Sirtinol 去乙酰化酶 ,sirt1 抑制剂 品牌:Adipogen CAS No.:410536-97-9


品牌:Adipogen
CAS No.:410536-97-9
储存条件:+4°C
纯度:>98% (NMR)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

AG-CR1-0055-M025

25 mg 1,980.00


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纯度:>=98%(NMR)

溶解性:溶于DMSO,100%乙醇,或者二甲基甲酰胺

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 货号13430-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿    货号13430 货号 13430 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1515.44 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Z-DEVD)2-R110是Caspase 9的荧光底物。因为高纯的罗丹明110(R110)衍生底物被置于内酯的构型内,因此是无色的,也不发出荧光。在Caspase蛋白酶(天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶)的作用下,切割R110上的多肽而获得具有强烈荧光的R110产物,该产物可在480nm(最常见的荧光检测仪上都具有这种激发光源)处被激发后,在510nm-530 nm处用荧光法检测。R110衍生的Caspase底物可能是被广泛用于检测多种Caspase酶活性的底物中最灵敏的荧光底物。我们的R110衍生底物是高纯度的,并保证经HPLC检测不出R110,因这些残留的R11可能会产生显著的本底干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿。

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产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

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说明书
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿.pdf

荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺 货号2109-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺

荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺

荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺    货号2109 货号 2109 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 5244
Ex (nm) Em (nm)
分子量 1109.24 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的淬灭剂,TQ7WS旨在成为Cy7,TF7和Alexa Fluor 750的优异猝灭剂。TQ7WS具有1.吸收更强; 2.淬火效率更高; 3.具有所需溶解度的多功能反应形式,用于标记寡核苷酸和肽。该TQ7WS产品主要用于标记肽。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺。 

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产品说明书

操作步骤

用Tide Quencher 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm单位)的专有寡核苷酸。您需要修改协议,以通过多次实验为您的特定应用程序获得最佳结果。您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.制备Oligo溶液(溶液A)将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话,反应可以孵育过夜。然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

a.将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

b.充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

c.将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

d.注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

f.小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

g.注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Quencher 染料标记肽

以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要修改方案,以便通过多个实验为您的特定应用程序提供最佳结果。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

2.2注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

4.2注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

4.3注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

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Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

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说明书
荧光淬灭剂Tide Quencher 7WS马来酰亚胺.pdf