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Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13503-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13503 货号 13503 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 3924
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光是AAT Bioquest研发的用于检测半胱天冬酶活性的试剂盒。半胱天冬酶在细胞凋亡和细胞信号传导中起重要作用。 Caspase 3/7（CPP32 / apopain）的激活对于细胞凋亡的起始是重要的。 Caspase 3/7也被鉴定为药物筛选靶标。半胱天冬酶抑制剂具有抗癌和其他药理学潜力。已经证明Caspase 3/7对肽序列Asp-Glu-Val-Asp（DEVD）具有底物选择性。

我们的Amplite 荧光Caspase 3/7检测试剂盒使用（Z-DEVD）2 R110作为荧光指示剂，用于检测caspase 3/7活性。R110衍生的半胱天冬酶底物可能是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的最敏感的指示剂。R110肽是无色和无荧光的。通过半胱天冬酶裂解R110肽产生强荧光R110，其可以在510-530nm下荧光测量，在488nm激发，这是最常见的激发光源。半胱天冬酶诱导的R110水解的荧光增加与半胱天冬酶的活性成比例。

Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光可用于使用荧光酶标仪或荧光计连续测量细胞提取物和纯化酶制剂中半胱天冬酶3/7的活性。许多实验室已使用该试剂盒筛选aspase 3/7抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的Caspase 检测试剂/试剂盒。

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Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13503

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射 525nm
cutoff： 515nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

96孔板的测定方案

 

概述

用测试化合物（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）

制备细胞体积的半胱天冬酶3/7测定溶液

在室温下孵育1小时

在Ex / Em = 490 / 525nm处监测荧光强度

 

操作方法

1.准备细胞：

1.1对于粘附细胞：在生长培养基中将细胞在20,000至80,000个细胞/孔/ 90L下过夜，96孔板或5,000至20,000个细胞/孔/ 20L，用于384孔板。

1.2对于非粘附细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮于培养基中，培养基浓度为80,000至200,000细胞/孔/ 90L，用于96孔poly-D赖氨酸平板或20,000至50,000细胞/孔/ 20L用于384孔聚-D赖氨酸板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.准备库存解决方案：

2.1在使用前，在室温下使用组分A，B，C（如果需要，组分D和E）。

2.2如果需要，制备1mM Caspase 3/7抑制剂Ac-DEVD-CHO储备液：将100μLDMSO（未提供）直接加入到Ac-DEVD-CHO小瓶（组分D）中。 该抑制剂可用于确认荧光信号强度与Caspase 3/7样蛋白酶活性之间的相关性。

注意：应将未使用的抑制剂储备液等分并在-20°C下干燥储存。

3.准备Caspase 3/7检测溶液：

将50μL200X胱天蛋白酶3/7底物储备溶液（组分A）和100μL1MDTT溶液（组分C）加入10mL测定缓冲液（组分B）中，并充分混合。

注意：50μL的200X caspase 3/7底物储备液足以进行100次测定，每次测定的反应体积为100μL。 未使用的200X caspase 3/7底物储备液应等分，在-20°C干燥储存，避光。

4.运行Caspase 3/7测定：

4.1通过将10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384-板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

4.2将细胞板在培养箱中孵育一段所需的时间（用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

4.3加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的半胱天冬酶3/7测定溶液（来自步骤3）。

4.4将板在室温下孵育至少1小时，避光。

注1：如果需要，在室温下加入测定溶液10分钟前，将1L Caspase 3/7抑制剂Ac-DEVD-CHO的1mM储备液（来自步骤2.2）加入选定的样品中，以确认Caspase 3 / 7个类似的活动。

注2：如果需要，通过将5mM R110标准品（组分E）稀释到生长培养基中制备R110标准曲线，得到系列稀释的R110标准品，范围为0-50M。将100μL连续稀释的R110标准品加入含有的孔中。 在测量荧光之前的任何时间，100μLCaspase3/7测定溶液。 该标准曲线可用于测定含有胱天蛋白酶3/7的反应中产生的产物的摩尔数。

4.5在制动器关闭的情况下，以800rpm离心细胞板（特别是对于非粘附细胞）2分钟。

4.6在Ex / Em = 490 / 525nm处观察荧光增加。

 

数据分析

        从具有细胞的那些孔值中减去具有生长培养基的空白孔中的荧光。空白孔的背景荧光根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。

Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13503

图1. Jurkat细胞中半胱天冬酶3/7活性的检测。 将Jurkat细胞在同一天以80,000个细胞/孔/ 90L接种在黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用20μM喜树碱处理细胞5小时，和/或用5μM半胱天冬酶3/7抑制剂AC-DEVD-CHO处理细胞10分钟。 加入半胱天冬酶3/7测定溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用NOVOstar仪器（BMG Labtech）在Ex / Em = 490 / 525nm下测量荧光强度。

 

参考文献

Curcumin and o-Vanillin Exhibit Evidence of Senolytic Activity in Human IVD Cells In Vitro
Authors: Hosni Cherif, Daniel G Bisson, Peter Jarzem, Michael Weber, Jean A Ouellet, Lisbet Haglund
Journal: Journal of Clinical Medicine (2019): 433

Mycoplasma pneumoniae protects infected epithelial cells from hydrogen peroxide-induced cell detachment.
Authors: Takeshi Yamamoto, Yutaka Kida, Koichi Kuwano
Journal: Cellular microbiology (2019): e13015

High STMN1 level is associated with chemo-resistance and poor prognosis in gastric cancer patients
Authors: Tuya Bai, Takehiko Yokobori, Bolag Altan, Munenori Ide, Erito Mochiki, Mitsuhiro Yanai, Akiharu Kimura, Norimichi Kogure, Toru Yanoma, Masaki Suzuki
Journal: British Journal of Cancer (2017)

The trivalent cerium-induced cell death and alteration of ion flux in sweetpotato [Ipomoea batatas (L.) Lam]
Authors: Jiaojiao Jiang, Jianzhong Hu, Zeyi Xie, Qinghe Cao, Daifu Ma, Yonghua Han, Zongyun Li
Journal: Journal of Rare Earths (2017)

Uncarboxylated Osteocalcin Induces Antitumor Immunity against Mouse Melanoma Cell Growth
Authors: Yoshikazu Hayashi, Tomoyo Kawakubo-Yasukochi, Akiko Mizokami, Mai Hazekawa, Tomiko Yakura, Munekazu Naito, Hiroshi Takeuchi, Seiji Nakamura, Masato Hirata
Journal: Journal of Cancer (2017): 2478–2486

Docetaxel induces Bcl-2-and pro-apoptotic caspase-independent death of human prostate cancer DU145 cells
Authors: Takeharu Ogura, Yoshiyuki Tanaka, Hiroki Tamaki, Mamoru Harada
Journal: International journal of oncology (2016): 2330–2338

NT1014, a novel biguanide, inhibits ovarian cancer growth in vitro and in vivo
Authors: Lu Zhang, Jianjun Han, Amanda L Jackson, Leslie N Clark, Joshua Kilgore, Hui Guo, Nick Livingston, Kenneth Batchelor, Yajie Yin, Timothy P Gilliam
Journal: Journal of Hematology & Oncology (2016): 91

Identification of an allosteric small-molecule inhibitor selective for the inducible form of heat shock protein 70
Authors: Matthew K Howe, Khaldon Bodoor, David A Carlson, Philip F Hughes, Yazan Alwarawrah, David R Loiselle, Alex M Jaeger, David B Darr, Jamie L Jordan, Lucas M Hunter
Journal: Chemistry & biology (2014): 1648–1659

 

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Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 黄色荧光 Cat#13507

说明书
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胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK 货号13475-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK 货号13475 货号 13475 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 1272
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 555.94 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂，FAM- VAD具有蓝色荧光细胞渗透性抑制靶向胱天蛋白酶1 ，2，3 ，6，8 ，9或10 。一旦进入细胞，所述抑制剂共价结合胱天蛋白酶，产生绿色荧光。当加入到细胞群体中， FAM- VAD -FMK探针进入每个细胞与共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的VAD-FMK，从而抑制酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内，而任何未结合的试剂将扩散出细胞，并冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 – 孔板的基于荧光，荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。该探头具有光谱性质类似于Pacific Blue®和BD Horizon V450 ，Pacific Blue这样的过滤器®和BD Horizon V450可以方便的用流式细胞仪或显微镜使用。该探头是特别设计用于多色检测半胱氨酸蛋白酶与紫激光装备 。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK。 

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产品说明书

样品操作及分析

以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Suppression of human T cell proliferation by the caspase inhibitors, z-VAD-FMK and z-IETD-FMK is independent of their caspase inhibition properties
Authors: Lawrence CP, Chow SC.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol. (2012)

[Inhibition of elicitation of allergic contact dermatitis by topical use of Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment in mice]
Authors: Li YY, Yan CL.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2012): 1992

Intracochlear perfusion of leupeptin and z-VAD-FMK: influence of antiapoptotic agents on gunshot-induced hearing loss
Authors: Abaamrane L, Raffin F, Schmerber S, Sendowski I.
Journal: Eur Arch Otorhinolaryngol (2011): 987

Plasmodium falciparum metacaspase PfMCA-1 triggers a z-VAD-fmk inhibitable protease to promote cell death
Authors: Meslin B, Beavogui AH, Fasel N, Picot S.
Journal: PLoS One (2011): e23867

Structure of human caspase-6 in complex with Z-VAD-FMK: New peptide binding mode observed for the non-canonical caspase conformation
Authors: Muller I, Lamers MB, Ritchie AJ, Dominguez C, Munoz-Sanjuan I, Kiselyov A.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2011): 5244

Pretreatment with pancaspase inhibitor (Z-VAD-FMK) delays but does not prevent intraperitoneal heat-killed group B Streptococcus-induced preterm delivery in a pregnant mouse model
Authors: Equils O, Moffatt-Blue C, Ishikawa TO, Simmons CF, Ilievski V, Hirsch E.
Journal: Infect Dis Obstet Gynecol (2009): 749432

[Attenuation of allergic contact dermatitis by Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment with mice]
Authors: Li YY, Yan CL, Xu W.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2008): 3153

Bodipy-VAD-Fmk, a useful tool to study yeast peptide N-glycanase activity
Authors: Witte MD, Descals CV, de Lavoir SV, Florea BI, van der Marel GA, Overkleeft HS.
Journal: Org Biomol Chem (2007): 3690

Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
Authors: Heng BC, Clement MV, Cao T.
Journal: Biosci Rep (2007): 257

Effects of caspase inhibitors (z-VAD-fmk, z-VDVAD-fmk) on Nile Red fluorescence pattern in 7-ketocholesterol-treated cells: investigation by flow cytometry and spectral imaging microscopy
Authors: Vejux A, Lizard G, Tourneur Y, Riedinger JM, Frouin F, Kahn E.
Journal: Cytometry A (2007): 550

 

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说明书
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ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产） 货号20201-AAT Bioquest荧光染料

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ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产）

ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产）

ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产） 货号20201 货号 20201 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 0
Ex (nm) 405 Em (nm) 600
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20201

产品名称：ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 

规格：100 Tests

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：405

发射波长(nm)：600

 

产品介绍

ApoBrite V570 caspase 3/7底物是美国AAT Bioquest生产的细胞功能探针，caspase 3/7的激活对于凋亡的启动很重要。我们的Cell Meter 无洗涤活细胞caspase活性测定试剂盒基于ApoBrite V570，这是我们最近开发的可渗透细胞的荧光caspase底物，这是第一种直接检测活细胞caspase活性的荧光探针。ApoBrite V600由三个部分组成，包括a）掩蔽的荧光团，b）半胱天冬酶选择性肽片段（DEVD），以及c）细胞穿透部分。细胞穿透部分将探针带入活细胞。一旦进入活细胞，胱天蛋白酶选择性肽片段被胱天蛋白酶切割以释放掩蔽的荧光团。恢复的荧光强度与要测量的胱天蛋白酶的活性直接相关。与活细胞中现有的半胱天冬酶测定相比，ApoBrite V570更加坚固，方便和准确。ApoBrite V570释放出具有较大斯托克斯位移的荧光团，并且可以通过大多数新型流式细胞仪上安装的紫激光来激发。如NucView试剂所报道的，它不需要DNA相互作用就能发荧光。如FMK肽探针所报道的，它不抑制胱天蛋白酶活性。尽管胱天蛋白酶的荧光FMK肽抑制剂被广泛用于检测活细胞中的胱天蛋白酶活性，但是该技术有一些严重的局限性：a）FMK半胱天冬酶抑制剂具有高细胞毒性，因为FMK肽与活性胱天蛋白酶共价结合。b）FMK肽与caspase不可逆地共价结合会抑制caspase活性，导致假阳性凋亡。C）FMK分析具有极高的背景，并需要大量洗涤，从而导致吞吐量很低；d）FMK肽在水溶液中不稳定，必须立即使用。

 

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

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ApoBrite U470 caspase 3/7底物 细胞渗透 Cat#20200

说明书
ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产）.pdf

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22798-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22798 货号 22798 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白，CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中，例如亨廷顿综合症，caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性，其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2-R110作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割R110肽产生强绿色荧光，其发射光在520 nm和530 nm之间，激发光为480 nm和500 nm之间。这种特性使得试剂盒能适合于FITC滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定，快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射： 525nm
cutoff： 515nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 顶或底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加（截止= 515 nm）

 

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意：Caspasae 8工作液不稳定，请及时使用。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

 

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（对于用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育30分钟至1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂，以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光增加。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22798

图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的caspase 8活性。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用20μM喜树碱处理细胞4小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用FlexStation 酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止值= 515nm）下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

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产品名称 货号
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22812
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 Cat#22816
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 Cat#22817

说明书
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 .pdf

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK 货号13307-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK 货号13307 货号 13307 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1200
Ex (nm) Em (nm)
分子量 654.69 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Z-LETD-FMK是一种细胞渗透性不可逆的caspase蛋白酶8抑制剂，与caspase-8的催化位点结合，在诱导凋亡中起重要作用。Z-LETD-FMK与caspase-8的结合抑制了该蛋白酶的活性，使其能够抑制与caspase-8激活相关的凋亡事件。为了抑制细胞凋亡，应在诱导细胞凋亡的同时添加Z-LETD-FMK。FMK衍生的肽可作为有效的不可逆抑制剂，而不会增加细胞毒性作用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Z-LETD-FMK。 

产品说明书

样品实验方案

以下是我们推荐的方案，仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。

 

溶液配制

储备溶液配制

Z-LETD-FMK储备溶液配制：在Z-LETD-FMK中添加适量的DMSO，制成2-5 mM Z-LETD-FMK储备液。注意：将未使用的Z-LETD-FMK储备溶液分装在-20°C下。

 

操作步骤

  1. 根据需要处理样品以诱导凋亡。
  2. 添加Z-LETD-FMK。
    注意：我们建议使用最终浓度为10-100 µM的Z-LETD-FMK抑制胱天蛋白酶，例如对caspase-8抑制50 µM。
    注意：孵育的最佳时间和浓度需要通过实验确定。
  3. 根据需要对样品染色。
  4. 用适当的仪器检测荧光强度。 

 

图示

 

 

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK 货号13307

图1.用caspase 8抑制剂Z-LETD-FMK（Cat＃13307）抑制Jurkat细胞中caspase 8活性。当天，将Jurkat细胞以200,000个细胞/ 90 µL /孔的密度接种在Costar黑色96孔板中。用1 µM星形孢菌素处理细胞5小时。加入Z-LETD-FMK并与星形孢菌素共孵育。用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒（Cat#22816）检测caspase-8活性。用Flexstation 3荧光酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em ＝ 540 / 620nm（截止＝ 610nm）下测量荧光强度。

 

 

参考文献

Rapamycin, an mTOR inhibitor, induced apoptosis via independent mitochondrial and death receptor pathway in retinoblastoma Y79 cell.
Authors: Wang, Yan-Dong and Su, Yong-Jing and Li, Jian-Ying and Yao, Xiang-Chao and Liang, Guang-Jiang
Journal: International journal of clinical and experimental medicine (2015): 10723-30

A polysaccharide from Sanguisorbae radix induces caspase-dependent apoptosis in human leukemia HL-60 cells.
Authors: Wu, Zhigang and Sun, Honghui and Li, Jingzhong and Ma, Chijiao and Zhao, Siqiao and Guo, Zheng and Lin, Yao and Lin, Yaping and Liu, Li
Journal: International journal of biological macromolecules (2014): 615-20

Use of fluorochrome-labeled inhibitors of caspases to detect neuronal apoptosis in the whole-mounted lamprey brain after spinal cord injury.
Authors: Barreiro-Iglesias, Antón and Shifman, Michael I
Journal: Enzyme research (2012): 835731

Caspase-8 and p38MAPK in DATS-induced apoptosis of human CNE2 cells.
Authors: Ji, C and Ren, F and Xu, M
Journal: Brazilian journal of medical and biological research = Revista brasileira de pesquisas medicas e biologicas (2010): 821-7

[Synergistic effects and mechanisms of combined tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand and chemotherapeutic drugs or radiotherapy in killing laryngeal squamous carcinoma cells in vitro].
Authors: Zhang, Ming and Zhou, Liang
Journal: Zhonghua er bi yan hou tou jing wai ke za zhi = Chinese journal of otorhinolaryngology head and neck surgery (2009): 565-70

Emodin azide methyl anthraquinone derivative triggers mitochondrial-dependent cell apoptosis involving in caspase-8-mediated Bid cleavage.
Authors: Yan, Yanyan and Su, Xiaodong and Liang, Yongju and Zhang, Jianye and Shi, Chengjun and Lu, Yu and Gu, Lianquan and Fu, Liwu
Journal: Molecular cancer therapeutics (2008): 1688-97

Caspase-9 takes part in programmed cell death in developing mouse kidney.
Authors: Araki, Takashi and Hayashi, Matsuhiko and Nakanishi, Keiko and Morishima, Nobuhiro and Saruta, Takao
Journal: Nephron. Experimental nephrology (2003): e117-24

Induction of apoptosis in human leukemia cells by the CDK1 inhibitor CGP74514A.
Authors: Dai, Yun and Dent, Paul and Grant, Steven
Journal: Cell cycle (Georgetown, Tex.): 143-52

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