Cell Meter 活细胞Caspase 9结合检测试剂盒 绿色荧光

	货号	20117	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	25 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	493	Em (nm)	517
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 活细胞胱天蛋白酶活性测定试剂盒基于胱天蛋白酶的荧光FMK抑制剂。 这些抑制剂是细胞可渗透的和无细胞毒性的。 一旦进入细胞，胱天蛋白酶抑制剂就与活性胱天蛋白酶共价结合。 此Cell Meter 活细胞caspase 9活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 9活化来检测细胞凋亡。 它用于定量凋亡细胞中活化的caspase 9活性，或用于筛选caspase 9抑制剂。 FAM-LEHD-FMK，绿色标记试剂，可通过荧光显微镜，流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的caspase 9。 该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。

点击查看光谱

产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用密度为5×10⁵到2×10⁶个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

将FAM-YVAD-FMK以1：150的比例加入到细胞溶液中

在室温下孵育1小时

将细胞沉淀，用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 490 / 525nm处分析细胞

注：使用前将所有部件在室温下解冻。

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案，将细胞培养至最适于细胞凋亡诱导的密度，但不超过2 x 10⁶个细胞/ mL。同时，对于每种标记条件，以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子：

1）用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2）用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3）用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4）用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.通过向FAM-YVAD-FMK（组分A）的小瓶中加入50μLDMSO制备150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液。

3.将150×FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液（来自步骤1）以1：150的比例添加到细胞溶液中，并将细胞在37℃，5％CO 2培养箱中孵育1小时。

注1：对于FAM-YVAD-FMK标记，细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2：对于粘附细胞，用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用FAM-YVAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3：适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.将细胞以约200g旋转5分钟，并用1mL洗涤缓冲液（组分B）洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1：FAM-YVAD-FMK是荧光的，因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2：对于分离的细胞，应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样，用于步骤6。

5.如果需要，用DNA染色标记细胞（如用于死细胞的碘化丙锭，或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst）。

6.通过荧光显微镜，流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm处检测荧光强度（对于碘化丙锭，Ex / Em = 535/635 nm;对于Hoechst染料，Ex / Em = 350 / 461纳米）。

6.1对于流式细胞仪，使用FL1通道监测荧光强度（FL2通道用于碘化丙锭染色）。

6.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。将100μL细胞悬浮液置于96孔黑壁/微量滴定板透明底部的每个孔中。

注意：如果需要平衡细胞浓度，调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失，则此调整步骤是可选的。

6.3使用FITC通道在荧光显微镜下观察细胞（用于碘化丙啶染色的TRITC通道，用于Hoechst染色的DAPI通道）。

6.4使用荧光酶标仪，使用Ex / Em = 490 / 525nm（在515nm处截止）底部读取模式监测荧光强度。

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

相关产品

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青，接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时，被还原成粉红色荧光染料（试卤灵）；通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测，用本试剂盒比用其他检测法（例如，MTT）具有更高的灵敏度；因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析，并且能进行长时间保温（例如24~48小时）。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度（<100 CHO细胞），非放射性和无需洗脱，这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选，与许多化合物不同的是，它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂20ul，本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测；384微孔板中，每孔加试剂10ul，本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液（组分A）
3.将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度（底部读取模式）（截止= 570 nm）

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中，并在37℃，5％CO₂培养箱中孵育所需的一段时间（例如24,48或96小时）。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板，建议的总体积为100μL，对于384孔板，建议的总体积为50μL。

Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒

	货号	15900	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	405	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂盒，活性氧（ROS）在细胞信号传导和维持生理细胞代谢中是重要的。 过量的ROS损害细胞成分，这些成分与多种疾病相关，包括癌症，代谢紊乱，神经退行性疾病等。产生抗氧化剂，包括酶，大分子和小分子，以对抗ROS诱导的生物体内的损伤。 体液，组织和细胞中抗氧化活性的定量分析提供了重要的生物信息。 我们的Amplite™比色抗氧化检测试剂盒使用ABTS作为抗氧化活性的比色指示剂，基于观察到抗氧化剂能够阻止ABTS（2,2′-连氮基 – 双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）氧化的能力 ABTS +通过辣根过氧化物酶（HRP）和过氧化氢（H2O2）ABTS +，一种可溶性色原，可以在405nm处用分光光度法监测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品/ Trolox（10 µL）
2.添加HRP（20 µL）
3.添加ReadiUse ABTS底物溶液（150 µL）
4.在室温下孵育5分钟
5.监控405 nm处的吸光度

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 辣根过氧化物酶（HRP）储备溶液（2000X）：
向辣根过氧化物酶（组分A）的小瓶中加入1 mL分析缓冲液（组分B）。

1.2 Trolox标准溶液（100毫米）：
将100 µL DMSO加到Trolox瓶中（组分D）。

2.标准溶液配制

Trolox标准
通过使用稀释因子= 2和最高浓度= 1 mM在测定缓冲液（Componenet B）中稀释100 mM Trolox标准溶液来制备Trolox标准溶液。

3.工作溶液配制

将2.5 uL的2000X HRP储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，制成1X HRP工作溶液。

样品操作及实验分析

表1.在透明的96孔微孔板中的Trolox标准品和测试样品的布局。 SD = trolox标准品（SD1-SD7，0.0156至1 mM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表1中的布局，准备trolox标准品（SD），空白对照（BL）和测试样品（TS）（如有必要，在测定缓冲液中稀释样品，使抗氧化剂水平与Trolox处于同一范围内），表2。

2.在Trolox标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入20 µL HRP工作溶液，使总体积为30 µL /孔。

3.向每个孔中加入150 µL ReadiUse ABTS底物溶液（组分C），总体积为180 µL /孔。 注意：避免光照，并在聚丙烯容器中使用。

4.在室温下孵育5分钟。 注意：这5分钟的保温时间是一个指导原则。 可以改变孵育时间以获得更合适的吸光度。

5.使用酶标仪读取405 nm处的吸光度。

参考文献

Fluorescent real-time quantitative measurements of intracellular peroxynitrite generation and inhibition
Authors: Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Jinfang Liao, Ruogu Peng, Yunting Xi, Zhenjun Diwu
Journal: Analytical biochemistry (2017): 44–48

Gene silencing of endothelial von Willebrand Factor attenuates angiotensin II-induced endothelin-1 expression in porcine aortic endothelial cells
Authors: Anar Dushpanova, Silvia Agostini, Enrica Ciofini, Manuela Cabiati, Valentina Casieri, Marco Matteucci, Silvia Del Ry, Aldo Clerico, Sergio Berti, Vincenzo Lionetti
Journal: Scientific Reports (2016)

相关产品

Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青，接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时，被还原成粉红色荧光染料（试卤灵）；通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测，用本试剂盒比用其他检测法（例如，MTT）具有更高的灵敏度；因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析，并且能进行长时间保温（例如24~48小时）。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度（<100 CHO细胞），非放射性和无需洗脱，这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选，与许多化合物不同的是，它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂20ul，本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测；384微孔板中，每孔加试剂10ul，本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液（组分A）
3.将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度（底部读取模式）（截止= 570 nm）

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中，并在37℃，5％CO₂培养箱中孵育所需的一段时间（例如24,48或96小时）。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板，建议的总体积为100μL，对于384孔板，建议的总体积为50μL。

Cell Meter RX780固定化细胞活性染料

	货号	22536	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2472
	Ex (nm)	629	Em (nm)	767
	分子量	1176.38	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：22536

产品名称：Cell Meter RX780固定化细胞活性染料

规格：200 Tests

储存条件：保存在冰箱-15℃干燥

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

激发波长(nm)：629

发射波长(nm)：767

产品介绍

从活细胞中区分和排除死细胞可以更清晰地分离和鉴定细胞群。Cell Meter RX780固定化细胞活性染料是一类细胞不可渗透的荧光活性染料，它们经过优化以匹配常见流式细胞仪的主要激发激光，例如350、405、488、633和647 nm。这些染料不渗入活细胞，但渗入膜受损的细胞。它们与含胺和硫醇的蛋白质以及其他细胞成分发生不可逆的反应。由于具有受损膜的死细胞或固定细胞更容易与Cell Meter RX780固定化细胞活性染料发生反应，因此比具有完整膜的活细胞的染色更亮，因此这些染料可用于评估哺乳动物细胞的活与死状态。使用这些染料时，需要考虑一些因素，例如，每种染料的滴定，以确保活细胞几乎没有染色。Cell Meter RX780固定化细胞活性染料经过优化，可以在633/647 nm的红色激光激发下以780 nm的波长发射。与其他商业上类似的活性染料相比，这种固定化细胞活性染料更加耐用、稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter RX780固定化细胞活性染料。 

点击查看光谱

图示

图1.通过Cell Meter 固定化细胞活性染料检测Jurkat细胞活性。处理Jurkat细胞并用Cell Meter RX780（Cat＃22536）染色，然后固定在3.7％甲醛中，并通过流式细胞仪进行分析。通过APC-Cy7通道可以很容易地将死细胞群体（蓝峰）与活细胞群体（红峰）区分开，在固定之前和之后可获得几乎相同的结果

参考文献

CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro.
Authors: Terrén, Iñigo and Orrantia, Ane and Vitallé, Joana and Zenarruzabeitia, Olatz and Borrego, Francisco
Journal: Methods in enzymology (2020): 239-255

PGC-1α Regulates Cell Proliferation and Invasion via AKT/GSK-3β/β-catenin Pathway in Human Colorectal Cancer SW620 and SW480 Cells.
Authors: Yun, Seong-Hoon and Park, Joo-In
Journal: Anticancer research (2020): 653-664

The miR-3940-5p inhibits cell proliferation of gingival mesenchymal stem cells.
Authors: Han, Xiao and Yang, Haoqing and Cao, Yangyang and Ge, Lihua and Han, Nannan and Zhang, Chen and Fan, Zhipeng and Yao, Rui
Journal: Oral diseases (2019): 1363-1373

Evaluation of Cell Proliferation and Apoptosis in Immunotoxicity Testing.
Authors: Nagarkatti, Mitzi and Rieder, Sadiye Amcaoglu and Nagarkatti, Prakash S
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2018): 209-230

Toll-Like Receptor 4 (TLR4)/Cyclooxygenase-2 (COX-2) Regulates Prostate Cancer Cell Proliferation, Migration, and Invasion by NF-κB Activation.
Authors: Wang, Wei and Wang, Jiye
Journal: Medical science monitor : international medical journal of experimental and clinical research (2018): 5588-5597

Gag-Specific CD4 T Cell Proliferation, Plasmacytoid Dendritic Cells, and Ethnicity in Perinatally HIV-1-Infected Youths: The ANRS-EP38-IMMIP Study.
Authors: Scott-Algara, Daniel and Warszawski, Josiane and Chenadec, Jérôme Le and Didier, Céline and Montange, Thomas and Viard, Jean-Paul and Dollfus, Catherine and Avettand-Fenoel, Véronique and Rouzioux, Christine and Blanche, Stéphane and Buseyne, Florence
Journal: AIDS research and human retroviruses (2017): 21-28

Quantitative analysis of cell proliferation by a dye dilution assay: Application to cell lines and cocultures.
Authors: Chung, Soobin and Kim, Seol-Hee and Seo, Yuri and Kim, Sook-Kyung and Lee, Ji Youn
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2017): 704-712

[Myeloid-derived suppressor cells promoted autologous B cell proliferation in rheumatoid arthritis].
Authors: Chen, W and Hu, F L and Liu, H J and Xu, L L and Li, Y N and Li, Z G
Journal: Beijing da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Peking University. Health sciences (2017): 819-823

A comparative study of colorimetric cell proliferation assays in immune cells.
Authors: Koyanagi, Madoka and Kawakabe, So and Arimura, Yutaka
Journal: Cytotechnology (2016): 1489-98

Hypoxia inhibits mesenchymal stem cell proliferation through HIF1α-dependent regulation of P27.
Authors: Kumar, Sanjay and Vaidya, Meenal
Journal: Molecular and cellular biochemistry (2016): 29-38