组分A）中，制成1000X储备溶液。注意：此1000X浓度是使用具有最佳FOL-dU浓度的HeLa细胞开发的。生长培养基，细胞密度，细胞类型变化和其他因素可能会影响标记。我们建议测试一系列FOL-FdU浓度，以确定适合您的细胞类型和实验条件的最佳浓度。

1.2 iFluor 488-MTA储备溶液（400X）：
将50 µL DMSO（组分E）添加到iFluor 488-MTA（组分B）中，制成400 X iFluor 488-MTA储备溶液。

 

2.工作溶液

2.1 X FOL-FdU工作溶液

在完全培养基中将1000X FOL-FdU储备溶液稀释500倍，以制备2X FOL-FdU工作溶液。

2.2 X iFluor 488-MTA工作溶液

将2.5 µL 400X iFluor 488-MTA储备溶液添加到1mL染色缓冲液（组分C）中，以制备1X iFluor 488-MTA工作溶液。

2.3 X洗涤缓冲液

向9mL PBS中加入1mL 10X洗涤缓冲液（组分D），制成1X Washing Buffer。 

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操作步骤

1.准备细胞

1.1对于贴壁细胞：将细胞在生长培养基中以10,000至40,000个细胞/孔/ 100 µL（对于96孔板）过夜培养，以2,500至10,000个细胞/孔/ 20 µL（对于384孔板）过夜培养。

1.2对于非贴壁细胞：离心培养液中的细胞，并将细胞沉淀以1-2 X 106细胞/ ml（对于10个96孔板为10 mL）悬浮在培养液中。注意：应单独评估每个细胞系，以确定最佳细胞密度。

2.用FOL-FdU标记细胞

2.1将等体积的2X FOL-FdU工作溶液添加到含有要处理的细胞的培养基中，以在每个孔中获得1X FOL-FdU溶液。我们不建议更换所有培养基，因为这可能会影响细胞增殖速率。

2.2在最适合细胞类型的条件下孵育细胞3小时。FOL-FdU暴露于细胞的时间可以直接测量合成DNA的细胞。孵育时间取决于细胞生长速率。

3.细胞固定

3.1孵育后，移出培养基，并向每个孔中加入100µL冰冷的PBS中的90％甲醇（未提供，甲醇/ PBS，v / v为90/10），并在室温下孵育15分钟。

3.2除去固定缓冲液，并用PBS清洗每个孔中的细胞两次。

4.染色细胞

4.1在细胞板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的1X iFluor™488-MTA工作溶液。在避光的条件下，将细胞与工作溶液在室温下孵育30分钟。

4.2除去每个孔中的工作溶液。

4.3用1X洗涤缓冲液洗涤细胞3次，洗涤后每孔加入100µL洗涤缓冲液。注意：如果需要Hoechst 33342染色剂，请在1X洗涤缓冲液中制成5-10 µg / ml Hoechst 33342溶液并染色30分钟。

4.4使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

 

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产品名称 货号
Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒 Cat#22320
Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒*红色荧光* Cat#22315

说明书
Bucculite FdU 细胞增殖荧光成像试剂盒*绿色荧光**无铜*.pdf

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 货号22784-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发

货号 22784 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

该试剂盒有多种参数可用于监控细胞活力。试剂盒中使用的专有的紫色激光激发荧光染料是一种疏水性化合物，可轻松渗透完整的活细胞，并在进入活细胞后获得增强的荧光。细胞内酯酶对非荧光底物的水解产生了强烈的蓝色荧光产物，该产物很好地保留在细胞质中。通过非荧光底物的酯酶水解产生的蓝色荧光团具有荧光素的光谱特性。当在405 nm激发时，荧光团在〜450 nm处发出强烈的蓝色荧光。该试剂盒提供了所有必需成分，并具有用于荧光微孔板检测的优化的细胞标记方案。此Cell Meter 细胞活力分析试剂盒为荧光流式细胞术，微孔板和细胞功能的显微镜研究提供了标记细胞的有效工具。它可用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞生存力，细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒适用于增殖和非增殖细胞。

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适用仪器

光吸收酶标仪  
激发： 405nm
发射： 460nm
cutoff： 435nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞
  2. 加入相同体积的CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
  3. 在室温或37°C下孵育1小时
  4. 监测Ex / Em = 405/460 nm（截止= 435 nm）的荧光强度（底部读取模式）

溶液配制

储备溶液配制

CytoCalcein™Violet 450，AM储备溶液：

将20 µL DMSO（组分B）添加到CytoCalcein™Violet 450，AM（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成CytoCalcein™Violet 450，AM储备溶液。注意：20 µL CytoCalcein™Violet 450，AM储备液足以装满一块板。避光。为了存放，请将管子紧紧密封。

工作溶液配制

将CytoCalcein™Violet 450，AM储备溶液的全部内容物（20 µL）加入10 mL的测定缓冲液（组分C）中，并充分混合以制成CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液。该CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液在室温下至少可稳定2小时。注意：如果诸如CHO细胞之类的细胞含有能促进荧光染料随时间渗漏的有机阴离子转运蛋白，则应制备丙磺舒储备溶液并以最终孔内工作浓度范围为1至1的浓度添加到上样缓冲液中。 2.5毫米 分装并保存未使用的丙磺舒储备溶液于≤-20°C。

 

操作步骤

  1. 根据需要用测试化合物处理细胞。注意：添加化合物之前不必洗涤细胞。但是，如果测试的化合物对血清敏感，则可以在添加化合物之前将生长培养基和血清因子吸掉。加入100 µL /孔（96孔板）和25 µL /孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或抽吸后选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。
  2. 加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液。
  3. 在避光的条件下，于室温或37°C下孵育平板1小时。（孵育时间可能是15分钟到过夜。孵育时间少于4小时，我们获得了最佳结果）。 注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。 注意： 加载后请勿洗涤细胞。 注意： 对于非贴壁细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟，然后制动。
  4. 使用荧光板读数器（底部读取模式）在Ex / Em = 405/460 nm（截止= 435 nm）下监控荧光强度。

 

参考文献

Functional evidence that the self-renewal gene NANOG regulates esophageal squamous cancer development
Authors: Li, Deng and Xiang, Xiaocong and Yang, Fei and Xiao, Dongqin and Liu, Kang and Chen, Zhu and Zhang, Ruolan and Feng, Gang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Wang, Jingjing and Fa, Jingjing and Wang, Pengyun and Jia, Xinzhen and Peng, Huixin and Chen, Jing and Wang, Yifan and Wang, Chenhui and Chen, Qiuyun and Tu, Xin and others
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Liu, Peixi and Zhou, Yingjie and An, Qingzhu and Song, Yaying and Chen, Xi and Yang, Guo-Yuan and Zhu, Wei
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Thiebes, Anja Lena and Reddemann, Manuel Armin and Palmer, Johannes and Kneer, Reinhold and Jockenhoevel, Stefan and Cornelissen, Christian Gabriel
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Bogert, Nicolai V and Werner, Isabella and Kornberger, Angela and Meybohm, Patrick and Moritz, Anton and Keller, Till and Stock, Ulrich A and Beiras-Fern and ez, Andres
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Alharbi, Hattan A and Saunders, David MV and Al-Mousa, Ahmed and Alcorn, Jane and Pereira, Alberto S and Martin, Jonathan W and Giesy, John P and Wiseman, Steve B
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Brett, Marie-Elena and Crampton, Alex and ra L and Wood, David K
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Alharbi, Hattan A and Alcorn, Jane and Al-Mousa, Ahmed and Giesy, John P and Wiseman, Steve B
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Thiebes, Anja Lena and Albers, Stefanie and Klopsch, Christian and Jockenhoevel, Stefan and Cornelissen, Christian G
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Wu, Shuai and Huang, Zhuoyao and Yue, Jianhui and Liu, Di and Wang, Ting and Ezanno, Pierre and Ruan, Changshun and Zhao, Xiaoli and Lu, William W and Pan, Haobo
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303

 

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产品名称 货号
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 Cat#22784
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22785
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22786

说明书
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 .pdf

Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22839-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22839 货号 22839 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光是美国AAT Bioquest研发的用于细胞凋亡和坏死检测的试剂盒，该特定试剂盒旨在同时监测细胞凋亡，坏死和健康。细胞凋亡是一种自主细胞拆解的活跃程序化过程，可避免引发炎症。在细胞凋亡中，磷脂酰丝氨酸（PS）被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指标，可以在观察到形态变化之前检测细胞表面上磷脂酰丝氨酸的出现。该试剂盒中使用的PS传感器在与膜PS结合后具有绿色荧光（Ex / Em = 490 / 525nm）。坏死已被描述为由于环境扰动导致的被动，意外细胞死亡，其中炎性细胞内容物不受控制地释放。如通过膜不可渗透的7-AAD（Ex / Em = 546 / 647nm）标记细胞核的能力所证明的，质膜完整性的丧失代表了证明晚期细胞凋亡和坏死的直接方法。此外，该试剂盒还提供活细胞质标记染料，CytoCalcein Violet 450（Ex / Em = 405/450 nm），用于标记活细胞的细胞质。该试剂盒经过优化，可用流式细胞仪或荧光显微镜同时检测细胞凋亡（绿色），坏死（绿色和/或红色）和健康细胞（蓝色）。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的细胞凋亡和坏死检测试剂盒。

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm滤波片
通道： FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.添加膜联蛋白V-FITC测定溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用FL1通道（Ex / Em = 490/525 nm）用流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

2.离心细胞，得到2 – 5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.将2μL膜联蛋白V-FITC（组分A）加入细胞中。

5.可选：加入2μL100X碘化丙啶（成分C）用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟，避光。

7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪（Ex / Em = 490 / 525nm）监测膜联蛋白V-FITC的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-FITC检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-FITC与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，因此导致染色强度增加。

Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22839

图1.使用Cell Meter FITC-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中FITC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO2培养箱中不用（蓝色）或用1μM星形孢菌素（红色）处理4-5小时，然后染色加载30分钟。 使用FL1通道，用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪测量FITC-膜联蛋白V的荧光强度。

 

参考文献

Combined Treatments of Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia with Doxorubicin Promotes Synergistic Anti-Tumoral Activity.
Authors: D Hajj Diab El, P Clerc, N Serhan, D Fourmy, V Gigoux
Journal: Nanomaterials (Basel, Switzerland) (2018)

 

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产品名称 货号
Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 Cat#22837
Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 Cat#22838

说明书
Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 .pdf

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒 货号23171-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒 货号23171 货号 23171 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 300 Slides 价格 5244
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒提供了一种可靠的方法，可以用Tubulite Red对活细胞中的微管蛋白进行荧光成像。该探针可透过活细胞，因此不需要固定细胞即可显像微管蛋白。它可以方便地用于跟踪活细胞中微管蛋白的聚合过程。它的红色光谱波长和良好的细胞渗透性使该探针易于与其他颜色（如GFP表达的细胞）或核染料（如DAPI）一起使用。中性的Tubulite Red容易穿过活细胞的质膜。亲脂性封闭基团一旦进入细胞，就会被酯酶裂解，形成带负电荷的产物，并充分保留在细胞内部。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒。 

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Cy5滤波片
发射： Cy5滤波片
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105到1×106细胞/ mL 的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 准备并向细胞添加Tubulite Red工作溶液
  3. 在37℃孵育30至60分钟
  4. 使用Cy5滤波片组读取荧光强度

注意：开始实验之前，请在室温下解冻每种试剂盒成分。该说明书仅提供指南，实际情况应根据您的特定需求进行修改。

 

溶液配制

储备溶液配制

Tubulite Red储备液（500X）：将25 µL（Cat＃23170）或75 µL（Cat＃23171）DMSO（组分D）加入Tubulite Red（小瓶A）的小瓶中，并充分混合。注意：一次性使用等分试样，并将未使用的储备溶液在-20 ℃的冰箱避光保存，并避免重复冻融循环。

 

工作溶液配制

Tubulite Red工作溶液（1X）：
将2.5 µL Tubulite Red储备溶液和100 µL 25 mM ReadiUse 丙磺舒（组分D）加入1 mL的测定缓冲液（组分B）或自备缓冲液中，混合均匀。注意：我们建议每次都使用新鲜的Tubulite Red工作溶液。工作溶液可以稳定几个小时，不要长时间放置。

 

实验步骤

  1. 根据需要准备细胞样品。
  2. 除去细胞生长培养基，并用PBS（未提供）或自备缓冲液洗涤细胞。（可选）。
  3. 加入100 µL Tubulite Red工作溶液，并在37oC的培养箱中孵育30至60分钟。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。最佳的孵育时间需要根据细胞类型等因素自行测试。
  4. 除去工作溶液，并用PBS或自备缓冲液（2.5mg丙磺舒（从组分C稀释））洗涤细胞两次。
  5. 添加含2.5 mM丙磺舒的测定缓冲液（从组分C稀释）到带测细胞中，并使用Cy5滤光片组在荧光显微镜下检测荧光强度。

 

图示

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒 货号23171

图1.活HeLa细胞中微管蛋白的成像。HeLa细胞与Tubulite red和DAPI（目录＃17507）一起在37℃，5％CO2培养箱中孵育60分钟，然后用荧光显微镜（Cy5滤光片组）拍摄荧光图像。

 

 

说明书
Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒.pdf