胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK 货号13300-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK    货号13300 货号 13300 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1200
Ex (nm) Em (nm)
分子量 467.49 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Z-VAD-FMK是细胞可渗透的不可逆半胱天冬酶抑制剂,与半胱天冬酶蛋白的催化位点结合,可抑制凋亡的诱导。为了抑制细胞凋亡,应在诱导细胞凋亡的同时添加Z-VAD-FMK。该肽在天冬氨酸的P1位置被O-甲基化,提供增强的稳定性和更高的细胞通透性。FMK衍生的肽可作为有效的不可逆抑制剂,而不会增加细胞毒性作用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Z-VAD-FMK。 

产品说明书

样品实验方案

以下是我们推荐的方案,仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。

 

溶液配制

储备溶液配制

Z-VAD-FMK储备溶液配制:在Z-VAD-FMK中添加适量的DMSO,制成2-5 mM Z-VAD-FMK储备液。注意:将未使用的Z-VAD-FMK储备溶液分装在-20°C下。

 

操作步骤

  1. 根据需要处理样品以诱导凋亡。
  2. 添加Z-VAD-FMK。
    注意:我们建议使用最终浓度为10-100 µM的Z-VAD-FMK抑制胱天蛋白酶,例如对caspase-8抑制50 µM。
    注意:孵育的最佳时间和浓度需要通过实验确定。
  3. 根据需要对样品染色。
  4. 用适当的仪器检测荧光强度。 

 

图示

 

 

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK    货号13300

图1.用半胱天冬酶抑制剂Z-VAD-FMK(Cat#13300)抑制Jurkat细胞中的胱天蛋白酶活性。当天,将Jurkat细胞以200,000个细胞/ 90 µL /孔的密度接种在Costar黑色96孔板中。用1 µM星形孢菌素处理细胞5小时。加入Z-VAD-FMK(50 uM)并与星形孢菌素共孵育。用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒(Cat#22816)检测caspase-8活性。用Flexstation 3荧光酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm(截止= 610nm)下测量荧光强度。

 

 

参考文献

Identification of active caspases using affinity-based probes.
Authors: McStay, Gavin P and Green, Douglas R
Journal: Cold Spring Harbor protocols (2014): 856-60

Induction of apoptosis in human renal cell carcinoma cells by vitamin E succinate in caspase-independent manner.
Authors: Wu, Xiu-Xian and Kakehi, Yoshiyuki and Jin, Xing-Hua and Inui, Masashi and Sugimoto, Mikio
Journal: Urology (2009): 193-9

Induction of apoptosis in renal tubular cells by histone deacetylase inhibitors, a family of anticancer agents.
Authors: Dong, Guie and Wang, Lysa and Wang, Cong-Yi and Yang, Tianxin and Kumar, M Vijay and Dong, Zheng
Journal: The Journal of pharmacology and experimental therapeutics (2008): 978-84

Metformin induces apoptosis of pancreatic cancer cells.
Authors: Wang, Luo-Wei and Li, Zhao-Shen and Zou, Duo-Wu and Jin, Zhen-Dong and Gao, Jun and Xu, Guo-Ming
Journal: World journal of gastroenterology (2008): 7192-8

Apoptosis of gastric cancer cell line MKN45 by photodynamic treatment with photofrin.
Authors: Takahira, Kenichiro and Sano, Munetaka and Arai, Hajime and Hanai, Hiroyuki
Journal: Lasers in medical science (2004): 89-94

Non-caspase-mediated apoptosis contributes to the potent cytotoxicity of the enediyne antibiotic lidamycin toward human tumor cells.
Authors: Wang, Zhen and He, Qiyang and Liang, Yunyan and Wang, Daishu and Li, Yi Yang and Li, Diandong
Journal: Biochemical pharmacology (2003): 1767-75

Androgen induced cell death in SHSY5Y neuroblastoma cells expressing wild-type and spinal bulbar muscular atrophy mutant androgen receptors.
Authors: Grierson, A J and Shaw, C E and Miller, C C
Journal: Biochimica et biophysica acta (2001): 13-20

Critical role for caspases 3 and 8 in neutrophil but not eosinophil apoptosis.
Authors: Daigle, I and Simon, H U
Journal: International archives of allergy and immunology (2001): 147-56

说明书
胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK.pdf

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK 货号13476-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK    货号13476 货号 13476 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 1272
Ex (nm) 412 Em (nm) 505
分子量 708.19 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,FAM- VAD具有绿色荧光细胞渗透性抑制靶向胱天蛋白酶1 ,2,3 ,6,8 ,9或10 。一旦进入细胞,所述抑制剂共价结合胱天蛋白酶,产生绿色荧光。当加入到细胞群体中, FAM- VAD -FMK探针进入每个细胞与共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的VAD-FMK,从而抑制酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内,而任何未结合的试剂将扩散出细胞,并冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 – 孔板的基于荧光,荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。该探头具有光谱性质类似于Pacific Blue®和BD Horizon V450 ,Pacific Blue这样的过滤器®和BD Horizon V450可以方便的用流式细胞仪或显微镜使用。该探头是特别设计用于多色检测半胱氨酸蛋白酶与紫激光装备 。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK。 

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产品说明书

样品操作及分析

以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Suppression of human T cell proliferation by the caspase inhibitors, z-VAD-FMK and z-IETD-FMK is independent of their caspase inhibition properties
Authors: Lawrence CP, Chow SC.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol. (2012)

[Inhibition of elicitation of allergic contact dermatitis by topical use of Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment in mice]
Authors: Li YY, Yan CL.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2012): 1992

Intracochlear perfusion of leupeptin and z-VAD-FMK: influence of antiapoptotic agents on gunshot-induced hearing loss
Authors: Abaamrane L, Raffin F, Schmerber S, Sendowski I.
Journal: Eur Arch Otorhinolaryngol (2011): 987

Plasmodium falciparum metacaspase PfMCA-1 triggers a z-VAD-fmk inhibitable protease to promote cell death
Authors: Meslin B, Beavogui AH, Fasel N, Picot S.
Journal: PLoS One (2011): e23867

Structure of human caspase-6 in complex with Z-VAD-FMK: New peptide binding mode observed for the non-canonical caspase conformation
Authors: Muller I, Lamers MB, Ritchie AJ, Dominguez C, Munoz-Sanjuan I, Kiselyov A.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2011): 5244

Pretreatment with pancaspase inhibitor (Z-VAD-FMK) delays but does not prevent intraperitoneal heat-killed group B Streptococcus-induced preterm delivery in a pregnant mouse model
Authors: Equils O, Moffatt-Blue C, Ishikawa TO, Simmons CF, Ilievski V, Hirsch E.
Journal: Infect Dis Obstet Gynecol (2009): 749432

[Attenuation of allergic contact dermatitis by Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment with mice]
Authors: Li YY, Yan CL, Xu W.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2008): 3153

Bodipy-VAD-Fmk, a useful tool to study yeast peptide N-glycanase activity
Authors: Witte MD, Descals CV, de Lavoir SV, Florea BI, van der Marel GA, Overkleeft HS.
Journal: Org Biomol Chem (2007): 3690

Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
Authors: Heng BC, Clement MV, Cao T.
Journal: Biosci Rep (2007): 257

Effects of caspase inhibitors (z-VAD-fmk, z-VDVAD-fmk) on Nile Red fluorescence pattern in 7-ketocholesterol-treated cells: investigation by flow cytometry and spectral imaging microscopy
Authors: Vejux A, Lizard G, Tourneur Y, Riedinger JM, Frouin F, Kahn E.
Journal: Cytometry A (2007): 550

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

说明书
胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK.pdf

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK) 货号13472-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)    货号13472 货号 13472 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 1272
Ex (nm) 559 Em (nm) 577
分子量 874.01 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,SRB-VAD是一种红色荧光细胞渗透性胱天蛋白酶抑制剂,可靶向caspase 1,2,3,6,8,9或10.一旦进入细胞内,该抑制剂与活性caspase共价结合,产生绿色荧光。当添加到细胞群中时,SRB-VAD-FMK探针进入每个细胞并共价结合位于活性胱天蛋白酶异二聚体的大亚基上的反应性半胱氨酸残基,从而抑制进一步的酶活性。结合的标记试剂保留在细胞内,而任何未结合的试剂将扩散出细胞并被洗掉。绿色荧光信号是添加试剂时细胞中存在的活性半胱天冬酶量的直接量度。可以通过基于96孔板的荧光测定法,荧光显微术或流式细胞术分析含有结合的标记试剂的细胞。该探针具有与Cy3®和TRITC类似的光谱特性,因此Cy3®和TRITC的滤光片组可以方便地与流式细胞仪或显微镜一起使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)。 

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产品说明书

样品操作及分析

以下方案仅提供指导,实际情况应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物检测胱天蛋白酶的常规方案

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针检测细胞Caspase的方案

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Suppression of human T cell proliferation by the caspase inhibitors, z-VAD-FMK and z-IETD-FMK is independent of their caspase inhibition properties
Authors: Lawrence CP, Chow SC.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol. (2012)

[Inhibition of elicitation of allergic contact dermatitis by topical use of Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment in mice]
Authors: Li YY, Yan CL.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2012): 1992

Intracochlear perfusion of leupeptin and z-VAD-FMK: influence of antiapoptotic agents on gunshot-induced hearing loss
Authors: Abaamrane L, Raffin F, Schmerber S, Sendowski I.
Journal: Eur Arch Otorhinolaryngol (2011): 987

Plasmodium falciparum metacaspase PfMCA-1 triggers a z-VAD-fmk inhibitable protease to promote cell death
Authors: Meslin B, Beavogui AH, Fasel N, Picot S.
Journal: PLoS One (2011): e23867

Structure of human caspase-6 in complex with Z-VAD-FMK: New peptide binding mode observed for the non-canonical caspase conformation
Authors: Muller I, Lamers MB, Ritchie AJ, Dominguez C, Munoz-Sanjuan I, Kiselyov A.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2011): 5244

Pretreatment with pancaspase inhibitor (Z-VAD-FMK) delays but does not prevent intraperitoneal heat-killed group B Streptococcus-induced preterm delivery in a pregnant mouse model
Authors: Equils O, Moffatt-Blue C, Ishikawa TO, Simmons CF, Ilievski V, Hirsch E.
Journal: Infect Dis Obstet Gynecol (2009): 749432

[Attenuation of allergic contact dermatitis by Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment with mice]
Authors: Li YY, Yan CL, Xu W.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2008): 3153

Bodipy-VAD-Fmk, a useful tool to study yeast peptide N-glycanase activity
Authors: Witte MD, Descals CV, de Lavoir SV, Florea BI, van der Marel GA, Overkleeft HS.
Journal: Org Biomol Chem (2007): 3690

Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
Authors: Heng BC, Clement MV, Cao T.
Journal: Biosci Rep (2007): 257

Effects of caspase inhibitors (z-VAD-fmk, z-VDVAD-fmk) on Nile Red fluorescence pattern in 7-ketocholesterol-treated cells: investigation by flow cytometry and spectral imaging microscopy
Authors: Vejux A, Lizard G, Tourneur Y, Riedinger JM, Frouin F, Kahn E.
Journal: Cytometry A (2007): 550

 

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产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
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说明书
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK).pdf

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK 货号13471-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK    货号13471 货号 13471 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 1272
Ex (nm) 578 Em (nm) 602
分子量 878.01 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,TF4 -VAD是一种红色荧光细胞渗透性polycaspase抑制剂靶向胱天蛋白酶1 ,2,3 ,6,8 ,9或10 。一旦进入细胞,所述抑制剂共价结合于胱天蛋白酶活性,其产生的绿色荧光。当加入到细胞群体中, TF4 -VAD -FMK探针进入每个细胞和共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的大亚基,从而抑制进一步的酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内,而任何未结合的试剂将扩散出细胞,并冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 – 孔板的基于荧光,荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。探针具有相似的Texas Red的光谱特性,从而Texas Red的滤波器集合®可以方便地用流式细胞仪或显微镜使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK。

点击查看光谱

产品说明书

样品实验方案  

样品操作及分析

以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Suppression of human T cell proliferation by the caspase inhibitors, z-VAD-FMK and z-IETD-FMK is independent of their caspase inhibition properties
Authors: Lawrence CP, Chow SC.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol. (2012)

[Inhibition of elicitation of allergic contact dermatitis by topical use of Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment in mice]
Authors: Li YY, Yan CL.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2012): 1992

Intracochlear perfusion of leupeptin and z-VAD-FMK: influence of antiapoptotic agents on gunshot-induced hearing loss
Authors: Abaamrane L, Raffin F, Schmerber S, Sendowski I.
Journal: Eur Arch Otorhinolaryngol (2011): 987

Plasmodium falciparum metacaspase PfMCA-1 triggers a z-VAD-fmk inhibitable protease to promote cell death
Authors: Meslin B, Beavogui AH, Fasel N, Picot S.
Journal: PLoS One (2011): e23867

Structure of human caspase-6 in complex with Z-VAD-FMK: New peptide binding mode observed for the non-canonical caspase conformation
Authors: Muller I, Lamers MB, Ritchie AJ, Dominguez C, Munoz-Sanjuan I, Kiselyov A.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2011): 5244

Pretreatment with pancaspase inhibitor (Z-VAD-FMK) delays but does not prevent intraperitoneal heat-killed group B Streptococcus-induced preterm delivery in a pregnant mouse model
Authors: Equils O, Moffatt-Blue C, Ishikawa TO, Simmons CF, Ilievski V, Hirsch E.
Journal: Infect Dis Obstet Gynecol (2009): 749432

[Attenuation of allergic contact dermatitis by Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment with mice]
Authors: Li YY, Yan CL, Xu W.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2008): 3153

Bodipy-VAD-Fmk, a useful tool to study yeast peptide N-glycanase activity
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Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
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胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

说明书
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 TF4-VAD-FMK.pdf

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK) 货号13482-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)    货号13482 货号 13482 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2472
Ex (nm) 559 Em (nm) 577
分子量 874.01 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,SRB-VAD是一种红色荧光细胞渗透性胱天蛋白酶抑制剂,可靶向caspase 1,2,3,6,8,9或10.一旦进入细胞内,该抑制剂与活性caspase共价结合,产生绿色荧光。当添加到细胞群中时,SRB-VAD-FMK探针进入每个细胞并共价结合位于活性胱天蛋白酶异二聚体的大亚基上的反应性半胱氨酸残基,从而抑制进一步的酶活性。结合的标记试剂保留在细胞内,而任何未结合的试剂将扩散出细胞并被洗掉。绿色荧光信号是添加试剂时细胞中存在的活性半胱天冬酶量的直接量度。可以通过基于96孔板的荧光测定法,荧光显微术或流式细胞术分析含有结合的标记试剂的细胞。该探针具有与Cy3®和TRITC类似的光谱特性,因此Cy3®和TRITC的滤光片组可以方便地与流式细胞仪或显微镜一起使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)。 

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样品操作及分析

以下方案仅提供指导,实际情况应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物检测胱天蛋白酶的常规方案

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针检测细胞Caspase的方案

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

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Intracochlear perfusion of leupeptin and z-VAD-FMK: influence of antiapoptotic agents on gunshot-induced hearing loss
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Bodipy-VAD-Fmk, a useful tool to study yeast peptide N-glycanase activity
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Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
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Effects of caspase inhibitors (z-VAD-fmk, z-VDVAD-fmk) on Nile Red fluorescence pattern in 7-ketocholesterol-treated cells: investigation by flow cytometry and spectral imaging microscopy
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产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

说明书
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK).pdf